A retinol és a TBS kinetikája a városi környezetben élő szoptató szenegáli nők körében, valamint a TBS és a csecsemőik közötti kapcsolat (TBS)

A konkrét célok a következők:

A nyomjelző anyatejbe való átjutásának meghatározása A kompozit együttható (FaS) meghatározása matematikai modellezéssel A TBS becslése a generált együtthatók és a RID egyenlet segítségével anyák között Az anyatejből származó retinol TBS becslése az anyák közötti tömegmérleg egyenlet segítségével A TBS becslése szérum retinol a tömegegyensúly egyenlet segítségével anyák és gyermekeik között Különböző módszerekkel mért TBS (RID egyenlet, szérum vagy anyatejből származó retinol felhasználásával végzett tömegmérleg egyenlet) közötti egyezés felmérése anyák között Az anyák és gyermekeik közötti kapcsolat értékelése gyermekek TBS állapota szerint Az A-vitamin étrendi bevitelének felmérése anya-gyermek párok között

A tanulmány a "Wonder women" modell alapján készült. Dakar városában valósítják meg. Összesen ötvenhat (56) szoptató anya-gyermek pár kerül be a vizsgálatba. A nőket 8, egyenként 7 nőből álló csoportra osztják. Ez a mintaméret 15%-os kopási arányt tartalmaz.

Kiinduláskor (0. nap) minden nőtől vérmintát vesznek egy éjszakai böjt után. A nőket arra is felkérik, hogy alkalmi tejmintát adjanak. Ezután minden nő szájon át 2,0 μmol 13C2-retinil-acetátot kap (Gannon és mtsai, 2014; Kaliwile és mtsai, 2021). Ezt követően a résztvevők mogyoróvaj alapú snacket fogyasztanak, hogy zsírt biztosítsanak az adag felszívódásának javítása érdekében. A nőktől a 14. napon mintát is vesznek. Ami az alapállapotot illeti, nyomon követési tejmintát vesznek. Mind a vér, mind a tej rövid távú mintavétele a 0. és 14. nap, valamint a 14. és 109. nap között történik. Összesen minden nőtől 4 vér- és 4 tejmintát vesznek az idő múlásával.

Csecsemőknél a RID-teszt a 14. napon kezdődik. A kiindulási vért követően 1,0 μmol 13C2-retinil-acetátot kapnak, és a 28. napon egy második vérmintát is kapnak. Így a csecsemők 2 vérmintát kapnak.

A jegyzőkönyvet elmagyarázzák az anyának, és írásos beleegyezését kérik tőle. A szoptató anya-csecsemő párokat a kutatási protokoll megkezdése előtt féregtelenítik.

A vérmintákat alufóliával védik a fénytől, és 3500 fordulat/perc sebességgel centrifugálják 15 percig, hogy elválasszák a szérumot a vérrögtől. Minden centrifugálást a vérmintavételt követő órában kell elvégezni centrifuga segítségével. A szérumot steril kriogén fiolákba osztják, és -80 °C-on tárolják a laboratóriumban.

A tejmintákból 2 alikvot részt készítünk 2 kriovialban, és a szántóföldön +4°C-on, a laboratóriumban pedig -80°C-on tároljuk.

A kérdező által kiadott kérdőív lehetővé teszi az anya-csecsemő párok háttérinformációinak és étrendi adatainak összegyűjtését. Az anya-csecsemő párok étrendi bevitelét 2 mennyiségi, 24 órás étrend-felidézéssel értékelik a nem egymást követő napokon (FAO, 2018). A nők minimális étrendi sokféleségét (MDD-W) szintén a 24 órás étrend-visszahívások alapján határozzák meg. A gyermekek esetében a csecsemők és kisgyermekek táplálására vonatkozó mutatók értékelése a WHO/UNICEF legújabb ajánlásai alapján történik (WHO/UNICEF, 2021).

Az anya-csecsemő párok tápláltsági állapotának értékelésére antropometrikus méréseket végeznek a szokásos eljárások szerint.

Mintaelemzés:

A szérum retinol koncentrációját HPLC-vel határozzuk meg. A 13C természetes mennyiségét a szérumban és a tejben gázkromatográfia-égés-izotóp-arány tömegspektrometriával (GC-C-IRMS) mérjük. A CRP-t és az AGP-t a Biosystems A15 automata analizátor fogja mérni. A retinil-észtereket és a szérum karotinoidokat Ultra-Performance Liquid Chromatography (UPLC) segítségével végezzük.

A vérszegénység értékelése a teljes vérben a hemoglobin (Hb) mérésével történik HemoCue rendszer (Hb-301) segítségével, a maláriavizsgálat pedig az SD BIOLINE Malaria Antigen P.f/Pan1 tesztekkel történik.

Az anya-gyerek pár almintájának nyálmintáin további elemzéseket végeznek a tejtermelés mérésére az anya-dózisú deutérium-izotópos hígítási módszerrel. A nyálminták deutériumdúsítását Fourier transzformációs infravörös spektrométerrel (FTIR Shimadzu IR Affinity, Kyoto, Japán) mérjük.

A retinol kinetikájának modellezése az anyák körében:

A szérum és az anyatej retinolkoncentrációira és az izotópdúsítási adatokra a szupernői adatkészletek generálására kerül sor. Modellalapú kompartmentális elemzést alkalmaznak a szupernők ​​szérum- és anyatejdúsítási izotóp-nyomkövető adataira, az A-vitamin metabolizmusának bevált modelljei (Green és mtsai, 2020; Gannon és mtsai, 2018) felhasználásával, és ezeket a modelleket a nyomjelző transzfer beépítésével. az anyatejhez.

Fa és S faktorok meghatározása:

A modell alapú kompartmentális elemzés kimenetei magukban foglalják az A-vitamin átviteli sebességére vonatkozó becsléseket a fiziológiai alapú kompartmentek között, és az ebből eredő modelleredményeket; teljes nyomon követhető tömeg, felezési idő, frakcionált katabolikus sebesség, selejtezési sebesség, egyensúlyi idő és szérum/test nyomjelző megoszlás (S faktor). Az abszorpciós feltevések felhasználásával meg kell határozni a mintavételkor elnyelt és tárolt nyomjelző dózis mennyiségét (az Fa faktorral és más kapcsolódó egyenletegyütthatókkal kapcsolatban).

TBS számítás:

Tömegegyensúlyi egyenlet: A nyomjelző és nyomelem (TTR) (jelöletlen retinol) izotóp arányát a szérumban a teljes test VA-raktárak (TBS) becsléséhez a következő egyenlet alkalmazásával, megfelelő feltevések mellett:

TBS (μmol) = a × 1/TTR× (az abszorpció és tárolás korrekciós tényezői) a a dózis mennyisége RID egyenlet: TBS (μmol) = Fa × S × (1/〖SAp〗) Fa a Az orális nyomjelző dózis felszívódott és a raktárban megmaradt S a retinol (jelölt retinol/jelöletlen retinol) fajlagos aktivitásának aránya a plazmában és a májban a dóziskiegyenlítés után SAp a retinol (jelölt retinol/jelöletlen retinol) fajlagos aktivitása a plazmában .

Anyák esetében az Fa és S értékét matematikai modellezéssel számítják ki, míg az SAp-t analitikusan határozzák meg. Gyermekeknél a Fa és S általános értékeit kell használni.

Statisztikai analízis:

Az adatbevitel és a minőségellenőrzés az Epi infoTM 7.2.3.1 használatával történik, Epi infoTM 3.5.1 (Centers for Disease Control and Prevention) és Microsoft Excel 2016 (Microsoft Corporation). A statisztikai elemzés a STATA/SE 14.0 (STATA Corporation) használatával történik. Leíró elemzést használunk a vizsgálati sokaság jellemzőinek táblázatba foglalásához. A kategorikus változókat százalékban, a folytonos változókat pedig átlag ± SD-ben fejezzük ki normál eloszlású változók esetén, a mediánt pedig interkvartilis tartományban ferde értékek esetén. Kétirányú Student-féle t-próbát, páros t-próbát vagy egytényezős varianciaanalízist (ANOVA), majd Bonferroni post-hoc összehasonlító tesztjét használjuk az átlagok összehasonlítására, míg a Wilcoxon rang-összeg tesztet a mediánok összehasonlítására. Pearson khi-négyzet tesztje, Fisher egzakt tesztje vagy McNemar khi-négyzet tesztje használható a százalékok összehasonlítására. Megfelelő megállapodási teszteket végeznek. Az összes statisztikai elemzési szakaszt tapasztalt statisztikus végzi a megfelelő módszertan használatával a megfelelő és megbízható eredmények biztosítása érdekében.