コロンビアにおける多嚢胞性卵巣症候群（PCOS）の表現型と疫学（PEP - コロンビア）研究。 (PEP-Colombia)

最初の訪問では、コルメディコス医療センターで定期的な職業上の入院前健康診断を受ける予定の研究参加者候補が研究に参加するよう招待されます。 適格な研究参加者には、研究の目的と研究プロトコールについてカウンセリングが行われ、同意書のコピーが手渡されます。 潜在的な研究参加者の詳細（名前、年齢、身長、体重、連絡先）を含む機密の研究登録が最初の訪問日に開始されます。 １回目の評価訪問において、研究への募集の前に、各研究参加者から書面によるインフォームドコンセントが得られる。 すべての研究参加者の個人データは法律 (ley 1581de コロンビア) に従って保護されます。

1. 評価訪問 #1:

   インフォームドコンセントを得た後、すべての参加者から均一にデータを収集するため、臨床報告書フォーム (CRF) の標準形式を使用して各研究参加者からデータが収集されます。 各 CRF には固有のシリアル識別番号が付けられ、現地の言語で書かれています。 CRF は訓練を受けた研究者 (PI、研究分担者、医学的に訓練を受けた研究助手を含む) によって担当されます。 すべての CRF は完了後 24 時間以内に欠落データがないかチェックされ、欠落データがあればすぐに検出されて収集されます。 コロンビアの法律（2007 年決議 2346、2011 年 R 1918）で定められた制限に従って、研究担当者はいかなる場合でも参加者の医療職記録にアクセスすることはできません。

   各参加者は、身体測定（体重、身長、腹囲、腰囲）と、多毛症、座瘡、脱毛症、黒色表皮症、甲状腺肥大の身体検査を受けます。 初期多毛症 (mFG) スコアが 4 以上 (≥ 4) の参加者は医師によって再評価されます。 コルメディコスでの最初の訪問では、研究調査員の一員である訓練を受けた婦人科医による性歴と同意書に基づいて、すべての参加者に対して経膣または経腹的な骨盤超音波検査が実施されます。 経膣超音波検査は、PCOS 患者の研究において卵巣の形態を評価するために受け入れられ、検証された方法です。

   少なくとも6時間（理想的には）一晩絶食した後、各研究参加者から18 mlの静脈血サンプル（すなわち、基礎絶食サンプル）を採取します。 静脈血の約 12 ml は血清の凍結保存とその後の分析のために普通のチューブに収集され、残りは血清中のグルコースの即時推定のために普通のチューブに集められます。

2. サンプル処理:

   最初の血液検体には、参加者固有の ID 番号、採血日時、最終月経日 (LMP) のラベルが付けられます。 サンプルは、参加者の月経周期に関係なく、コルメディコス医療センターの訓練を受けた検査員によって午前中（08:00～10:00）に採取されます。 稀発月経または無月経の参加者は、採血の前に尿妊娠検査を受けます。

   コルメディコス研究所では、3000 rpm で 20 分間の遠心分離により、血液サンプルが血清、血漿、全血に分離されます。 生物学的標本は、-80 ℃の温度に耐えることができる 1.5 ～ 2.0 ml のプラスチック容器 (約 4 個のクライオバイアル) に少量 (1,25 ml) に分けて保存されます。 分注されたサンプルは、ABAD Zona 2 SUR 研究所 (Carrera 32 No. 2 Sur 47 local 9701) にドライアイス容器に入れて研究所の宅配スタッフによって送られ、そこで最長 3 か月間摂氏 -20 度で保管されます。処理。 必要に応じて、より長期の保管が必要な場合、サンプルはインサー・メデジンの研究所に移送され、摂氏マイナス80度で保管され、そこで確立された施設内廃棄物管理プロトコルに従って使用または最終処分されるまで保管されます。

3. ホルモンおよび化学分析:

   ホルモンアッセイおよび初期評価用のサンプルは、毎週の分析のために一定の間隔でバッチ処理され、研究参加者にタイムリーな結果を提供し、参加者の分類を可能にし、アッセイ間のばらつきの影響を最小限に抑えます。 さらに、これにより、追加の研究が必要な参加者にタイムリーに連絡することができます。

   すべての参加者は、サイクルのフェーズに関係なく、一律に評価されます。

4. 「PCOSの可能性」による被験者の評価:

   最初に PCOS を示唆する臨床的特徴 (つまり、HA、OA、または PCOM) を示した参加者のコホートは、「PCOS の可能性がある」と指定され、サンプルで次の測定を受けます。

   1. すべての「PCOS の可能性がある」被験者では、TSH、プロラクチン (PRL)、および 17-HP が空腹時血糖だけでなく基礎血清サンプルでも測定されます。

      注: PCOS と診断されたすべての被験者は、TSH、PRL、および 17-HP (基礎または急性 ACTH 刺激後) が正常である必要があります。

   2. 臨床的に HA+OA を呈する女性において、実施された TV-U/S が PCOM を示した場合、対象は PCOS 表現型 A (HA+OA+PCOM) を有すると分類されます。そうでない場合、対象は PCOS 表現型 B (HA+OA) を有すると分類されます。
   3. 臨床的に HA のみを呈している被験者は、血清プロゲステロン (P4) レベルの月経周期の黄体期 (21 ～ 24 日) の間に復帰します。 OA（すなわち、黄体P4 < 3 ng/mL）を示すHA患者は、TV-U/SによるPCOM（HA+OA+PCOM）またはPCOS表現型B（HA+OA）を有する場合、PCOS表現型Aを有すると分類されます。 ）PCOMを展示していない場合。 PCOM も示すが、OA を示さない HA 被験者（すなわち、黄体 P4 ≧ 3 ng/mL）は、PCOS 表現型 C として分類されます。HA を示すが、PCOM または OA を示さない参加者は、孤立性 HA を有するものとして分類されます。
   4. 臨床的にOAのみを呈する被験者の基礎血清サンプルは、アンドロゲンレベル（総[TT]および遊離テストステロン[FT]、デヒドロエピアンドロステロン硫酸[DHEAS]、およびアンドロステンジオン[A4]）について検査されます。 HA（つまり、アンドロゲンレベルの上昇）を示すOA患者は、TV-U/SによるPCOM（HA+OA+PCOM）の場合はPCOS表現型A、PCOS表現型B（HA+OA）の場合はPCOS表現型B（HA+OA）と分類されます。 PCOMは出品しておりません。 PCOMも示すがHAを示さない(すなわち、正常なアンドロゲンレベル)OA対象者は、PCOS表現型Dとして分類されます。OAがあるが、PCOMもHAも示さない参加者は、孤立性OAを有するものとして分類されます。
   5. TV-U/S による PCOM を呈している被験者は、月経周期の黄体期 (22 ～ 24 日目) に血清プロゲステロン (P4) レベルを測定し、基礎血清サンプルのアンドロゲン レベル (合計 [TT]) が検査されます。および遊離テストステロン [FT]、硫酸デヒドロエピアンドロステロン [DHEAS]、およびアンドロステンジオン [A4])。 OA (つまり、黄体 P4 < 3 ng/mL) を示す PCOM 患者は、PCOS 表現型 D を有すると分類されます。HA (つまり、アンドロゲンレベルの上昇) も示す場合 (HA+OA+PCOM) は、PCOS 表現型 D を有すると分類されます。 PCOS 表現型 A。HA も示すが、OA を示さない PCOM 対象者（すなわち、黄体 P4 ≧ 3 ng/mL）は、PCOS 表現型 C として分類されます。PCOM を有するが、HA または OA を示さない参加者は、孤立型 PCOM を有するものとして分類されます。

5. PCOS の診断:

   関連するまたは模倣する障害は、病歴、身体検査、血清 TSH、PRL、および 17-OHP を使用して除外されます。 基礎17-OHPが2ng/ml（または200ng/dl）を超える研究参加者は、卵胞期に17-OHP測定を繰り返し、17-OHPが依然として2ng/mLを超える場合は、急性副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）を測定します。 ）非古典的先天性副腎過形成（NCAH）を除外するために刺激試験が行われます。 以前のデータを考慮すると、スクリーニングされた被験者の約 6% が急性 ACTH 刺激検査を必要とすると推定されます。

   全体として、被験者がHA+OA+PCOM（表現型A）、HA+OA（表現型B）、HA+PCOM（表現型C）、OA+PCOM（表現型D）のいずれかを呈し、正常レベルのTSHを示した場合、PCOSと診断されます。当社の診断アルゴリズムによると、(0.37 ～ 4.7 mUI/L)、PRL (<25 ng/mL)、および 17-OHP。

6. 評価訪問 #2:

   以下の場合、被験者は追加の評価のために 2 回目の評価訪問 (評価訪問 #2) に再スケジュールされます。

   1. PCOSを有するすべての被験者は、グルコース負荷後0分および120分に血清チューブに採取された3mlの静脈血による2時間75gの経口ブドウ糖負荷試験(OGTT)を受けるために再来院する予定である。 グルコースおよびインスリン (血清チューブから) レベルを 0 分と 120 分で評価します。
   2. 参加者は月経周期の卵胞期（1日目から5日目の間）に再評価されます。

   私。 最初の超音波検査で優勢卵胞（10 mm 以上）または卵巣嚢腫があった場合には、再度超音波検査を行います。

   ii. 最初の 17-OHP が 2 ng/mL を超える場合の 17-ヒドロキシプロゲステロン (17-OHP) の繰り返し測定。月経歴に従って黄体期に測定されました。 黄体期で評価された参加者の約 50% は、17-OHP >2 ng/mL を有すると予想されます。

   iii. 急性静脈内（iv）ACTH-1-24（0.25 mg）刺激試験は、月経歴に基づき、卵胞期に得られた初回および反復 17-OHP が > 2 ng/mL である場合に実施します。

7. ホルモンレベルの再評価:

研究の完了時に、すべてのPCOS被験者と「スーパーコントロール」のグループ（30人のコントロール）のアンドロゲンレベルについてサンプルの繰り返し分析が参照検査室で行われます。 空腹時血糖値は、スーパーコントロールのグループ (100 個のコントロール) でも分析されます。 遺伝子解析は、参照研究室での財政的支援の有無に応じて実行できます。