Fenotipo ed epidemiologia della sindrome dell'ovaio policistico (PCOS) in Colombia (PEP - Colombia) Studio. (PEP-Colombia)

Durante la prima visita, i potenziali partecipanti allo studio, programmati per la visita medica pre-ricovero professionale di routine presso il Centro medico Colmédicos, saranno invitati a partecipare allo studio. I partecipanti allo studio idonei saranno consigliati sugli obiettivi dello studio e sul protocollo dello studio e verrà loro consegnata una copia del modulo di consenso. Il primo giorno della visita verrà avviato un registro di studio riservato contenente i dettagli dei potenziali partecipanti allo studio (nome, età, altezza, peso e contatto). Il consenso informato scritto sarà ottenuto da ciascun partecipante allo studio prima del reclutamento per lo studio nella visita di valutazione numero uno. Tutti i dati personali dei partecipanti allo studio saranno protetti secondo la legge (legge 1581de Colombia).

1. Visita di valutazione n. 1:

   Dopo aver ottenuto un consenso informato, i dati verranno raccolti da ciascun partecipante allo studio utilizzando un formato standard in un modulo di rapporto clinico (CRF) per la raccolta uniforme dei dati da tutti i partecipanti. Ogni CRF riporterà un numero di identificazione seriale univoco e sarà scritto nella lingua locale. Il CRF sarà riempito da un ricercatore qualificato (compresi il PI, i co-ricercatori e gli assistenti di ricerca con formazione medica). Tutti i CRF verranno controllati per i dati mancanti entro 24 ore dal completamento e qualsiasi dato mancante verrà rilevato e raccolto immediatamente. In nessun momento, il personale dello studio avrà accesso alla cartella clinica professionale del partecipante, seguendo le restrizioni definite nella legislazione colombiana (risoluzione 2346 de 2007, R 1918 de 2011).

   Ogni partecipante sarà sottoposto a misurazioni antropometriche (peso, altezza, circonferenza vita e circonferenza fianchi) ed esame fisico per irsutismo, acne, alopecia, acanthosis nigricans e ingrossamento della tiroide. I partecipanti con un punteggio iniziale di irsutismo (mFG) di 4 o più (≥ 4) saranno rivalutati da un medico. Durante la visita iniziale presso Colmédicos, verrà eseguita un'ecografia pelvica transvaginale o transaddominale in tutti i partecipanti, sulla base della storia sessuale e del modulo di consenso da parte di ginecologi qualificati che fanno parte dei ricercatori dello studio. L'ecografia transvaginale è il metodo accettato e validato per valutare la morfologia ovarica nello studio delle pazienti con PCOS.

   Dopo un digiuno notturno di almeno 6 ore (idealmente), verrà raccolto un campione di 18 ml di sangue venoso da ciascun partecipante allo studio (ovvero, il campione a digiuno basale). Circa 12 ml del sangue venoso saranno raccolti in provette lisce per la crioconservazione del siero e la successiva analisi, e il resto in provette lisce per la stima immediata del glucosio nel siero.

2. Elaborazione del campione:

   I campioni di sangue iniziali saranno etichettati con il numero ID univoco del partecipante, l'ora e la data del prelievo del sangue e la data dell'ultimo periodo mestruale (LMP). I campioni saranno ottenuti da personale di laboratorio addestrato dal centro medico Colmédicos durante le ore mattutine (dalle 08:00 alle 10:00), indipendentemente dal ciclo mestruale del partecipante. I partecipanti con oligomenorrea o amenorrea verranno sottoposti a un test di gravidanza sulle urine prima del prelievo di sangue.

   Presso il laboratorio Colmédicos, i campioni di sangue saranno separati in siero, plasma e sangue intero mediante centrifugazione per 20 minuti a 3000 rpm. I campioni biologici saranno conservati, in piccole aliquote (da 1,25 ml), in contenitori di plastica da 1,5 a 2,0 ml (circa 4 crioviali) in grado di resistere a temperature di -80 gradi centigradi. I campioni aliquotati verranno inviati al laboratorio ABAD Zona 2 SUR (Carrera 32 n. 2 Sur 47 locale 9701) in contenitori di ghiaccio secco dal personale del corriere del laboratorio dove saranno conservati a -20 gradi centigradi per un massimo di 3 mesi per in lavorazione. Se necessario, per una conservazione più lunga, i campioni saranno trasferiti al laboratorio Inser Medellin e conservati a -80 gradi centigradi dove rimarranno in custodia fino al loro utilizzo o allo smaltimento finale secondo il protocollo istituzionale stabilito per la gestione dei rifiuti.

3. Analisi ormonali e chimiche:

   I campioni per il dosaggio ormonale e la valutazione iniziale verranno raggruppati a intervalli regolari per l'analisi ogni settimana per fornire ai partecipanti allo studio risultati tempestivi, consentire la classificazione dei partecipanti e ridurre al minimo l'impatto della variabilità inter-dosaggio. Inoltre, questo ci consentirà di contattare tempestivamente i partecipanti che richiedono ulteriori studi.

   Tutti i partecipanti saranno valutati in maniera uniforme indipendentemente dalla fase del ciclo in cui si trovano.

4. Valutare i soggetti con "Possibile PCOS":

   La coorte di partecipanti che inizialmente incontra caratteristiche cliniche suggestive di PCOS (cioè HA, OA o PCOM, sarà designata come "Possibile PCOS" e sarà sottoposta alle seguenti misurazioni nei loro campioni:

   1. In tutti i soggetti "Possible PCOS" TSH, prolattina (PRL) e 17-HP saranno misurati nei campioni di siero basale così come il glucosio a digiuno.

      Nota: tutti i soggetti con diagnosi di PCOS dovrebbero avere un normale TSH, PRL e 17-HP (basale o dopo stimolazione acuta con ACTH).

   2. Nelle donne che si presentano clinicamente con HA+OA, se la TV-U/S eseguita dimostra PCOM il soggetto è classificato come affetto da PCOS fenotipo A (HA+OA+PCOM); in caso contrario, il soggetto è classificato come affetto da PCOS fenotipo B (HA+OA).
   3. I soggetti che presentano clinicamente solo HA torneranno durante la fase luteale (giorni 21-24) del loro ciclo mestruale per un livello di progesterone sierico (P4). I soggetti con HA che dimostrano OA (cioè, P4 luteale < 3 ng/mL) saranno classificati come affetti da PCOS fenotipo A se hanno PCOM da TV-U/S (HA+OA+PCOM) o PCOS fenotipo B (HA+OA ) se non presentano PCOM. I soggetti con HA che dimostrano anche PCOM, ma senza OA (cioè P4 luteale ≥3 ng/mL) saranno classificati come fenotipo C della PCOS. I partecipanti con HA, ma senza PCOM o OA saranno classificati come aventi HA isolato.
   4. Soggetti che presentano clinicamente solo OA, i loro campioni di siero basale saranno analizzati per i livelli di androgeni (totale [TT] e testosterone libero [FT], deidroepiandrosterone solfato [DHEAS] e androstenedione [A4]). I soggetti con OA che dimostrano HA (cioè livelli elevati di androgeni) saranno classificati come affetti da PCOS fenotipo A se hanno PCOM da TV-U/S (HA+OA+PCOM) o PCOS fenotipo B (HA+OA) se lo fanno non esibire PCOM. I soggetti con OA che dimostrano anche PCOM, ma nessun HA (cioè livelli normali di androgeni) saranno classificati come PCOS fenotipo D. I partecipanti con OA, ma nessun PCOM o HA saranno classificati come aventi OA isolata.
   5. I soggetti che presentano PCOM da TV-U/S torneranno durante la fase luteinica (giorni 22-24) del loro ciclo mestruale per un livello di progesterone sierico (P4) e i loro campioni di siero basale saranno analizzati per i livelli di androgeni (totale [TT] e testosterone libero [FT], deidroepiandrosterone solfato [DHEAS] e androstenedione [A4]). I soggetti con PCOM che dimostrano OA (cioè, P4 luteale < 3 ng/mL) saranno classificati come affetti da PCOS fenotipo D. Se dimostrano anche HA (cioè livelli elevati di androgeni) (HA+OA+PCOM) saranno classificati come affetti da Fenotipo PCOS A. I soggetti PCOM che dimostrano anche HA, ma nessun OA (cioè, P4 luteale ≥3 ng / mL) saranno classificati come fenotipo PCOS C. I partecipanti con PCOM, ma nessun HA o OA saranno classificati come aventi PCOM isolato.

5. Diagnosi della PCOS:

   I disturbi correlati o simili verranno esclusi utilizzando anamnesi, esame fisico e TSH sierico, PRL e 17-OHP. I partecipanti allo studio con un 17-OHP basale > 2 ng/ml (o 200 ng/dl) saranno sottoposti a una misurazione ripetuta del 17-OHP nella fase follicolare e se il 17-OHP è ancora > 2 ng/ml un ormone adrenocorticotropo acuto (ACTH ) verrà eseguito un test di stimolazione per escludere l'iperplasia surrenale congenita non classica (NCAH). Stimiamo, considerando i nostri dati precedenti, che circa il 6% dei soggetti sottoposti a screening richiederà un test di stimolazione ACTH acuto.

   Complessivamente, la PCOS verrà diagnosticata quando i soggetti presentano HA+OA+PCOM (fenotipo A), HA+OA (fenotipo B), HA+PCOM (fenotipo C) e OA+PCOM (fenotipo D) e dimostrano livelli normali di TSH (da 0,37 a 4,7 mUI/L), PRL (<25 ng/mL) e 17-OHP, secondo il nostro algoritmo diagnostico.

6. Visita di valutazione n. 2:

   Nei seguenti casi i soggetti saranno riprogrammati per una seconda visita di valutazione (visita di valutazione n. 2) per una valutazione aggiuntiva:

   1. Tutti i soggetti con PCOS saranno programmati per una visita di ritorno per sottoporsi a un test di tolleranza al glucosio orale di 75 g di 2 ore (OGTT) con 3 ml di sangue venoso raccolto in provette per siero a 0 minuti ea 120 minuti dopo il carico di glucosio. I livelli di glucosio e insulina (dalle provette di siero) saranno valutati a 0 e 120 min.
   2. I partecipanti saranno rivalutati durante la fase follicolare del ciclo mestruale (tra il giorno 1 e 5):

   io. Con un'ecografia ripetuta nel caso in cui sia presente un follicolo dominante (≥ 10 mm) o una cisti ovarica alla valutazione ecografica iniziale.

   ii. Una misurazione ripetuta del 17-idrossiprogesterone (17-OHP) nel caso in cui il 17-OHP iniziale fosse >2 ng/ml e fosse stata ottenuta durante la fase luteinica in base alla storia mestruale. Si prevede che circa il 50% dei partecipanti valutati in fase luteinica abbia un 17-OHP > 2 ng/mL.

   iii. Un test di stimolazione acuta endovenosa (iv) con ACTH-1-24 (0,25 mg), se il 17-OHP iniziale e ripetuto ottenuto durante la fase follicolare, in base alla storia mestruale, è > 2 ng/mL.

7. Rivalutare i livelli ormonali:

Al termine dello studio, verrà eseguita un'analisi ripetuta dei campioni per i livelli di androgeni in tutti i soggetti con PCOS e un gruppo di "super-controlli" (30 controlli) presso un laboratorio di riferimento. Un livello di glucosio a digiuno può essere analizzato anche in un gruppo di super controlli (100 controlli). L'analisi genetica potrebbe essere eseguita a seconda della disponibilità di sostegno finanziario in un laboratorio di riferimento.