Phänotyp und Epidemiologie des polyzystischen Ovarialsyndroms (PCOS) in Kolumbien (PEP – Kolumbien) Studie. (PEP-Colombia)

Beim ersten Besuch werden potenzielle Studienteilnehmer, die sich einer routinemäßigen berufsärztlichen Voruntersuchung im Colmédicos Medical Center unterziehen müssen, zur Teilnahme an der Studie eingeladen. Berechtigte Studienteilnehmer werden über die Ziele der Studie und das Studienprotokoll beraten und erhalten eine Kopie der Einverständniserklärung. Am Tag des ersten Besuchs wird ein vertrauliches Studienregister erstellt, das Angaben zu potenziellen Studienteilnehmern (Name, Alter, Größe, Gewicht und Kontakt) enthält. Vor der Rekrutierung für die Studie wird beim ersten Evaluierungsbesuch von jedem Studienteilnehmer eine schriftliche Einverständniserklärung eingeholt. Die personenbezogenen Daten aller Studienteilnehmer werden gemäß dem Gesetz (ley 1581de Colombia) geschützt.

1. Evaluierungsbesuch Nr. 1:

   Nach Einholung einer Einverständniserklärung werden Daten von jedem Studienteilnehmer unter Verwendung eines Standardformats in einem klinischen Berichtsformular (CRF) gesammelt, um eine einheitliche Datenerfassung bei allen Teilnehmern zu gewährleisten. Jedes CRF trägt eine eindeutige Seriennummer und ist in der Landessprache verfasst. Das CRF wird von einem ausgebildeten Forscher (einschließlich PI, Co-Ermittlern und medizinisch ausgebildeten Forschungsassistenten) besetzt. Alle CRF werden innerhalb von 24 Stunden nach Fertigstellung auf fehlende Daten überprüft und alle fehlenden Daten werden sofort erkannt und erfasst. Gemäß den in der kolumbianischen Gesetzgebung festgelegten Einschränkungen (Resolution 2346 de 2007, R 1918 de 2011) hat das Studienpersonal zu keinem Zeitpunkt Zugriff auf die medizinischen Berufsunterlagen des Teilnehmers.

   Jeder Teilnehmer wird anthropometrischen Messungen (Gewicht, Größe, Taillen- und Hüftumfang) und einer körperlichen Untersuchung auf Hirsutismus, Akne, Alopezie, Acanthosis nigricans und Schilddrüsenvergrößerung unterzogen. Teilnehmer mit einem anfänglichen Hirsutismus-Wert (mFG) von 4 oder mehr (≥ 4) werden von einem Arzt erneut untersucht. Beim ersten Besuch bei Colmédicos wird bei allen Teilnehmern eine transvaginale oder transabdominale Beckenultraschalluntersuchung auf der Grundlage der Sexualgeschichte und der Einwilligungserklärung durch ausgebildete Gynäkologen durchgeführt, die Teil der Studienärzte sind. Ein transvaginaler Ultraschall ist die akzeptierte und validierte Methode zur Beurteilung der Eierstockmorphologie bei der Untersuchung von Patienten mit PCOS.

   Nach einer Fastennacht über Nacht von mindestens 6 Stunden (idealerweise) wird von jedem Studienteilnehmer eine 18-ml-Probe venösen Bluts entnommen (d. h. die basale Fastenprobe). Etwa 12 ml des venösen Blutes werden in einfachen Röhrchen zur Kryokonservierung des Serums und anschließender Analyse gesammelt, der Rest in einfachen Röhrchen zur sofortigen Glukoseschätzung im Serum.

2. Probenverarbeitung:

   Die ersten Blutproben werden mit der eindeutigen ID-Nummer des Teilnehmers, der Uhrzeit und dem Datum der Blutentnahme sowie dem Datum der letzten Menstruationsperiode (LMP) gekennzeichnet. Die Proben werden von geschultem Laborpersonal des medizinischen Zentrums Colmédicos in den Morgenstunden (08:00 bis 10:00 Uhr) entnommen, unabhängig vom Menstruationszyklus der Teilnehmerin. Bei Teilnehmern mit Oligomenorrhoe oder Amenorrhoe wird vor der Blutentnahme ein Urin-Schwangerschaftstest durchgeführt.

   Im Colmédicos-Labor werden die Blutproben durch 20-minütige Zentrifugation bei 3000 U/min in Serum, Plasma und Vollblut getrennt. Die biologischen Proben werden in kleinen Aliquots (von 1,25 ml) in 1,5 bis 2,0 ml großen Kunststoffbehältern (ca. 4 Kryoröhrchen) gelagert, die Temperaturen von -80 Grad Celsius standhalten. Die aliquotierten Proben werden vom Kurierpersonal des Labors in Trockeneisbehältern an das Labor ABAD Zona 2 SUR (Carrera 32 No. 2 Sur 47 local 9701) geschickt, wo sie für maximal 3 Monate bei -20 Grad Celsius gelagert werden wird bearbeitet. Bei Bedarf werden die Proben für eine längere Lagerung in das Labor von Inser Medellin überführt und bei -80 Grad Celsius gelagert, wo sie bis zu ihrer Verwendung oder endgültigen Entsorgung gemäß dem festgelegten institutionellen Abfallmanagementprotokoll aufbewahrt werden.

3. Hormonelle und chemische Analysen:

   Proben für den Hormontest und die Erstbewertung werden in regelmäßigen Abständen wöchentlich für die Analyse gesammelt, um den Studienteilnehmern zeitnahe Ergebnisse zu liefern, eine Klassifizierung der Teilnehmer zu ermöglichen und die Auswirkungen der Variabilität zwischen den Tests zu minimieren. Darüber hinaus können wir so rechtzeitig mit Teilnehmern Kontakt aufnehmen, die zusätzliche Studien benötigen.

   Alle Teilnehmer werden unabhängig von der Phase des Zyklus, in der sie sich befinden, einheitlich bewertet.

4. Bewertung von Probanden mit „Möglichem PCOS“:

   Die Teilnehmerkohorte, die zunächst klinische Merkmale aufweist, die auf PCOS hinweisen (d. h. HA, OA oder PCOM), wird als „mögliches PCOS“ bezeichnet und in ihren Proben den folgenden Messungen unterzogen:

   1. Bei allen Patienten mit „möglichem PCOS“ werden TSH, Prolaktin (PRL) und 17-HP in den Basalserumproben sowie in der Nüchternglukose gemessen.

      Hinweis: Alle Personen, bei denen PCOS diagnostiziert wurde, sollten normale TSH-, PRL- und 17-HP-Werte haben (grundsätzlich oder nach akuter ACTH-Stimulation).

   2. Bei Frauen, die sich klinisch mit HA+OA vorstellen und der durchgeführte TV-U/S PCOM nachweist, wird die Person als Patientin mit PCOS-Phänotyp A (HA+OA+PCOM) eingestuft; Wenn nicht, wird das Subjekt als Patienten mit PCOS-Phänotyp B (HA+OA) eingestuft.
   3. Probanden, die sich klinisch nur mit HA vorstellen, kehren während der Lutealphase (Tage 21–24) ihres Menstruationszyklus zurück und weisen einen Serumprogesteronspiegel (P4) auf. Probanden mit HA, die OA zeigen (d. h. Luteal-P4 < 3 ng/ml), werden als Patienten mit PCOS-Phänotyp A eingestuft, wenn sie PCOM nach TV-U/S (HA+OA+PCOM) oder PCOS-Phänotyp B (HA+OA) haben ), wenn sie kein PCOM aufweisen. HA-Probanden, die ebenfalls PCOM, aber keine OA (d. h. Luteal-P4 ≥ 3 ng/ml) aufweisen, werden als PCOS-Phänotyp C klassifiziert. Teilnehmer mit HA, aber keinem PCOM oder OA werden als Patienten mit isoliertem HA eingestuft.
   4. Bei Personen, die klinisch nur an Arthrose leiden, werden ihre Basalserumproben auf Androgenspiegel untersucht (Gesamttestosteron [TT] und freies Testosteron [FT], Dehydroepiandrosteronsulfat [DHEAS] und Androstendion [A4]). Patienten mit OA, die HA (d. h. erhöhte Androgenspiegel) aufweisen, werden als PCOS-Phänotyp A eingestuft, wenn sie PCOM nach TV-U/S (HA+OA+PCOM) haben, oder als PCOS-Phänotyp B (HA+OA), wenn dies der Fall ist kein PCOM aufweisen. OA-Patienten, die ebenfalls PCOM, aber keine HA (d. h. normale Androgenspiegel) aufweisen, werden als PCOS-Phänotyp D klassifiziert. Teilnehmer mit OA, aber keinem PCOM oder HA werden als Personen mit isolierter OA eingestuft.
   5. Probanden, die laut TV-U/S an PCOM leiden, werden während der Lutealphase (Tage 22–24) ihres Menstruationszyklus auf einen Serumprogesteronspiegel (P4) überprüft und ihre Basalserumproben werden auf Androgenspiegel (insgesamt [TT]) untersucht. und freies Testosteron [FT], Dehydroepiandrosteronsulfat [DHEAS] und Androstendion [A4]). Probanden mit PCOM, die OA (d. h. luteales P4 < 3 ng/ml) aufweisen, werden als Personen mit PCOS-Phänotyp D eingestuft. Wenn sie auch HA (d. h. erhöhte Androgenspiegel) aufweisen (HA+OA+PCOM), werden sie als Personen mit PCOS-Phänotyp D eingestuft PCOS-Phänotyp A. PCOM-Patienten, die ebenfalls HA, aber keine OA (d. h. Luteal-P4 ≥ 3 ng/ml) aufweisen, werden als PCOS-Phänotyp C klassifiziert. Teilnehmer mit PCOM, aber ohne HA oder OA werden als Personen mit isoliertem PCOM eingestuft.

5. PCOS diagnostizieren:

   Verwandte oder nachahmende Störungen werden anhand der Anamnese, der körperlichen Untersuchung sowie der Serum-TSH, PRL und 17-OHP ausgeschlossen. Studienteilnehmer mit einem basalen 17-OHP >2 ng/ml (oder 200 ng/dl) werden in der Follikelphase einer erneuten 17-OHP-Messung unterzogen und, wenn der 17-OHP immer noch > 2 ng/ml beträgt, ein akutes adrenocorticotropes Hormon (ACTH). ) wird ein Stimulationstest durchgeführt, um eine nicht-klassische angeborene Nebennierenhyperplasie (NCAH) auszuschließen. Unter Berücksichtigung unserer bisherigen Daten schätzen wir, dass etwa 6 % der untersuchten Probanden einen akuten ACTH-Stimulationstest benötigen.

   Insgesamt wird PCOS diagnostiziert, wenn die Probanden entweder HA+OA+PCOM (Phänotyp A), HA+OA (Phänotyp B), HA+PCOM (Phänotyp C) oder OA+PCOM (Phänotyp D) aufweisen und normale TSH-Werte aufweisen (0,37 bis 4,7 mUI/L), PRL (<25 ng/ml) und 17-OHP, gemäß unserem Diagnosealgorithmus.

6. Evaluierungsbesuch Nr. 2:

   In den folgenden Fällen werden die Probanden für einen zweiten Bewertungsbesuch (Bewertungsbesuch Nr. 2) zur weiteren Beurteilung neu eingeplant:

   1. Für alle Probanden mit PCOS wird ein erneuter Besuch eingeplant, um sich einem 2-stündigen oralen Glukosetoleranztest (OGTT) mit 75 g zu unterziehen, wobei 3 ml venöses Blut 0 Minuten und 120 Minuten nach der Glukosebelastung in Serumröhrchen gesammelt werden. Der Glukose- und Insulinspiegel (aus Serumröhrchen) wird nach 0 und 120 Minuten bestimmt.
   2. Die Teilnehmer werden während der Follikelphase des Menstruationszyklus (zwischen Tag 1 und 5) neu bewertet:

   ich. Mit einer wiederholten Ultraschalluntersuchung, falls bei der ersten Ultraschalluntersuchung ein dominanter Follikel (≥ 10 mm) oder eine Eierstockzyste vorliegt.

   ii. Eine wiederholte 17-Hydroxyprogesteron (17-OHP)-Messung für den Fall, dass der anfängliche 17-OHP > 2 ng/ml beträgt und während der Lutealphase entsprechend der Menstruationsanamnese ermittelt wurde. Bei etwa 50 % der in der Lutealphase untersuchten Teilnehmer wird ein 17-OHP von >2 ng/ml erwartet.

   iii. Ein akuter intravenöser (iv) ACTH-1-24 (0,25 mg)-Stimulationstest, wenn das anfängliche und wiederholte 17-OHP, das während der Follikelphase gemäß der Menstruationsanamnese erhalten wurde, > 2 ng/ml beträgt.

7. Neubewertung des Hormonspiegels:

Nach Abschluss der Studie wird in einem Referenzlabor eine erneute Analyse der Proben auf Androgenspiegel bei allen PCOS-Probanden und einer Gruppe von „Superkontrollen“ (30 Kontrollen) durchgeführt. Ein Nüchternglukosespiegel wird auch in einer Gruppe von Superkontrollen (100 Kontrollen) analysiert. Abhängig von der Verfügbarkeit finanzieller Unterstützung in einem Referenzlabor könnte eine genetische Analyse durchgeführt werden.