Badanie w celu wykrycia wolnego od komórek DNA pochodzącego od dawcy po przeszczepie nerki przy użyciu testu chimeryzmu opartego na Devysers NGS.

Każdego roku 40-60 pacjentów poddawanych jest przeszczepowi nerki od żywego dawcy (LD) w Szpitalu Uniwersyteckim Karolinska. Przed przeszczepem ci pacjenci i ich dawcy są badani pod kątem zgodności immunologicznej. Obejmuje to próby krzyżowe cytotoksyczne i cytometryczne, typowanie HLA, a także określenie możliwej obecności panelowo-reaktywnych przeciwciał HLA (PRA). Zwykle badania te wykonuje się 2-3 miesiące przed przeszczepieniem nerki. Po przyjęciu chorego do przeszczepu u danego żywego dawcy, przed przeszczepem zostanie on zapytany, czy jest zainteresowany udziałem w niniejszym badaniu. Jeśli pacjent i dawca wyrażą zgodę, pobierzemy 15 ml krwi przed przeszczepem, używając odpowiednich probówek do pobierania próbek (probówki BCT bez komórek). Ta próbka zostanie wykorzystana do badań przesiewowych pacjenta i dawcy pod kątem określonych markerów genetycznych. Ponadto próbki pobrane przed przeszczepem zostaną użyte do określenia obecności lub braku przeciwciał HLA u każdego pacjenta. Naszym celem jest włączenie do obecnego badania do 50 pacjentów.

W ciągu pierwszych 24-48 godzin po przeszczepie od pacjenta zostaną pobrane jeszcze dwie próbki (10 ml) w celu zmierzenia potencjalnej obecności dd-cfDNA, w tym cząstek wolnych od komórek, takich jak egzosomy. Wolne od komórek DNA i RNA ze wszystkich próbek zostaną wyekstrahowane, przechowywane w stanie zamrożonym, a następnie zsekwencjonowane. Po transplantacji i rozpoczęciu leczenia immunosupresyjnego próbki do analizy będą pobierane raz w tygodniu przez okres do 3 miesięcy. Wszystkie pobrane próbki zostaną natychmiast przeanalizowane lub zamrożone do przyszłych analiz. Przechowywane zamrożone próbki można w późniejszym czasie rozmrażać, grupować i analizować przy użyciu technik molekularnych, w tym sekwencjonowania do pomiaru dd-cfDNA lub analizy obecności przeciwciał HLA przy użyciu komercyjnych technologii perełek (Luminex lub Immucor). Wyniki tych testów zostaną dodane do dedykowanej bazy danych. Uzyskane wyniki laboratoryjne zostaną porównane z wynikami klinicznymi, w tym przeżyciem przeszczepu, przeżyciem pacjenta, odrzutami klinicznymi i subklinicznymi itp., a także innymi danymi laboratoryjnymi (np. wynika z badania histopatologicznego przeszczepu, chemii klinicznej, stężenia leków immunosupresyjnych itp.).