Исследование фенотипа и эпидемиологии синдрома поликистозных яичников (СПКЯ) в Колумбии (PEP - Колумбия). (PEP-Colombia)

Во время первого визита к участию в исследовании будут приглашены потенциальные участники исследования, запланированные для планового медицинского осмотра перед госпитализацией в медицинском центре Colmédicos. Приемлемые участники исследования будут проинформированы о целях исследования и протоколе исследования, а также им будет вручена копия формы согласия. Конфиденциальный регистр исследования, содержащий сведения о потенциальных участниках исследования (имя, возраст, рост, вес и контактные данные), будет запущен в первый день посещения. Информированное письменное согласие будет получено от каждого участника исследования перед включением в исследование во время оценочного визита номер один. Персональные данные всех участников исследования будут защищены в соответствии с законом (ley 1581de Colombia).

1. Оценочный визит №1:

   После получения информированного согласия данные будут собираться у каждого участника исследования с использованием стандартного формата формы клинического отчета (CRF) для единообразного сбора данных от всех участников. Каждая CRF будет иметь уникальный серийный идентификационный номер и будет написана на местном языке. ИРК будет заполняться обученным исследователем (включая PI, соисследователей и ассистентов-исследователей с медицинским образованием). Все CRF будут проверены на наличие отсутствующих данных в течение 24 часов после завершения, и любые отсутствующие данные будут обнаружены и немедленно собраны. Исследовательский персонал ни при каких обстоятельствах не будет иметь доступа к медицинским профессиональным записям участников в соответствии с ограничениями, установленными колумбийским законодательством (резолюция 2346 от 2007 г., R 1918 от 2011 г.).

   Каждый участник пройдет антропометрические измерения (вес, рост, окружность талии и окружность бедер) и медицинский осмотр на предмет гирсутизма, акне, алопеции, черного акантоза и увеличения щитовидной железы. Участники с начальным баллом гирсутизма (mFG) 4 или более (≥ 4) будут повторно оценены врачом. Во время первого визита в Colmédicos всем участникам будет проведено трансвагинальное или трансабдоминальное УЗИ органов малого таза на основании сексуального анамнеза и формы согласия подготовленными гинекологами, входящими в состав исследователей исследования. Трансвагинальное УЗИ является общепринятым и валидированным методом оценки морфологии яичников при исследовании пациенток с СПКЯ.

   После ночного голодания продолжительностью не менее 6 часов (в идеале) у каждого участника исследования будет взят образец венозной крови объемом 18 мл (т. е. базовый образец натощак). Около 12 мл венозной крови будет собрано в гладкие пробирки для криоконсервации сыворотки и последующего анализа, а оставшаяся часть — в гладкие пробирки для немедленного определения уровня глюкозы в сыворотке.

2. Образец обработки:

   Первоначальные образцы крови будут помечены уникальным идентификационным номером участника, временем и датой сбора крови, а также датой последней менструации (LMP). Образцы будут получены обученным персоналом лаборатории медицинского центра Colmédicos в утренние часы (с 08:00 до 10:00), независимо от менструального цикла участницы. Участникам с олигоменореей или аменореей будет сделан тест мочи на беременность до забора крови.

   В лаборатории Colmédicos образцы крови будут разделены на сыворотку, плазму и цельную кровь путем центрифугирования в течение 20 минут при 3000 об/мин. Биологические образцы будут храниться небольшими аликвотами (по 1,25 мл) в пластиковых контейнерах объемом от 1,5 до 2,0 мл (около 4 криопробирок), способных выдерживать температуру -80 градусов по Цельсию. Аликвоты будут отправлены в лабораторию ABAD Zona 2 SUR (Carrera 32 № 2 Sur 47, местный 9701) в контейнерах с сухим льдом курьером лаборатории, где они будут храниться при температуре -20 градусов по Цельсию в течение максимум 3 месяцев для обработка. При необходимости для более длительного хранения образцы будут переданы в лабораторию Inser Medellin и храниться при температуре -80 градусов по Цельсию, где они будут оставаться под стражей до их использования или окончательного удаления в соответствии с установленным протоколом управления отходами учреждения.

3. Гормональные и химические анализы:

   Образцы для гормонального анализа и первоначальной оценки будут собираться с регулярными интервалами для анализа каждую неделю, чтобы предоставить участникам исследования своевременные результаты, позволить классифицировать участников и свести к минимуму влияние вариабельности между анализами. Кроме того, это позволит нам своевременно связываться с участниками, которым требуются дополнительные исследования.

   Все участники будут оцениваться одинаково, независимо от фазы цикла, в которой они находятся.

4. Оценка субъектов с «Возможным СПКЯ»:

   Когорта участников, у которых изначально обнаруживаются клинические признаки, указывающие на СПКЯ (например, ГА, ОА или ПКОМ), будет обозначена как «Возможный СПКЯ» и будет подвергнута следующим измерениям в своих образцах:

   1. У всех субъектов с «Возможным СПКЯ» ТТГ, пролактин (ПРЛ) и 17-HP будут измеряться в базальных образцах сыворотки, а также в глюкозе натощак.

      Примечание. У всех субъектов с диагнозом СПКЯ должны быть нормальные уровни ТТГ, ПРЛ и 17-HP (исходно или после острой стимуляции АКТГ).

   2. У женщин с клиническими проявлениями ГА+ОА, если проведенное TV-U/S демонстрирует PCOM, субъект классифицируется как имеющий СПКЯ фенотипа A (HA+OA+PCOM); в противном случае субъект классифицируется как имеющий СПКЯ фенотип B (HA+OA).
   3. Субъекты с клиническими проявлениями только ГА возвращаются во время лютеиновой фазы (дни 21-24) своего менструального цикла для определения уровня прогестерона в сыворотке (P4). Субъекты с ГА, которые демонстрируют ОА (т. е. лютеиновый P4 < 3 нг/мл), будут классифицированы как имеющие СПКЯ фенотип А, если у них есть СПКЯ по TV-U/S (HA+OA+PCOM) или СПКЯ фенотип B (HA+ОА). ), если они не выставляют PCOM. Субъекты с ГА, которые также демонстрируют PCOM, но не имеют ОА (т. е. лютеиновый P4 ≥3 нг/мл), будут классифицированы как фенотип C СПКЯ. Участники с HA, но без PCOM или OA будут классифицированы как имеющие изолированный HA.
   4. У субъектов с клиническими проявлениями только ОА образцы их базальной сыворотки будут проанализированы на уровни андрогенов (общий [TT] и свободный тестостерон [FT], дегидроэпиандростерона сульфат [DHEAS] и андростендион [A4]). Субъекты с ОА, которые демонстрируют ГА (т.е. повышенный уровень андрогенов), будут классифицированы как имеющие СПКЯ фенотип А, если у них есть ПКОМ по TV-U/S (ГА+ОА+ПКОМ) или СПКЯ фенотип В (ГА+ОА), если они есть. не показывать PCOM. Субъекты с ОА, которые также демонстрируют PCOM, но не имеют HA (т. е. нормальный уровень андрогенов), будут классифицированы как фенотип D СПКЯ. Участники с OA, но без PCOM или HA будут классифицированы как имеющие изолированный OA.
   5. Субъекты с PCOM по TV-U / S возвращаются во время лютеиновой фазы (дни 22-24) своего менструального цикла для определения уровня прогестерона в сыворотке (P4), а их базовые образцы сыворотки будут анализироваться на уровни андрогенов (общий [TT] и свободный тестостерон [FT], дегидроэпиандростерона сульфат [DHEAS] и андростендион [A4]). Субъекты с PCOM, которые демонстрируют ОА (т. е. лютеиновый P4 < 3 нг/мл), будут классифицированы как имеющие фенотип D СПКЯ. СПКЯ фенотип А. Субъекты с СПКЯ, которые также демонстрируют ГА, но не имеют ОА (т. е. лютеиновый P4 ≥3 нг/мл), будут классифицированы как СПКЯ фенотипа С. Участники с СПКЯ, но без ГА или ОА, будут классифицированы как имеющие изолированный СПКЯ.

5. Диагностика СПКЯ:

   Связанные или имитирующие расстройства будут исключены с помощью анамнеза, физического осмотра и сывороточного ТТГ, ПРЛ и 17-ОНР. Участникам исследования с исходным уровнем 17-ОНР >2 нг/мл (или 200 нг/дл) будет проведено повторное измерение уровня 17-ОНР в фолликулярной фазе, и, если уровень 17-ОНР по-прежнему > 2 нг/мл, им будет назначен острый адренокортикотропный гормон (АКТГ). ) будет проведен стимуляционный тест для исключения неклассической врожденной гиперплазии коры надпочечников (NCAH). По нашим оценкам, учитывая наши предыдущие данные, примерно 6% обследованных субъектов потребуют острого стимулирующего теста с АКТГ.

   В целом, СПКЯ будет диагностирован, когда у субъектов либо HA+OA+PCOM (фенотип A), HA+OA (фенотип B), HA+PCOM (фенотип C) и OA+PCOM (фенотип D) и демонстрируются нормальные уровни ТТГ. (от 0,37 до 4,7 мМЕ/л), ПРЛ (<25 нг/мл) и 17-ОНР в соответствии с нашим диагностическим алгоритмом.

6. Оценочный визит № 2:

   В следующих случаях субъекты будут перенесены на второй оценочный визит (оценочный визит № 2) для дополнительной оценки:

   1. Всем субъектам с СПКЯ будет назначено повторное посещение для прохождения 2-часового перорального теста на толерантность к глюкозе (ОГТТ) с 75 г венозной крови, собранного в пробирки с сывороткой через 0 минут и через 120 минут после нагрузки глюкозой. Уровни глюкозы и инсулина (из пробирок с сывороткой) будут оцениваться через 0 и 120 мин.
   2. Участники будут повторно оценены во время фолликулярной фазы менструального цикла (между 1 и 5 днем):

   я. С повторным УЗИ при наличии доминантного фолликула (≥ 10 мм) или кисты яичника при первичном УЗИ.

   II. Повторное измерение 17-гидроксипрогестерона (17-ОНР) в случае, если начальный уровень 17-ОНР >2 нг/мл и было получено во время лютеиновой фазы согласно менструальному анамнезу. Ожидается, что примерно у 50% участников, обследованных в лютеиновую фазу, уровень 17-ОНР >2 нг/мл.

   III. Острый внутривенный (в/в) тест стимуляции АКТГ-1-24 (0,25 мг), если начальный и повторный 17-ОНР, полученный во время фолликулярной фазы, согласно менструальному анамнезу, составляет > 2 нг/мл.

7. Переоценка гормонального фона:

По завершении исследования в референс-лаборатории будет проведен повторный анализ образцов на уровень андрогенов у всех субъектов с СПКЯ и группы «суперконтроля» (30 человек). Уровень глюкозы натощак также анализировали в группе супер-контролей (100 контролей). Генетический анализ может быть выполнен в зависимости от наличия финансовой поддержки в референс-лаборатории.