Studie fenotypu a epidemiologie syndromu polycystických ovarií (PCOS) v Kolumbii (PEP - Kolumbie). (PEP-Colombia)

Během první návštěvy budou potenciální účastníci studie, kteří jsou naplánováni na rutinní pracovní předpřijímací lékařskou prohlídku v Colmédicos Medical Center, pozváni k účasti na studii. Způsobilým účastníkům studie bude poskytnuta rada ohledně cílů studie a protokolu studie a bude jim předána kopie formuláře souhlasu. V den první návštěvy bude spuštěn důvěrný studijní registr obsahující podrobnosti o potenciálních účastnících studie (jméno, věk, výška, váha a kontakt). Informovaný písemný souhlas bude získán od každého účastníka studie před náborem do studie v rámci hodnotící návštěvy číslo jedna. Osobní údaje všech účastníků studie budou chráněny v souladu se zákonem (ley 1581de Colombia).

1. Hodnotící návštěva č. 1:

   Po získání informovaného souhlasu budou data shromážděna od každého účastníka studie pomocí standardního formátu ve formě klinické zprávy (CRF) pro jednotný sběr dat od všech účastníků. Každý CRF ponese jedinečné sériové identifikační číslo a bude napsán v místním jazyce. CRF bude plnit vyškolený výzkumný pracovník (včetně hlavního výzkumného pracovníka, spoluřešitelů a lékařsky vyškolených výzkumných asistentů). Všechny CRF budou zkontrolovány na chybějící data do 24 hodin od dokončení a jakákoli chybějící data budou okamžitě detekována a shromážděna. Pracovníci studie nebudou mít v žádném okamžiku přístup k lékařským záznamům o povolání účastníka v souladu s omezeními definovanými v kolumbijské legislativě (rezoluce 2346 de 2007, R 1918 de 2011).

   Každý účastník podstoupí antropometrická měření (váha, výška, obvod pasu a boků) a fyzikální vyšetření na hirsutismus, akné, alopecii, acanthosis nigricans a zvětšení štítné žlázy. Účastníci s počátečním skóre hirsutismu (mFG) 4 nebo více (≥ 4) budou znovu posouzeni lékařem. Během úvodní návštěvy v Colmédicos bude u všech účastníků provedena transvaginální nebo transabdominální ultrasonografie pánve na základě sexuální anamnézy a formuláře souhlasu vyškolenými gynekology, kteří jsou součástí výzkumných pracovníků studie. Transvaginální ultrazvuk je uznávanou a ověřenou metodou k posouzení morfologie vaječníků ve studii pacientek s PCOS.

   Po celonočním hladovění trvajícím alespoň 6 hodin (ideálně) bude každému účastníkovi studie odebrán vzorek 18 ml žilní krve (tj. základní vzorek nalačno). Asi 12 ml žilní krve bude odebráno do prostých zkumavek pro kryokonzervaci séra a následnou analýzu a zbytek do prostých zkumavek pro okamžité stanovení glukózy v séru.

2. Zpracování ukázky:

   Počáteční vzorky krve budou označeny jedinečným identifikačním číslem účastnice, časem a datem odběru krve a datem poslední menstruace (LMP). Vzorky budou odebrány vyškoleným laboratorním personálem z lékařského centra Colmédicos v ranních hodinách (08:00 až 10:00 hodin), bez ohledu na menstruační cyklus účastnice. Účastnicím s oligomenoreou nebo amenoreou bude před odběrem krve proveden těhotenský test moči.

   V laboratoři Colmédicos budou vzorky krve rozděleny na sérum, plazmu a plnou krev centrifugací po dobu 20 minut při 3000 ot./min. Biologické vzorky budou skladovány v malých alikvotech (1,25 ml) v plastových nádobách o objemu 1,5 až 2,0 ml (asi 4 kryozkumavky) schopných odolat teplotám -80 stupňů Celsia. Alikvotní vzorky budou kurýrem laboratoře zaslány do laboratoře ABAD Zona 2 SUR (Carrera 32 No. 2 Sur 47 local 9701) v nádobách na suchý led, kde budou skladovány při -20 stupních Celsia po dobu maximálně 3 měsíců. zpracovává se. V případě potřeby pro delší skladování budou vzorky převezeny do laboratoře Inser Medellin a uskladněny při -80 stupních Celsia, kde zůstanou ve vazbě až do jejich použití nebo konečného zneškodnění v souladu se zavedeným institucionálním protokolem o nakládání s odpady.

3. Hormonální a chemické analýzy:

   Vzorky pro hormonální test a počáteční vyhodnocení budou dávkovány v pravidelných intervalech pro analýzu každý týden, aby účastníci studie získali včasné výsledky, umožnili klasifikaci účastníků a minimalizovali dopad variability mezi testy. Navíc nám to umožní včas kontaktovat účastníky, kteří vyžadují další studium.

   Všichni účastníci budou hodnoceni jednotným způsobem bez ohledu na fázi cyklu, ve které se nacházejí.

4. Hodnocení předmětů s "možným PCOS":

   Skupina účastníků, kteří zpočátku splňují klinické rysy naznačující PCOS (tj. HA, OA nebo PCOM, bude označena jako „Možná PCOS“ a ve svých vzorcích podstoupí následující měření:

   1. U všech „možných PCOS“ subjektů budou měřeny TSH, prolaktin (PRL) a 17-HP v bazálních vzorcích séra a také glukóza nalačno.

      Poznámka: Všichni jedinci s diagnózou PCOS by měli mít normální TSH, PRL a 17-HP (bazálně nebo po akutní stimulaci ACTH).

   2. U žen s klinickým projevem HA+OA, pokud provedená TV-U/S prokáže PCOM, je subjekt klasifikován jako pacient s PCOS fenotypem A (HA+OA+PCOM); pokud ne, je subjekt klasifikován jako pacient s PCOS fenotypem B (HA+OA).
   3. Subjekty prezentující klinicky pouze HA se vrátí během luteální fáze (dny 21-24) svého menstruačního cyklu pro hladinu sérového progesteronu (P4). Jedinci s HA, kteří vykazují OA (tj. luteální P4 < 3 ng/ml), budou klasifikováni jako s PCOS fenotypem A, pokud mají PCOM podle TV-U/S (HA+OA+PCOM) nebo PCOS fenotyp B (HA+OA ), pokud nevykazují PCOM. Subjekty s HA, které také vykazují PCOM, ale žádnou OA (tj. luteální P4 ≥3 ng/ml), budou klasifikovány jako PCOS fenotyp C. Účastníci s HA, ale bez PCOM nebo OA, budou klasifikováni jako s izolovanou HA.
   4. U jedinců, kteří mají klinicky pouze OA, budou jejich bazální vzorky séra testovány na hladiny androgenů (celkový [TT] a volný testosteron [FT], dehydroepiandrosteron sulfát [DHEAS] a androstendion [A4]). Subjekty s OA, které prokazují HA (tj. zvýšené hladiny androgenů), budou klasifikovány jako mající PCOS fenotyp A, pokud mají PCOM podle TV-U/S (HA+OA+PCOM) nebo PCOS fenotyp B (HA+OA), pokud ano. nevykazují PCOM. Subjekty s OA, které také vykazují PCOM, ale žádnou HA (tj. normální hladiny androgenů), budou klasifikovány jako PCOS fenotyp D. Účastníci s OA, ale bez PCOM nebo HA, budou klasifikováni jako s izolovanou OA.
   5. Subjekty s PCOM pomocí TV-U/S se vrátí během luteální fáze (dny 22-24) svého menstruačního cyklu na hladinu progesteronu (P4) v séru a jejich bazální vzorky séra budou testovány na hladiny androgenů (celkem [TT] a volný testosteron [FT], dehydroepiandrosteron sulfát [DHEAS] a androstendion [A4]). Jedinci s PCOM, kteří vykazují OA (tj. luteální P4 < 3 ng/ml), budou klasifikováni jako pacienti s PCOS fenotypem D. Pokud také prokáží HA (tj. zvýšené hladiny androgenů) (HA+OA+PCOM), budou klasifikováni jako pacienti PCOS fenotyp A. Subjekty PCOM, které také vykazují HA, ale žádnou OA (tj. luteální P4 ≥3 ng/ml), budou klasifikovány jako PCOS fenotyp C. Účastníci s PCOM, ale bez HA nebo OA, budou klasifikováni jako s izolovaným PCOM.

5. Diagnostika PCOS:

   Související nebo napodobující poruchy budou vyloučeny pomocí anamnézy, fyzikálního vyšetření a sérových TSH, PRL a 17-OHP. Účastníci studie s bazálním 17-OHP >2 ng/ml (nebo 200 ng/dl) podstoupí opakované měření 17-OHP ve folikulární fázi a pokud je 17-OHP stále > 2 ng/ml, podstoupí akutní adrenokortikotropní hormon (ACTH ) bude proveden stimulační test k vyloučení neklasické kongenitální adrenální hyperplazie (NCAH). S ohledem na naše předchozí údaje odhadujeme, že přibližně 6 % vyšetřovaných subjektů bude vyžadovat akutní ACTH stimulační test.

   Celkově bude PCOS diagnostikováno, když subjekty mají buď HA+OA+PCOM (fenotyp A), HA+OA (fenotyp B), HA+PCOM (fenotyp C) a OA+PCOM (fenotyp D) a vykazují normální hladiny TSH (0,37 až 4,7 mUI/l), PRL (<25 ng/ml) a 17-OHP podle našeho diagnostického algoritmu.

6. Hodnotící návštěva č. 2:

   V následujících případech budou subjekty přeplánovány na druhou hodnotící návštěvu (hodnotící návštěva č. 2) za účelem dodatečného posouzení:

   1. U všech subjektů s PCOS bude naplánována zpáteční návštěva, aby podstoupili 2hodinový 75g orální glukózový toleranční test (OGTT) s 3 ml žilní krve odebrané do zkumavek se sérem v 0 minutách a 120 minutách po zatížení glukózou. Hladiny glukózy a inzulínu (ze zkumavek se sérem) budou hodnoceny v 0 a 120 minutách.
   2. Účastníci budou přehodnoceni během folikulární fáze menstruačního cyklu (mezi 1. a 5. dnem):

   i. Opakovaným ultrazvukem v případě, že je při úvodním ultrazvukovém vyšetření dominantní folikul (≥ 10 mm) nebo cysta na vaječníku.

   ii. Opakované měření 17-hydroxyprogesteronu (17-OHP) v případě, že počáteční 17-OHP je >2 ng/ml a bylo získáno během luteální fáze podle menstruační anamnézy. Očekává se, že přibližně 50 % účastníků hodnocených v luteální fázi bude mít 17-OHP >2 ng/ml.

   iii. Akutní intravenózní (iv) ACTH-1-24 (0,25 mg) stimulační test, pokud je počáteční a opakovaný 17-OHP získaný během folikulární fáze podle menstruační anamnézy > 2 ng/ml.

7. Přehodnocení hormonálních hladin:

Po dokončení studie bude v referenční laboratoři provedena opakovaná analýza vzorků na hladiny androgenů u všech subjektů s PCOS a skupiny „super-kontrol“ (30 kontrol). Hladina glukózy nalačno se také analyzuje ve skupině superkontrol (100 kontrol). Genetická analýza může být provedena v závislosti na dostupnosti finanční podpory v referenční laboratoři.