都市環境に住む授乳中のセネガル女性におけるレチノールと TBS の動態、および TBS と乳児の TBS との関係 (TBS)

具体的な目的は次のとおりです。

トレーサーの母乳への移行を決定する 数学的モデリングを使用して複合係数 (FaS) を決定する 生成された係数と母親間の RID 式を使用して TBS を推定する 母親間の物質収支式を使用して母乳レチノールから TBS を推定する から TBS を推定する母親とその子供の間の物質収支方程式を使用した血清レチノール 母親の間で異なる方法（RID方程式、血清または母乳由来レチノールを使用した物質収支方程式）で測定されたTBS間の一致を評価する 母親とその子供の間の関係を評価する状態に応じた子供の TBS 母子ペアのビタミン A の食事摂取量を評価する

この研究は、「ワンダーウーマン モデル」に従って設計されています。 ダカール市で実施されます。 合計56組の授乳中の母子ペアが研究に含まれます。 女性はそれぞれ7人の女性の8つのグループに分けられます。 このサンプル サイズには、15% の減少率が含まれています。

ベースライン (0 日目) で、一晩絶食した後、すべての女性から血液サンプルを採取します。 女性はまた、カジュアルな牛乳サンプルを提供するよう求められます. 次に、各女性に 2.0 μmol の 13C2 -酢酸レチニルを経口投与します (Gannon et al., 2014; Kaliwile et al., 2021)。 その後、参加者はピーナッツ バター ベースのスナックを摂取して脂肪を供給し、用量の吸収を改善します。 女性はまた、14日目にフォローアップサンプルを採取します. ベースラインに関しては、フォローアップの牛乳サンプルが収集されます。 血液と乳汁の両方の短期サンプリングは、0 日目から 14 日目までと 14 日目から 109 日目の間に行われます。 合計で、各女性は 4 つの血液サンプルと 4 つのミルク サンプルを経時的に採取します。

乳児の場合、RID テストは 14 日目に開始されます。 ベースラインの血液の後、1.0μmolの13C2-酢酸レチニルを受け取り、28日目に2回目の血液サンプルを採取します。 したがって、乳児には 2 つの血液サンプルがあります。

プロトコールは母親に説明され、母親から書面による同意が得られます。授乳中の母子ペアは、研究プロトコルを開始する前に駆虫されます。

血液サンプルをアルミホイルで遮光し、3500 rpm で 15 分間遠心分離して血餅から血清を分離します。 すべての遠心分離は、採血後 1 時間以内に遠心分離機を使用して行います。 血清は無菌の極低温バイアルに分注し、研究室で-80 ° C で保存されます。

牛乳サンプルに関しては、2 つの凍結バイアルで 2 つのアリコートを調製し、野外では +4°C、実験室では -80°C で保存します。

インタビュアーが管理するアンケートにより、母子ペアから背景情報と食事データを収集できます。 母子ペアの食事摂取量は、連続しない日に 2 つの定量的な 24 時間の食事リコールを使用して評価されます (FAO, 2018)。 女性の最小食事多様性 (MDD-W) も、24 時間の食事リコールから決定されます。 子供については、最新の WHO/UNICEF 勧告 (WHO/UNICEF, 2021) に従って、乳幼児の給餌慣行指標が評価されます。

標準的な手順に従って、母子ペアの栄養状態を評価するために人体測定が行われます。

サンプル分析:

血清レチノール濃度は、HPLCによって行われます。 血清および牛乳中の 13C の天然存在量は、ガスクロマトグラフィー-燃焼-同位体比質量分析法 (GC-C-IRMS) によって測定されます。 CRP と AGP は Biosystems A15 自動分析装置で測定されます。 レチニルエステルと血清カロテノイドは、超高性能液体クロマトグラフィー (UPLC) によって行われます。

貧血は、HemoCue システム (Hb-301) を使用して全血中のヘモグロビン (Hb) を測定することによって評価され、マラリア検査は SD BIOLINE マラリア抗原 P.f/Pan1 テストを使用して実行されます。

母子ペアのサブサンプルの唾液サンプルをさらに分析して、母親の重水素同位体希釈法による乳汁産生を測定します。 唾液サンプルの重水素濃縮は、フーリエ変換赤外分光計（FTIR Shimadzu IR Affinity、京都、日本）で測定されます。

母親のレチノール動態のモデル化:

血清と母乳のレチノール濃度と同位体濃縮データを使用して、スーパーウーマンのデータセットを生成します。 モデルベースのコンパートメント分析は、ビタミン A 代謝の確立されたモデル (Green et al., 2020; Gannon et al., 2018) を使用し、これらのモデルを拡張してトレーサー転送を組み込むことにより、スーパー女性の血清および母乳濃縮に関する同位体トレーサー データに適用されます。母乳に。

Fa および S 因子の決定:

モデルベースのコンパートメント分析からの出力には、生理学に基づくコンパートメント間のビタミン A 移動率の推定値と、結果として得られるモデルの結果が含まれます。追跡された総質量、半減期、分別異化率、廃棄率、平衡時間、および血清/身体トレーサー分配 (因子 S)。 吸収の仮定を使用して、サンプリング時に吸収および保存されたトレーサー線量の量 (係数 Fa およびその他の関連する方程式係数に関連する) が決定されます。

TBS 計算:

物質収支式: 血清中のトレーサーとトレーサーの同位体比 (TTR) (標識されていないレチノール) を使用して、適切な仮定の下で次の式を使用して全身 VA ストア (TBS) を推定します。

TBS (μmol)= a × 1/TTR× (吸収と貯蔵の補正係数) a は投与量 RID 式: TBS (μmol)= Fa × S × (1/〖SAp〗) Fa は、経口トレーサーの吸収および保存量 S は、血漿中のレチノール (標識レチノール / 非標識レチノール) の比活性と、用量平衡後の肝臓中の比活性の比です。 SAp は、血漿中のレチノール (標識レチノール / 非標識レチノール) の比活性です。 .

母親の場合、Fa と S は数学的モデリングを使用して計算され、SAp は分析的に決定されます。 子の間では、Fa と S の一般的な値が使用されます。

統計分析：

データ入力と品質管理は、Epi infoTM 7.2.3.1 を使用して実行されます。 Epi infoTM 3.5.1 (疾病管理予防センター) および Microsoft Excel 2016 (Microsoft Corporation)。 統計分析は、STATA/SE 14.0 (STATA Corporation) を使用して実行されます。 記述分析を使用して、研究集団の特性を表にします。 カテゴリ変数はパーセンテージで表され、連続変数は正規分布変数の平均 ± SD および歪んだ値の四分位範囲の中央値として表されます。 両側スチューデント t 検定、対応のある t 検定、または一元配置分散分析 (ANOVA) に続いて、ボンフェローニの事後比較検定を使用して平均値を比較し、ウィルコクソン順位和検定を使用して中央値を比較します。 ピアソンのカイ 2 乗検定、フィッシャーの正確確率検定、またはマクネマーのカイ 2 乗検定を使用してパーセンテージを比較します。 適切な合意テストが実行されます。 すべての統計分析段階は、経験豊富な統計学者が適切な方法論を使用して実行し、適切で信頼できる結果を保証します。