Retinolin ja TBS:n kinetiikka kaupunkiympäristössä elävien imettävien senegalilaisten naisten keskuudessa ja heidän TBS:n ja heidän vauvojensa välinen suhde (TBS)

Erityistavoitteet ovat:

Merkkiaineen siirtymisen rintamaitoon määrittäminen Yhdistelmäkertoimen (FaS) määrittäminen matemaattista mallintamista käyttäen TBS:n arvioiminen generoitujen kertoimien ja RID-yhtälön avulla äitien kesken. TBS:n arvioiminen äidinmaidon retinolista käyttämällä massatasapainoyhtälöä äitien välillä. seerumin retinoli äitien ja heidän lastensa massatasapainoyhtälön avulla Arvioida eri menetelmillä mitatun TBS:n (RID-yhtälö, seerumin tai äidinmaidon maidosta peräisin olevaa retinolia käyttävä massatasapainoyhtälö) välistä suhdetta äitien kesken Arvioida äitien ja lasten välistä suhdetta. lasten TBS tilan mukaan Arvioida A-vitamiinin saanti ravinnosta äiti-lapsi parien kesken

Tutkimus on suunniteltu "Wonder Women -mallin" mukaisesti. Se toteutetaan Dakarin kaupungissa. Tutkimukseen osallistuu yhteensä viisikymmentäkuusi (56) imettävää äiti-lapsi-paria. Naiset jaetaan 8 ryhmään, joissa kussakin on 7 naista. Tämä otoskoko sisältää 15 %:n poistumisasteen.

Lähtötilanteessa (päivä 0) kaikilta naisilta otetaan verinäytteitä yön yli paaston jälkeen. Naisia ​​pyydetään myös antamaan satunnaisia ​​maitonäytteitä. Tämän jälkeen jokaiselle naiselle annetaan suun kautta 2,0 μmol 13C2-retinyyliasetaattia (Gannon ym., 2014; Kaliwile et al., 2021). Myöhemmin osallistujat nauttivat maapähkinävoipohjaista välipalaa antaakseen rasvaa parantaakseen annoksen imeytymistä. Naisille otetaan myös seurantanäyte päivänä 14. Mitä tulee lähtötilanteeseen, seurantamaitonäyte kerätään. Lyhytaikainen näytteenotto verestä ja maidosta tapahtuu päivien 0 ja 14 välillä ja päivien 14 ja 109 välillä. Kaiken kaikkiaan jokaiselta naiselta otetaan 4 veri- ja 4 maitonäytettä ajan mittaan.

Imeväisille RID-testi alkaa päivänä 14. Perusveren jälkeen he saavat 1,0 μmol 13C2-retinyyliasetaattia ja heiltä otetaan toinen verinäyte päivänä 28. Siten pikkulapsilta otetaan 2 verinäytettä.

Protokolla selitetään äidille ja häneltä hankitaan kirjallinen suostumus. Imettävät äiti-vauva-parit madotetaan ennen tutkimusprotokollan aloittamista.

Verinäytteet suojataan valolta alumiinifoliolla ja sentrifugoidaan nopeudella 3500 rpm 15 minuuttia seerumin erottamiseksi hyytymisestä. Kaikki sentrifugoinnit tehdään verinäytteen ottoa seuraavan tunnin aikana ja käytetään sentrifugia. Seerumi jaetaan eriin steriileihin kryogeenisiin pulloihin ja säilytetään -80 °C:ssa laboratoriossa.

Maitonäytteistä valmistetaan 2 alikvoottia 2 kryovialissa ja säilytetään +4°C:ssa pellolla ja -80°C:ssa laboratoriossa.

Haastattelijan hallinnoima kyselylomake mahdollistaa taustatietojen ja ruokavaliotietojen keräämisen äiti-vauva-pareista. Äiti-vauva-parien ravinnonsaanti arvioidaan käyttämällä kahta kvantitatiivista 24 tunnin ruokavalion palautusta ei-peräkkäisinä päivinä (FAO, 2018). Naisten ruokavalion vähimmäismonimuotoisuus (MDD-W) määritetään myös 24 tunnin ruokavalion takaisinkutsuista. Lasten osalta imeväisten ja pienten lasten ruokintakäytäntöjen indikaattorit arvioidaan uusimpien WHO/UNICEF-suositusten (WHO/UNICEF, 2021) mukaisesti.

Antropometrisia mittauksia suoritetaan äiti-vauva-parien ravitsemustilan arvioimiseksi standardimenetelmien mukaisesti.

Esimerkkianalyysi:

Seerumin retinolin pitoisuus määritetään HPLC:llä. 13C:n luonnollinen runsaus seerumissa ja maidossa mitataan kaasukromatografia-poltto-isotooppisuhdemassaspektrometrialla (GC-C-IRMS). CRP ja AGP mitataan Biosystems A15 automaattisella analysaattorilla. Retinyyliesterit ja seerumin karotenoidit tehdään Ultra-Performance Liquid Chromatography (UPLC) -menetelmällä.

Anemiaa arvioidaan mittaamalla hemoglobiini (Hb) kokoverestä HemoCue-järjestelmällä (Hb-301) ja malariatestaus tehdään SD BIOLINE Malaria Antigen P.f/Pan1 -testeillä.

Lisäanalyysit tehdään sylkinäytteistä äiti-lapsi-parin osanäytteessä maidontuotannon mittaamiseksi äiti-annos-deuterium-isotooppilaimennusmenetelmällä. Sylkinäytteiden deuteriumrikastuminen mitataan Fourier-muunnos-infrapunaspektrometrillä (FTIR Shimadzu IR Affinity, Kioto, Japani).

Retinolikinetiikan mallinnus äitien keskuudessa:

Seerumin ja rintamaidon retinolipitoisuuksia ja isotooppirikastustietoja käytetään supernaisten tietokokonaisuuksien luomiseen. Mallipohjaista osastoanalyysiä sovelletaan supernaisten isotooppimerkkitietoihin seerumin ja rintamaidon rikastamista varten käyttämällä vakiintuneita A-vitamiinin aineenvaihdunnan malleja (Green et al., 2020; Gannon et al., 2018) ja laajentamalla näitä malleja sisältämään merkkiaineen siirron. äidinmaitoon.

Fa- ja S-tekijöiden määrittäminen:

Mallipohjaisen osastoanalyysin tulokset sisältävät arvioita A-vitamiinin siirtonopeuksista fysiologisesti perustuvien osastojen välillä ja tuloksena saadut mallin tulokset; jäljitetty kokonaismassa, puoliintumisaika, katabolinen murtonopeus, hävitysnopeus, tasapainotusaika ja seerumin/kehon merkkiaineen jakautuminen (tekijä S). Absorptio-oletusten avulla määritetään näytteenottohetkellä absorboituneen ja varastoidun merkkiaineen määrä (suhteessa tekijään Fa ja muihin vastaaviin yhtälökertoimiin).

TBS-laskenta:

Massatasapainon yhtälö: Merkkiaineen ja hivenaineen (TTR) (leimaamaton retinoli) isotooppisuhdetta seerumissa käytetään arvioimaan kehon VA-varastot (TBS) käyttämällä seuraavaa yhtälöä asianmukaisin oletuksin:

TBS (μmol) = a × 1/TTR× (absorption ja varastoinnin korjauskertoimet) a on annosmäärän RID-yhtälö: TBS (μmol) = Fa × S × (1/〖SAp〗) Fa on osa oraalinen merkkiaineannos imeytyy ja säilyy varastoissa S on plasmassa olevan retinolin (merkitty retinoli/leimaamaton retinoli) spesifisen aktiivisuuden suhde maksassa annostasapainotuksen jälkeen SAp on retinolin (merkitty retinoli/leimaamaton retinoli) spesifinen aktiivisuus plasmassa .

Äideille Fa ja S lasketaan käyttämällä matemaattista mallintamista, kun taas SAp määritetään analyyttisesti. Lapsilla käytetään yleisiä Fa:n ja S:n arvoja.

Tilastollinen analyysi:

Tiedonsyöttö ja laadunvalvonta suoritetaan Epi infoTM 7.2.3.1:n avulla, Epi infoTM 3.5.1 (Centers for Disease Control and Prevention) ja Microsoft Excel 2016 (Microsoft Corporation). Tilastollinen analyysi suoritetaan käyttämällä STATA/SE 14.0:aa (STATA Corporation). Kuvailevaa analyysiä käytetään tutkimuspopulaation ominaisuuksien taulukoimiseen. Kategoriset muuttujat ilmaistaan ​​prosentteina ja jatkuvat muuttujat keskiarvona ± SD normaalijakauman muuttujille ja mediaani kvartiilivälillä vinoille arvoille. Kaksisuuntaista Studentin t-testiä, parillista t-testiä tai yksisuuntaista varianssianalyysiä (ANOVA) ja sen jälkeen Bonferronin post-hoc -vertailutestejä käytetään keskiarvojen vertailuun, kun taas Wilcoxonin rank-sum testiä käytetään mediaanien vertailuun. Prosenttiosuuksien vertailussa käytetään Pearsonin khin neliötestiä, Fisherin tarkkaa testiä tai McNemarin khin neliötestiä. Asianmukaiset sopimustestit suoritetaan. Kokenut tilastotieteilijä suorittaa kaikki tilastollisen analyysin vaiheet käyttämällä asianmukaisia ​​menetelmiä asianmukaisten ja luotettavien tulosten varmistamiseksi.