Estudo Fenótipo e Epidemiologia da Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP) na Colômbia (PEP - Colômbia). (PEP-Colombia)

Durante a primeira visita, os potenciais participantes do estudo, agendados para exame médico ocupacional pré-admissão de rotina no Centro Médico Colmédicos, serão convidados a participar do estudo. Os participantes elegíveis do estudo serão aconselhados sobre os objetivos do estudo e o protocolo do estudo e uma cópia do formulário de consentimento será entregue a eles. Um registro de estudo confidencial contendo detalhes de possíveis participantes do estudo (nome, idade, altura, peso e contato) será iniciado no primeiro dia de visita. O consentimento informado por escrito será obtido de cada participante do estudo antes do recrutamento para o estudo na visita de avaliação número um. Todos os dados pessoais dos participantes do estudo serão protegidos de acordo com a lei (ley 1581de Colombia).

1. Visita de avaliação nº 1:

   Depois de obter um consentimento informado, os dados serão coletados de cada participante do estudo usando um formato padrão em um formulário de relatório clínico (CRF) para coleta uniforme de dados de todos os participantes. Cada CRF terá um número de identificação de série exclusivo e será escrito no idioma local. O CRF será preenchido por um pesquisador treinado (incluindo o PI, co-investigadores e assistentes de pesquisa com treinamento médico). Todos os CRF serão verificados quanto a dados ausentes dentro de 24 horas após a conclusão, e quaisquer dados ausentes serão detectados e coletados imediatamente. Em nenhum momento, o pessoal do estudo terá acesso aos registros médicos ocupacionais do participante, seguindo as restrições definidas na legislação colombiana (resolução 2346 de 2007, R 1918 de 2011).

   Cada participante será submetido a medidas antropométricas (peso, altura, circunferência da cintura e circunferência do quadril) e exame físico para hirsutismo, acne, alopecia, acantose nigricans e aumento da tireóide. Os participantes com pontuação inicial de hirsutismo (mFG) de 4 ou mais (≥ 4) serão reavaliados por um médico. Durante a visita inicial na Colmédicos, uma ultrassonografia pélvica transvaginal ou transabdominal será realizada em todos os participantes, com base na história sexual e no formulário de consentimento por ginecologistas treinados que fazem parte dos investigadores do estudo. A ultrassonografia transvaginal é o método aceito e validado para avaliar a morfologia ovariana no estudo de pacientes com SOP.

   Após um jejum noturno de pelo menos 6 horas (idealmente), uma amostra de 18 ml de sangue venoso será coletada de cada participante do estudo (ou seja, a amostra de jejum basal). Cerca de 12 ml de sangue venoso serão coletados em tubos simples para criopreservação do soro e posterior análise, e o restante em tubos simples para dosagem imediata da glicose no soro.

2. Processamento de amostra:

   As amostras de sangue iniciais serão rotuladas com o número de identificação exclusivo do participante, hora e data da coleta de sangue e data da última menstruação (DUM). As amostras serão obtidas por pessoal de laboratório treinado do centro médico Colmédicos durante as horas da manhã (08:00 às 10:00 horas), independentemente do ciclo menstrual da participante. As participantes com oligomenorréia ou amenorréia farão um teste de gravidez na urina antes da coleta de sangue.

   No laboratório Colmédicos, as amostras de sangue serão separadas em soro, plasma e sangue total por centrifugação durante 20 minutos a 3000 rpm. Os espécimes biológicos serão armazenados, em pequenas alíquotas (de 1,25 ml), em recipientes plásticos de 1,5 a 2,0 ml (cerca de 4 criotubos) capazes de suportar temperaturas de -80 graus centígrados. As amostras aliquotadas serão enviadas ao laboratório ABAD Zona 2 SUR (Carrera 32 No. 2 Sur 47 local 9701) em recipientes de gelo seco pelo pessoal de correio do laboratório onde serão armazenadas a -20 graus centígrados por um período máximo de 3 meses para em processamento. Se necessário, para um armazenamento mais longo, as amostras serão transferidas para o laboratório Inser Medellin e armazenadas a -80 graus centígrados, onde permanecerão sob custódia até seu uso ou descarte final de acordo com o protocolo institucional de gerenciamento de resíduos estabelecido.

3. Análises hormonais e químicas:

   As amostras para o ensaio hormonal e a avaliação inicial serão agrupadas em intervalos regulares para a análise todas as semanas para fornecer aos participantes do estudo resultados oportunos, permitir a classificação dos participantes e minimizar o impacto da variabilidade entre ensaios. Além disso, isso nos permitirá entrar em contato em tempo hábil com os participantes que necessitam de estudos adicionais.

   Todos os participantes serão avaliados de forma uniforme independentemente da fase do ciclo em que se encontrem.

4. Avaliando indivíduos com "Possível SOP":

   A coorte de participantes que inicialmente apresentar características clínicas sugestivas de SOP (ou seja, HA, OA ou PCOM, será designada como "Possível SOP" e será submetida às seguintes medições em suas amostras:

   1. Em todos os indivíduos "Possíveis SOP" TSH, prolactina (PRL) e 17-HP serão medidos nas amostras de soro basal, bem como glicemia de jejum.

      Nota: Todos os indivíduos diagnosticados com SOP devem ter TSH, PRL e 17-HP normais (basicamente ou após estimulação aguda com ACTH).

   2. Em mulheres que se apresentam clinicamente com AH+OA, se o TV-U/S realizado demonstrar PCOM, a paciente é classificada como tendo SOP fenótipo A (HA+OA+PCOM); caso contrário, o sujeito é classificado como tendo SOP fenótipo B (HA+OA).
   3. Indivíduos que se apresentam clinicamente apenas com HA retornarão durante a fase lútea (dias 21-24) de seu ciclo menstrual para um nível sérico de progesterona (P4). Indivíduos com HA que demonstram OA (isto é, P4 lúteo < 3 ng/mL) serão classificados como portadores do fenótipo A da SOP se tiverem PCOM por TV-U/S (HA+OA+PCOM) ou fenótipo B da SOP (HA+OA ) se não apresentarem PCOM. Indivíduos com HA que também demonstram PCOM, mas sem OA (isto é, P4 lútea ≥3 ng/mL) serão classificados como fenótipo C de SOP. Participantes com HA, mas sem PCOM ou OA serão classificados como tendo HA isolado.
   4. Indivíduos apresentando clinicamente apenas com OA, suas amostras séricas basais serão analisadas quanto aos níveis de andrógenos (total [TT] e testosterona livre [FT], sulfato de dehidroepiandrosterona [DHEAS] e androstenediona [A4]). Indivíduos com OA que demonstram HA (ou seja, níveis elevados de andrógenos) serão classificados como tendo fenótipo A de SOP se tiverem PCOM por TV-U/S (HA+OA+PCOM) ou fenótipo B de SOP (HA+OA) se tiverem não exibir PCOM. Indivíduos com OA que também demonstram PCOM, mas sem HA (ou seja, níveis normais de andrógenos) serão classificados como SOP fenótipo D. Participantes com OA, mas sem PCOM ou HA serão classificados como tendo OA isolada.
   5. Indivíduos que apresentam PCCOM por TV-U/S retornarão durante a fase lútea (dias 22-24) de seu ciclo menstrual para um nível sérico de progesterona (P4) e suas amostras séricas basais serão analisadas quanto aos níveis de andrógenos (total [TT] e testosterona livre [FT], sulfato de dehidroepiandrosterona [DHEAS] e androstenediona [A4]). Indivíduos com PCOM que demonstram OA (ou seja, P4 luteal < 3 ng/mL) serão classificados como tendo fenótipo D de SOP. Se eles também demonstrarem HA (ou seja, níveis elevados de androgênio) (HA+OA+PCOM) serão classificados como tendo SOP fenótipo A. Indivíduos com SOP que também demonstram HA, mas sem OA (isto é, P4 luteal ≥3 ng/mL) serão classificados como fenótipo C da SOP. Participantes com SOP, mas sem HA ou OA serão classificados como tendo SOP isolada.

5. Diagnosticando a SOP:

   Distúrbios relacionados ou simulados serão excluídos usando história, exame físico e TSH, PRL e 17-OHP séricos. Os participantes do estudo com 17-OHP basal > 2 ng/ml (ou 200 ng/dl) serão submetidos a uma medição repetida de 17-OHP na fase folicular e se o 17-OHP ainda for > 2 ng/ml, um hormônio adrenocorticotrófico agudo (ACTH ) teste de estimulação será realizado para excluir hiperplasia adrenal congênita não clássica (NCAH). Estimamos, considerando nossos dados anteriores, que aproximadamente 6% dos indivíduos rastreados necessitarão de um teste de estimulação aguda com ACTH.

   No geral, a SOP será diagnosticada quando os indivíduos apresentarem HA+OA+PCOM (fenótipo A), HA+OA (fenótipo B), HA+PCOM (fenótipo C) e OA+PCOM (fenótipo D) e demonstrarem níveis normais de TSH (0,37 a 4,7 mUI/L), PRL (<25 ng/mL) e 17-OHP, conforme nosso algoritmo de diagnóstico.

6. Visita de avaliação nº 2:

   Nos seguintes casos, os participantes serão reagendados para uma segunda visita de avaliação (visita de avaliação nº 2) para avaliação adicional:

   1. Todos os indivíduos com SOP serão agendados para uma consulta de retorno para passar por um teste oral de tolerância à glicose (OGTT) de 75g de 2 horas com 3 ml de sangue venoso coletados em tubos de soro em 0 minutos e 120 minutos pós-carga de glicose. Os níveis de glicose e insulina (a partir de tubos de soro) serão avaliados em 0 e 120 min.
   2. As participantes serão reavaliadas durante a fase folicular do ciclo menstrual (entre o dia 1 e o dia 5):

   eu. Com repetição do ultrassom caso haja folículo dominante (≥ 10 mm) ou cisto ovariano na avaliação ultrassonográfica inicial.

   ii. Uma medição repetida de 17-hidroxiprogesterona (17-OHP) no caso de 17-OHP inicial ser > 2 ng/mL e foi obtida durante a fase lútea de acordo com a história menstrual. Espera-se que aproximadamente 50% dos participantes avaliados na fase lútea tenham 17-OHP >2 ng/mL.

   iii. Um teste de estimulação intravenosa aguda (iv) de ACTH-1-24 (0,25 mg), se a 17-OHP inicial e repetida obtida durante a fase folicular, de acordo com a história menstrual, for > 2 ng/mL.

7. Reavaliando os níveis hormonais:

Na conclusão do estudo, uma análise repetida das amostras para os níveis de andrógenos em todos os indivíduos com SOP e um grupo de 'super-controles' (30 controles) será realizada em um laboratório de referência. Um nível de glicose em jejum também pode ser analisado em um grupo de supercontroles (100 controles). A análise genética pode ser realizada dependendo da disponibilidade de apoio financeiro em um laboratório de referência.