Studio per il rilevamento di DNA libero da cellule derivato da donatore dopo trapianto renale utilizzando il test del chimerismo basato su NGS di Devysers.

Ogni anno 40-60 pazienti vengono sottoposti a trapianto renale con un donatore vivente (LD) presso il Karolinska University Hospital. Prima del trapianto, questi pazienti ei loro donatori vengono studiati per la loro compatibilità immunologica. Ciò include i crossmatch citotossici e citometrici a flusso, la tipizzazione HLA e la determinazione della possibile presenza di anticorpi HLA reattivi al pannello (PRA). Normalmente queste indagini vengono eseguite 2-3 mesi prima del trapianto renale. Una volta che un paziente è stato accettato per il trapianto con un dato donatore vivente, gli verrà chiesto, prima del trapianto, se è interessato a partecipare al presente studio. Se il paziente e il donatore accettano, raccoglieremo 15 ml di sangue prima del trapianto utilizzando apposite provette per la raccolta del campione (provette BCT senza cellule). Questo campione verrà utilizzato per lo screening del paziente e del donatore per marcatori genetici specifici. Inoltre, i campioni pretrapianto verranno utilizzati per determinare la presenza o l'assenza di anticorpi HLA per ciascun paziente. Miriamo a includere fino a 50 pazienti nello studio attuale.

Durante le prime 24-48 ore dopo il trapianto, verranno raccolti altri due campioni (10 mL) dal paziente per misurare la potenziale presenza di dd-cfDNA incluse particelle prive di cellule come gli esosomi. Il DNA e l'RNA liberi da tutti i campioni saranno estratti, conservati congelati e successivamente sequenziati. Dopo il trapianto e l'inizio della terapia immunosoppressiva, i campioni per l'analisi saranno prelevati una volta alla settimana per un massimo di 3 mesi. Tutti i campioni raccolti verranno analizzati immediatamente o congelati per analisi future. I campioni congelati conservati potrebbero, in un momento successivo, essere scongelati, raggruppati e analizzati utilizzando tecniche molecolari, tra cui il sequenziamento per la misurazione del dd-cfDNA o l'analisi della presenza di anticorpi HLA utilizzando tecnologie di microsfere commerciali (Luminex o Immucor). I risultati di questi test verranno aggiunti a un database dedicato. I risultati di laboratorio ottenuti saranno confrontati con l'esito clinico, inclusa la sopravvivenza del trapianto, la sopravvivenza del paziente, i rigetti clinici e subclinici, ecc., nonché altri dati di laboratorio (ad es. risultati dell'esame patologico dell'innesto, chimica clinica, concentrazione di farmaci immunosoppressori ecc.).