Studie voor de detectie van van een donor afkomstig celvrij DNA na niertransplantatie met behulp van Devysers NGS-gebaseerde chimerisme-assay.

Elk jaar ondergaan 40-60 patiënten een niertransplantatie met een levende donor (LD) in het Karolinska Universitair Ziekenhuis. Voorafgaand aan de transplantatie worden deze patiënten en hun donoren onderzocht op hun immunologische compatibiliteit. Dit omvat cytotoxische en flowcytometrische kruisproeven, HLA-typering en bepaling van de mogelijke aanwezigheid van panel-reactieve HLA-antilichamen (PRA). Normaal gesproken worden deze onderzoeken 2-3 maanden voorafgaand aan de niertransplantatie uitgevoerd. Zodra een patiënt is geaccepteerd voor transplantatie met een bepaalde levende donor, wordt hem voorafgaand aan de transplantatie gevraagd of hij geïnteresseerd is in deelname aan de huidige studie. Als de patiënt en de donor akkoord gaan, nemen we voorafgaand aan de transplantatie 15 ml bloed af met behulp van geschikte monsterafnamebuisjes (Cell-Free BCT-buisjes). Dit monster zal worden gebruikt voor het screenen van patiënt en donor op specifieke genetische markers. Bovendien zullen de pretransplantatiemonsters worden gebruikt om de aan- of afwezigheid van HLA-antilichamen voor elke patiënt te bepalen. We streven ernaar om maximaal 50 patiënten in de huidige studie op te nemen.

Gedurende de eerste 24-48 uur na transplantatie worden nog twee monsters (10 ml) van de patiënt verzameld om de mogelijke aanwezigheid van dd-cfDNA te meten, inclusief celvrije deeltjes zoals exosomen. Het celvrije DNA en RNA van alle monsters wordt geëxtraheerd, ingevroren bewaard en later gesequenced. Na de transplantatie en het starten van de immunosuppressieve therapie zullen gedurende maximaal 3 maanden eenmaal per week monsters voor analyse worden genomen. Alle verzamelde monsters worden onmiddellijk geanalyseerd of ingevroren voor toekomstige analyse. Opgeslagen ingevroren monsters kunnen op een later tijdstip worden ontdooid, gegroepeerd en geanalyseerd met behulp van moleculaire technieken, waaronder sequencing voor het meten van dd-cfDNA of analyse van de aanwezigheid van HLA-antilichamen met behulp van commerciële bead-technologieën (Luminex of Immucor). De resultaten van deze assays zullen worden toegevoegd aan een speciale database. De verkregen laboratoriumresultaten zullen worden vergeleken met de klinische resultaten, waaronder de overleving van het transplantaat, de overleving van de patiënt, klinische en subklinische afwijzingen enz., evenals andere laboratoriumgegevens (bijv. resultaten van pathologisch onderzoek van het transplantaat, klinische chemie, concentratie van immunosuppressiva enz.).