Studie av fenotyp och epidemiologi av polycystiskt ovariesyndrom (PCOS) i Colombia (PEP - Colombia). (PEP-Colombia)

Under det första besöket kommer potentiella studiedeltagare, som är planerade för rutinmässig medicinsk undersökning före antagning på Colmédicos Medical Centre, att bjudas in att delta i studien. Berättigade studiedeltagare kommer att få råd om syftet med studien och studieprotokollet och en kopia av samtyckesformuläret kommer att överlämnas till dem. Ett konfidentiellt studieregister som innehåller information om potentiella studiedeltagare (namn, ålder, längd, vikt och kontakt) kommer att starta den första besöksdagen. Informerat skriftligt medgivande kommer att erhållas från varje studiedeltagare innan rekrytering till studien i utvärderingsbesök nummer ett. Alla personuppgifter som deltar i studien kommer att skyddas enligt lagen (ley 1581de Colombia).

1. Utvärderingsbesök #1:

   Efter att ha erhållit ett informerat samtycke kommer data att samlas in från varje studiedeltagare med hjälp av ett standardformat i ett kliniskt rapportformulär (CRF) för enhetlig datainsamling från alla deltagare. Varje CRF kommer att ha ett unikt serienummer och kommer att skrivas på det lokala språket. CRF kommer att fyllas av en utbildad forskare (inklusive PI, medutredare och medicinskt utbildade forskarassistenter). All CRF kommer att kontrolleras för saknade data inom 24 timmar efter slutförandet, och eventuell saknad data kommer att upptäckas och samlas in omedelbart. Studiepersonalen kommer inte vid något tillfälle att ha tillgång till deltagarens medicinska journaler, i enlighet med begränsningarna som definieras i den colombianska lagstiftningen (resolution 2346 de 2007, R 1918 de 2011).

   Varje deltagare kommer att genomgå antropometriska mätningar (vikt, höjd, midjeomkrets och höftomkrets) och fysisk undersökning för hirsutism, akne, alopeci, acanthosis nigricans och sköldkörtelförstoring. Deltagare med en initial hirsutism (mFG)-poäng på 4 eller mer (≥ 4) kommer att omvärderas av en läkare. Under det första besöket på Colmédicos kommer en transvaginal eller transabdominal bäckenultraljud att utföras av alla deltagare, baserat på den sexuella historien och samtyckesformuläret av utbildade gynekologer som ingår i studiens utredare. Ett transvaginalt ultraljud är den accepterade och validerade metoden för att bedöma äggstocksmorfologin i studier av patienter med PCOS.

   Efter en fasta över natten på minst 6 timmar (helst) kommer ett 18 ml prov av venöst blod att samlas in från varje studiedeltagare (d.v.s. det basala fastaprovet). Cirka 12 ml av det venösa blodet kommer att samlas upp i vanliga rör för serumkryokonservering och efterföljande analys, och resten i vanliga rör för omedelbar glukosuppskattning i serum.

2. Provbearbetning:

   De första blodproverna kommer att märkas med deltagarens unika ID-nummer, tid och datum för blodinsamling och datum för senaste menstruation (LMP). Proverna kommer att erhållas av utbildad laboratoriepersonal från Colmédicos vårdcentral under morgontimmarna (08:00 till 10:00), oavsett deltagarens menstruationscykel. Deltagare med oligomenorré eller amenorré kommer att få ett uringraviditetstest före blodprovtagning.

   På Colmédicos laboratorium kommer blodproverna att separeras i serum, plasma och helblod genom centrifugering i 20 minuter vid 3000 rpm. De biologiska proverna kommer att förvaras, i små alikvoter (om 1,25 ml), i 1,5 till 2,0 ml plastbehållare (cirka 4 cryovials) som kan motstå temperaturer på -80 grader Celsius. De alikvoterade proverna kommer att skickas till ABAD Zona 2 SUR-laboratoriet (Carrera 32 No. 2 Sur 47 local 9701) i torrisbehållare av laboratoriets budpersonal där de kommer att förvaras vid -20 grader Celsius i maximalt 3 månader för bearbetning. Om nödvändigt, för längre lagring, kommer proverna att överföras till Inser Medellin-laboratoriet och förvaras vid -80 grader Celsius där de kommer att förbli i förvar tills de används eller slutligt bortskaffas enligt det etablerade institutionella avfallshanteringsprotokollet.

3. Hormonella och kemiska analyser:

   Prover för hormonell analys och den initiala utvärderingen kommer att satsas med regelbundna intervall för analysen varje vecka för att ge studiedeltagarna resultat i rätt tid, möjliggöra klassificering av deltagare och minimera effekten av variationer mellan analyserna. Dessutom kommer detta att tillåta oss att i tid kontakta deltagare som behöver ytterligare studier.

   Alla deltagare kommer att utvärderas på ett enhetligt sätt oavsett i vilken fas av cykeln de befinner sig.

4. Utvärdera ämnen med "Möjlig PCOS":

   Kohorten av deltagare som initialt möter kliniska egenskaper som tyder på PCOS (d.v.s. HA, OA eller PCOM, kommer att betecknas som "Möjlig PCOS" och kommer att genomgå följande mätningar i sina prover:

   1. I alla "möjliga PCOS"-ämnen kommer TSH, prolaktin (PRL) och 17-HP att mätas i de basala serumproverna såväl som fasteglukos.

      Obs: Alla patienter som diagnostiserats med PCOS bör ha en normal TSH, PRL och 17-HP (basalt eller efter akut ACTH-stimulering).

   2. Hos kvinnor som uppträder kliniskt med HA+OA, om den utförda TV-U/S visar PCOM, klassificeras patienten som med PCOS-fenotyp A (HA+OA+PCOM); om inte, klassificeras patienten som med PCOS-fenotyp B (HA+OA).
   3. Patienter som endast uppvisar kliniskt HA kommer att återvända under lutealfasen (dagarna 21-24) av sin menstruationscykel för en serumprogesteronnivå (P4). Försökspersoner med HA som uppvisar OA (dvs luteal P4 < 3 ng/ml) kommer att klassificeras som PCOS-fenotyp A om de har PCOM av TV-U/S (HA+OA+PCOM) eller PCOS-fenotyp B (HA+OA) ) om de inte visar PCOM. HA-personer som också uppvisar PCOM, men ingen OA (dvs. luteal P4 ≥3 ng/ml) kommer att klassificeras som PCOS-fenotyp C. Deltagare med HA, men ingen PCOM eller OA kommer att klassificeras som att de har isolerat HA.
   4. Patienter som endast uppvisar kliniskt artrose, kommer att analysera deras basala serumprover för androgennivåer (totalt [TT] och fritt testosteron [FT], dehydroepiandrosteronsulfat [DHEAS] och androstenedion [A4]). Försökspersoner med OA som uppvisar HA (dvs förhöjda androgennivåer) kommer att klassificeras som med PCOS fenotyp A om de har PCOM av TV-U/S (HA+OA+PCOM) eller PCOS fenotyp B (HA+OA) om de har inte uppvisa PCOM. OA-patienter som också uppvisar PCOM, men ingen HA (dvs normala androgennivåer) kommer att klassificeras som PCOS-fenotyp D. Deltagare med OA, men ingen PCOM eller HA kommer att klassificeras som att ha isolerad OA.
   5. Försökspersoner som presenterar PCOM av TV-U/S kommer att återvända under lutealfasen (dagarna 22-24) av sin menstruationscykel för en serumprogesteronnivå (P4) och deras basala serumprover kommer att analyseras för androgennivåer (totalt [TT] och fritt testosteron [FT], dehydroepiandrosteronsulfat [DHEAS] och androstenedion [A4]). Försökspersoner med PCOM som uppvisar OA (dvs. luteal P4 < 3 ng/ml) kommer att klassificeras som PCOS-fenotyp D. Om de också uppvisar HA (dvs förhöjda androgennivåer) (HA+OA+PCOM) kommer de att klassificeras som att ha PCOM PCOS fenotyp A. PCOM-personer som också uppvisar HA, men ingen OA (d.v.s. luteal P4 ≥3 ng/mL) kommer att klassificeras som PCOS fenotyp C. Deltagare med PCOM, men ingen HA eller OA kommer att klassificeras som att de har isolerat PCOM.

5. Diagnostisera PCOS:

   Besläktade eller efterliknande störningar kommer att uteslutas med anamnes, fysisk undersökning och serum-TSH, PRL och 17-OHP. Studiedeltagare med en basal 17-OHP >2 ng/ml (eller 200 ng/dl) kommer att genomgå en upprepad 17-OHP-mätning i follikelfasen och om 17-OHP fortfarande är > 2ng/ml ett akut adrenokortikotrofiskt hormon (ACTH) ) stimuleringstest kommer att utföras för att utesluta icke-klassisk medfödd adrenal hyperplasi (NCAH). Vi uppskattar, med tanke på våra tidigare data, att cirka 6% av de testade försökspersonerna kommer att kräva ett akut ACTH-stimuleringstest.

   Totalt sett kommer PCOS att diagnostiseras när försökspersoner uppvisar antingen HA+OA+PCOM (fenotyp A), HA+OA (fenotyp B), HA+PCOM (fenotyp C) och OA+PCOM (fenotyp D) och uppvisar normala nivåer av TSH (0,37 till 4,7 mUI/L), PRL (<25 ng/ml) och 17-OHP, enligt vår diagnostiska algoritm.

6. Utvärderingsbesök #2:

   I följande fall kommer försökspersonerna att bokas om till ett andra utvärderingsbesök (utvärderingsbesök #2) för ytterligare bedömning:

   1. Alla patienter med PCOS kommer att schemaläggas för ett återbesök för att genomgå ett 2-timmars 75g oralt glukostoleranstest (OGTT) med 3 ml venöst blod samlat i serumrör 0 minuter och 120 minuter efter glukosbelastning. Glukos- och insulinnivåer (från serumrör) kommer att bedömas efter 0 och 120 min.
   2. Deltagarna kommer att omvärderas under den follikulära fasen av menstruationscykeln (mellan dag 1 och 5):

   i. Med ett upprepat ultraljud om det finns en dominant follikel (≥ 10 mm) eller en ovariecysta vid den första ultraljudsutvärderingen.

   ii. En upprepad mätning av 17-hydroxiprogesteron (17-OHP) i händelse av att den initiala 17-OHP är >2 ng/ml och erhölls under lutealfasen enligt menstruationshistoria. Ungefär 50 % av deltagarna som utvärderas i lutealfas förväntas ha en 17-OHP >2 ng/ml.

   iii. Ett akut intravenöst (iv) ACTH-1-24 (0,25 mg) stimuleringstest, om den initiala och upprepade 17-OHP erhållen under follikelfasen, enligt menstruationshistoria, är > 2 ng/ml.

7. Omvärdering av hormonella nivåer:

Vid slutförandet av studien kommer en upprepad analys av proverna för androgennivåer i alla PCOS-patienter och en grupp "superkontroller" (30 kontroller) att utföras vid ett referenslaboratorium. En fasteglukosnivå analyseras också i en grupp superkontroller (100 kontroller). Genetisk analys skulle kunna utföras beroende på tillgången på ekonomiskt stöd i ett referenslaboratorium.