Fenotipo y Epidemiología del Síndrome de Ovario Poliquístico (SOP) en Colombia (PEP - Colombia) Estudio. (PEP-Colombia)

Durante la primera visita, los posibles participantes del estudio, programados para un examen médico ocupacional previo al ingreso de rutina en el Centro Médico Colmédicos, serán invitados a participar en el estudio. Los participantes elegibles del estudio recibirán asesoramiento sobre los objetivos del estudio y el protocolo del estudio y se les entregará una copia del formulario de consentimiento. El primer día de la visita se iniciará un registro confidencial del estudio que contiene los detalles de los posibles participantes del estudio (nombre, edad, altura, peso y contacto). Se obtendrá el consentimiento informado por escrito de cada participante del estudio antes del reclutamiento para el estudio en la visita de evaluación número uno. Todos los datos personales de los participantes del estudio serán protegidos conforme a la ley (ley 1581 de Colombia).

1. Visita de evaluación #1:

   Después de obtener un consentimiento informado, se recopilarán datos de cada participante del estudio utilizando un formato estándar en un formulario de informe clínico (CRF) para la recopilación uniforme de datos de todos los participantes. Cada CRF llevará un número de identificación de serie único y estará escrito en el idioma local. El CRF lo llenará un investigador capacitado (incluido el IP, los co-investigadores y los asistentes de investigación con capacitación médica). Todos los CRF se verificarán en busca de datos faltantes dentro de las 24 horas posteriores a la finalización, y cualquier dato faltante se detectará y recopilará de inmediato. En ningún momento, el personal del estudio tendrá acceso a la historia clínica laboral del participante, siguiendo las restricciones definidas en la legislación colombiana (resolución 2346 de 2007, R 1918 de 2011).

   Cada participante se someterá a medidas antropométricas (peso, altura, circunferencia de la cintura y circunferencia de la cadera) y un examen físico para detectar hirsutismo, acné, alopecia, acantosis nigricans y agrandamiento de la tiroides. Los participantes con una puntuación inicial de hirsutismo (mFG) de 4 o más (≥ 4) serán reevaluados por un médico. Durante la visita inicial en Colmédicos, se realizará una ecografía pélvica transvaginal o transabdominal a todas las participantes, con base en el historial sexual y el formulario de consentimiento, por parte de ginecólogos capacitados que forman parte de los investigadores del estudio. La ecografía transvaginal es el método aceptado y validado para evaluar la morfología ovárica en el estudio de pacientes con SOP.

   Después de un ayuno nocturno de al menos 6 horas (idealmente), se recolectará una muestra de 18 ml de sangre venosa de cada participante del estudio (es decir, la muestra basal en ayunas). Se recogerán unos 12 ml de la sangre venosa en tubos simples para la criopreservación del suero y su posterior análisis, y el resto en tubos simples para la estimación inmediata de la glucosa en suero.

2. Procesamiento de muestras:

   Las muestras de sangre iniciales se etiquetarán con el número de identificación único de la participante, la fecha y la hora de la extracción de sangre y la fecha del último período menstrual (FUM). Las muestras serán obtenidas por personal de laboratorio capacitado del centro médico Colmédicos en horario de mañana (08:00 a 10:00 horas), independientemente del ciclo menstrual de la participante. A las participantes con oligomenorrea o amenorrea se les realizará una prueba de embarazo en orina antes de la muestra de sangre.

   En el laboratorio de Colmédicos, las muestras de sangre serán separadas en suero, plasma y sangre entera por centrifugación durante 20 minutos a 3000 rpm. Las muestras biológicas se almacenarán, en pequeñas alícuotas (de 1,25 ml), en recipientes de plástico de 1,5 a 2,0 ml (unos 4 crioviales) capaces de soportar temperaturas de -80 grados centígrados. Las muestras alícuotas serán enviadas al laboratorio ABAD Zona 2 SUR (Carrera 32 No. 2 Sur 47 local 9701) en recipientes de hielo seco por el personal de mensajería del laboratorio donde serán almacenadas a -20 grados centígrados por un máximo de 3 meses para Procesando. De ser necesario, para un almacenamiento mayor, las muestras serán trasladadas al laboratorio del Inser Medellín y almacenadas a -80 grados centígrados donde permanecerán en custodia hasta su uso o disposición final de acuerdo al protocolo institucional de manejo de residuos establecido.

3. Análisis hormonales y químicos:

   Las muestras para el ensayo hormonal y la evaluación inicial se agruparán en lotes a intervalos regulares para el análisis cada semana para proporcionar a los participantes del estudio resultados oportunos, permitir la clasificación de los participantes y minimizar el impacto de la variabilidad entre ensayos. Además, esto nos permitirá contactar oportunamente a los participantes que requieran estudios adicionales.

   Todos los participantes serán evaluados de manera uniforme independientemente de la fase del ciclo en la que se encuentren.

4. Evaluación de sujetos con "Posible SOP":

   La cohorte de participantes que inicialmente cumplan con las características clínicas sugestivas de PCOS (es decir, HA, OA o PCOM), se designará como "Posible PCOS" y se someterá a las siguientes mediciones en sus muestras:

   1. En todos los sujetos con "Posible PCOS", se medirán la TSH, la prolactina (PRL) y el 17-HP en las muestras de suero basal, así como la glucosa en ayunas.

      Nota: Todos los sujetos diagnosticados con SOP deben tener TSH, PRL y 17-HP normales (basalmente o después de una estimulación aguda con ACTH).

   2. En mujeres que se presentan clínicamente con HA+OA, si el TV-U/S realizado demuestra PCOM, el sujeto se clasifica como que tiene PCOS fenotipo A (HA+OA+PCOM); si no, el sujeto se clasifica como que tiene PCOS fenotipo B (HA+OA).
   3. Los sujetos que presentan clínicamente solo HA regresarán durante la fase lútea (días 21-24) de su ciclo menstrual para un nivel de progesterona sérica (P4). Los sujetos con HA que demuestran OA (es decir, P4 luteínica < 3 ng/mL) se clasificarán con SOP fenotipo A si tienen SOP por TV-U/S (HA+OA+PCOM) o SOP fenotipo B (HA+OA ) si no presentan PCOM. Los sujetos con HA que también muestran PCOM, pero sin OA (es decir, P4 lútea ≥3 ng/mL) se clasificarán como SOP fenotipo C. Los participantes con HA, pero sin PCOM ni OA se clasificarán como con HA aislada.
   4. En los sujetos que presentan clínicamente OA únicamente, se analizarán sus muestras de suero basal para determinar los niveles de andrógenos (total [TT] y testosterona libre [FT], sulfato de dehidroepiandrosterona [DHEAS] y androstenediona [A4]). Los sujetos con OA que demuestran HA (es decir, niveles elevados de andrógenos) se clasificarán con SOP fenotipo A si tienen PCOM por TV-U/S (HA+OA+PCOM) o SOP fenotipo B (HA+OA) si lo tienen no exhibir PCOM. Los sujetos con OA que también muestran PCOM, pero sin HA (es decir, niveles normales de andrógenos) se clasificarán como SOP fenotipo D. Los participantes con OA, pero sin PCOM o HA se clasificarán como con OA aislada.
   5. Los sujetos que presenten PCOM por TV-U/S regresarán durante la fase lútea (días 22-24) de su ciclo menstrual para un nivel de progesterona sérica (P4) y se analizarán sus muestras de suero basal para determinar los niveles de andrógenos (total [TT] y testosterona libre [FT], sulfato de dehidroepiandrosterona [DHEAS] y androstenediona [A4]). Los sujetos con PCOM que demuestran OA (es decir, P4 luteal < 3 ng/mL) se clasificarán con SOP fenotipo D. Si también demuestran HA (es decir, niveles elevados de andrógenos) (HA+OA+PCOM) se clasificarán como que tienen Fenotipo A de SOP. Los sujetos con SOP que también muestran HA, pero sin OA (es decir, P4 lútea ≥3 ng/mL) se clasificarán como SOP con fenotipo C. Los participantes con SOP, pero sin HA ni OA se clasificarán como con SOP aislado.

5. Diagnóstico del SOP:

   Los trastornos relacionados o similares se excluirán mediante la historia clínica, el examen físico y la TSH, PRL y 17-OHP en suero. Los participantes del estudio con un 17-OHP basal > 2 ng/ml (o 200 ng/dl) se someterán a una medición repetida de 17-OHP en la fase folicular y, si el 17-OHP sigue siendo > 2 ng/ml, una hormona adrenocorticotrófica aguda (ACTH ) se realizará una prueba de estimulación para excluir la hiperplasia suprarrenal congénita no clásica (NCAH). Estimamos, considerando nuestros datos anteriores, que aproximadamente el 6% de los sujetos examinados requerirán una prueba de estimulación aguda con ACTH.

   En general, el SOP se diagnosticará cuando los sujetos presenten HA+OA+PCOM (fenotipo A), HA+OA (fenotipo B), HA+PCOM (fenotipo C) y OA+PCOM (fenotipo D) y demuestren niveles normales de TSH (0,37 a 4,7 mUI/L), PRL (<25 ng/mL) y 17-OHP, según nuestro algoritmo de diagnóstico.

6. Visita de evaluación #2:

   En los siguientes casos, los sujetos serán reprogramados para una segunda visita de evaluación (visita de evaluación #2) para una evaluación adicional:

   1. A todos los sujetos con SOP se les programará una visita de regreso para someterse a una prueba de tolerancia a la glucosa oral (OGTT) de 75 g de 2 horas con 3 ml de sangre venosa recolectada en tubos de suero a los 0 minutos y a los 120 minutos después de la carga de glucosa. Los niveles de glucosa e insulina (de los tubos de suero) se evaluarán a los 0 y 120 min.
   2. Las participantes serán reevaluadas durante la fase folicular del ciclo menstrual (entre los días 1 y 5):

   i. Con una ecografía repetida en caso de que exista un folículo dominante (≥ 10 mm) o un quiste ovárico en la evaluación ecográfica inicial.

   ii. Una medición repetida de 17-hidroxiprogesterona (17-OHP) en caso de que la 17-OHP inicial sea >2 ng/mL y se haya obtenido durante la fase lútea de acuerdo con el historial menstrual. Se espera que aproximadamente el 50 % de los participantes evaluados en la fase lútea tengan un 17-OHP >2 ng/mL.

   iii. Una prueba de estimulación intravenosa aguda (iv) con ACTH-1-24 (0,25 mg), si la 17-OHP inicial y repetida obtenida durante la fase folicular, según la historia menstrual, es > 2 ng/mL.

7. Reevaluar los niveles hormonales:

Al finalizar el estudio, se realizará un análisis repetido de las muestras para los niveles de andrógenos en todos los sujetos con SOP y un grupo de "supercontroles" (30 controles) en un laboratorio de referencia. También se analizará un nivel de glucosa en ayunas en un grupo de supercontroles (100 controles). El análisis genético podría realizarse dependiendo de la disponibilidad de apoyo financiero en un laboratorio de referencia.