Kinetiken för retinol och TBS bland ammande senegalesiska kvinnor som bor i en urban miljö och förhållandet mellan deras TBS och de hos deras spädbarn (TBS)

Specifika mål är:

Att bestämma överföring av spårämne till bröstmjölk Att bestämma den sammansatta koefficienten (FaS) med hjälp av matematisk modellering Att uppskatta TBS med hjälp av de genererade koefficienterna och RID-ekvationen bland mödrar Att uppskatta TBS från bröstmjölksretinol med hjälp av massbalansekvationen bland mödrar Att uppskatta TBS från serumretinol med massbalansekvationen bland mödrar och deras barn Att bedöma överensstämmelsen mellan TBS mätt med olika metoder (RID-ekvationen, massbalansekvationen med serum eller bröstmjölkshärledd retinol) bland mödrar Att utvärdera sambandet mellan mödrar och barns TBS enligt deras status Att bedöma dietintag av vitamin A bland mamma-barn-par

Studien är utformad efter en "Wonder women model". Det kommer att implementeras i Dakar stad. Totalt femtiosex (56) ammande mamma-barn-par kommer att inkluderas i studien. Kvinnorna kommer att delas in i 8 grupper om 7 kvinnor vardera. Denna urvalsstorlek inkluderar en förslitningsgrad på 15 %.

Vid baslinjen (dag 0) kommer blodprov att tas från alla kvinnor efter en natts fasta. Kvinnor kommer också att uppmanas att ge tillfälliga mjölkprover. Därefter kommer varje kvinna att ges en oral dos på 2,0 μmol 13C2-retinylacetat (Gannon et al., 2014; Kaliwile et al., 2021). Efteråt kommer deltagarna att konsumera ett jordnötssmörsbaserat mellanmål för att ge fett för att förbättra dosabsorptionen. Kvinnorna kommer också att få ett uppföljningsprov taget dag 14. När det gäller baslinjen kommer ett uppföljande mjölkprov att samlas in. Kortvarig provtagning av både blod och mjölk kommer att ske mellan dag 0 och 14 och mellan dag 14 och 109. Totalt kommer varje kvinna att få 4 blod- och 4 mjölkprover tagna över tiden.

För spädbarn börjar RID-testet dag 14. Efter baslinjeblodet kommer de att få 1,0 μmol 13C2-retinylacetat och kommer att ta ett andra blodprov på dag 28. Således kommer spädbarn att ha 2 blodprover.

Protokollet kommer att förklaras för mamman och skriftligt medgivande kommer att erhållas från henne. Ammande mamma-spädbarnspar kommer att avmaskas innan forskningsprotokollet påbörjas.

Blodproverna kommer att skyddas från ljus med aluminiumfolie och centrifugeras vid 3500 rpm i 15 minuter för att separera serum från koagel. Alla centrifugeringar kommer att göras inom timmen efter blodprovtagningen och med hjälp av en centrifug. Serumet kommer att delas upp i sterila kryogena flaskor och förvaras vid -80 °C i laboratoriet.

När det gäller mjölkprover kommer 2 alikvoter att beredas i 2 kryoflaskor och förvaras vid +4°C i fält och vid -80°C i laboratoriet.

Ett frågeformulär administrerat av intervjuaren kommer att tillåta insamling av bakgrundsinformation och kostdata från mamma-spädbarnspar. Kostintaget av mamma-spädbarnspar kommer att bedömas med 2 kvantitativa 24-timmars dietåterkallelser på icke på varandra följande dagar (FAO, 2018). Minsta dietary diversity for Women (MDD-W) kommer också att fastställas från 24-timmars dietary recalls. För barn kommer indikatorer för matning av spädbarn och småbarn att utvärderas enligt de senaste WHO/UNICEF-rekommendationerna (WHO/UNICEF, 2021).

Antropometriska mätningar kommer att utföras för att utvärdera näringstillståndet hos mamma-spädbarnspar enligt standardprocedurer.

Provanalys:

Serumretinolkoncentration kommer att göras med HPLC. Naturlig förekomst av 13C i serum och mjölk kommer att mätas med gaskromatografi-förbränning-isotopförhållande masspektrometri (GC-C-IRMS). CRP och AGP kommer att mätas med Biosystems A15 automatisk analysator. Retinylestrar och serumkarotenoider kommer att göras med Ultra-Performance Liquid Chromatography (UPLC).

Anemi kommer att bedömas genom att mäta hemoglobin (Hb) i helblod med hjälp av ett HemoCue-system (Hb-301) och malariatestning kommer att utföras med SD BIOLINE Malaria Antigen P.f/Pan1-tester.

Ytterligare analys kommer att göras på salivprover i ett delprov av moder-barn-par för att mäta mjölkproduktionen genom spädningsmetoden för mordos deuteriumisotop. Deuteriumanrikning av salivprover kommer att mätas med en Fourier transform infraröd spektrometer (FTIR Shimadzu IR Affinity, Kyoto, Japan).

Modellering av retinolkinetik bland mödrar:

Serum och bröstmjölk retinolkoncentrationer och isotopanrikningsdata kommer att användas för att generera superkvinnors datauppsättningar. Modellbaserad kompartmentanalys kommer att tillämpas på superkvinnors isotopspårdata för anrikning av serum och bröstmjölk med hjälp av etablerade modeller för vitamin A-metabolism (Green et al., 2020; Gannon et al., 2018) och utökar dessa modeller för att inkludera spårämnesöverföring till bröstmjölk.

Bestämning av Fa- och S-faktorer:

Utdata från den modellbaserade kompartmentanalysen inkluderar uppskattningar av vitamin A-överföringshastigheter mellan fysiologiskt baserade avdelningar och de resulterande modellresultaten; total spårad massa, halveringstid, fraktionerad katabolisk hastighet, avfallshastighet, jämviktstid och serum/kroppsspårfördelning (faktor S). Med användning av absorptionsantaganden kommer mängden spårämnesdos som absorberas och lagras vid tidpunkten för provtagningen (relaterad till faktor Fa och andra relaterade ekvationskoefficienter) att bestämmas.

TBS beräkning:

Massbalansekvation: Isotopförhållandet mellan spårämne och spårämne (TTR) (omärkt retinol) i serum kommer att användas för att uppskatta totala kroppens VA-lager (TBS) med hjälp av följande ekvation med lämpliga antaganden:

TBS (μmol)= a × 1/TTR× (faktorer för korrigering av absorption och lagring) a är dosmängden RID-ekvation: TBS (μmol)= Fa × S × (1/〖SAp〗) Fa är bråkdelen av oral spårämnesdos absorberad och kvarhållen i butiker S är förhållandet mellan den specifika aktiviteten av retinol (märkt retinol/omärkt retinol) i plasma och den i levern efter dosbalansering. SAp är den specifika aktiviteten av retinol (märkt retinol/omärkt retinol) i plasma .

För mödrar kommer Fa och S att beräknas med hjälp av matematisk modellering medan SAp kommer att bestämmas analytiskt. Bland barn kommer generiska värden för Fa och S att användas.

Statistisk analys:

Datainmatning och kvalitetskontroll kommer att utföras med Epi infoTM 7.2.3.1, Epi infoTM 3.5.1 (Centers for Disease Control and Prevention) och Microsoft Excel 2016 (Microsoft Corporation). Statistisk analys kommer att utföras med hjälp av STATA/SE 14.0 (STATA Corporation). Beskrivande analys kommer att användas för att tabulera studiepopulationens egenskaper. Kategoriska variabler kommer att uttryckas i procent, och kontinuerliga variabler som medelvärde ± SD för normalfördelade variabler och median med interkvartilintervall för skeva värden. Two-tailed Student's t-test, Paired t-test eller envägsvariansanalys (ANOVA) följt av Bonferronis post-hoc jämförelsetest kommer att användas för att jämföra medelvärden medan Wilcoxon rangsummetest kommer att användas för att jämföra medianer. Pearsons chi-kvadrattest, Fishers exakta test eller McNemars chi-kvadrattest kommer att användas för att jämföra procentsatser. Lämpliga avtalstester kommer att utföras. Alla de statistiska analyserna kommer att utföras av en erfaren statistiker som använder lämplig metodik för att säkerställa korrekta och tillförlitliga resultat.