過敏性腸症候群患者における糞便微生物叢移植の結果に対するドナー選択の役割

研究の説明 簡単な概要: 200 人の患者がプラセボ (自分の糞便) に 1:1:1:1 で無作為に割り付けられ、ドナー A、ドナー B、またはドナー C から 90 g の糞便移植を受けます。糞便移植は、十二指腸の作業チャネルを介して遠位十二指腸に投与されます。胃カメラ。 患者は、ベースライン時と治験終了時点での症状、疲労、生活の質、食事摂取量を測定する5つのアンケートに回答し、ベースライン時とFMT後3、6、12か月目に糞便サンプルを提供するものとする。 腸内細菌叢および糞便細菌は、領域 V3 ～ V9 をカバーする 16S rRNA 遺伝子 PCR DNA 増幅/プローブ ハイブリダイゼーションを使用して測定されます。

詳細な説明: 患者: 過敏性腸症候群 (IBS) の Rome IV 基準を満たす 200 人の患者が研究に含まれるものとする。 IBS-U を除くすべての IBS サブタイプが含まれます。 ドナー: 研究者らは、以前のランダム化二重盲検プラセボ対照研究で使用された基準に従って 3 人のドナー (A、B、C) を選択しました。 これらの基準には、病気の病歴がなく薬を使用していない健康な男性または女性であること、年齢が 20 ～ 50 歳であること、非喫煙者であること、定期的に運動していることなどが含まれます。 彼らは経膣分娩で生まれ、母乳で育てられました。 彼らは生涯に抗生物質による治療を受けたのは数回だけでした。 これらは、FMT のドナーに関するヨーロッパのガイドラインに従ってスクリーニングされます。 ドナーとして受け入れられる前に、GA-map dysbiosis テストを使用して、糞便サンプル中の細菌プロファイルと腸内細菌叢が分析されました。腸内細菌叢指数 (DI) = 1 は正常生理学を示しています。 伝染病を排除するために、治験期間中は3か月ごとに彼らの糞便を検査する必要がある。 ドナー A は 41 歳の男性、ドナー B は 31 歳の女性、ドナー C は 35 歳の男性です。

プロトコール: 患者は、(自分自身の糞便を受け取るため) プラセボに 1:1:1:1 の割合で無作為に割り付けられ、ドナー A、ドナー B、またはドナー C から 90 g の糞便移植を受けます。糞便移植は、十二指腸遠位部に投与されます。胃カメラの作業チャンネル。 患者は、ベースライン時と、FMT の 3、6、および 12 か月後に 5 つのアンケートに回答し、糞便サンプルを提供するものとします。 糞便の収集、調製、投与: ドナーと患者の両方からの糞便を収集し、-80℃で保存する必要があります。 凍結したドナー糞便は冷蔵庫内で 4℃で解凍し、各 30 g を 4℃の冷 0.9% 滅菌生理食塩水 30 mL に溶解します。 溶解した便は、一晩絶食した後、常にファーター乳頭の遠位にある十二指腸の下行部にある胃十二指腸鏡の作業チャンネルを通して患者に投与されます。 アンケート

1. IBS 症状重症度スケール (IBS-SSS)。
2. バーミンガム症状スケール。
3. 疲労評価スケール (FAS)。
4. IBS 生活の質 (IBSQoL) アンケート。
5. 半定量的な食品頻度アンケート (FFQ)
6. ブリストル スツール フォーム スケール

細菌分析: 糞便細菌分析は、領域 V3 ～ V9 をカバーする 16S rRNA 遺伝子 PCR DNA 増幅/プローブ ハイブリダイゼーション技術を使用して実行されます。 DNA 抽出は磁気ビーズを使用して行われます。 DI は、7 つの可変領域 (V3 ～ V9) の 16S rRNA 配列に基づいて、300 以上の細菌株をターゲットとする 54 の DNA プローブに基づいています。 49 個の細菌プローブは種特異的で、19 個のプローブは属レベルで細菌を検出し、9 個のプローブはより高い分類レベルで細菌を検出します。 プローブの標識は、単一ヌクレオチドの伸長と磁気ビーズに結合した相補的プローブへのハイブリダイゼーションによって行われ、BioCode 1000A 128-Plex Analyzer (Applied BioCode、カリフォルニア州サンタフェスプリングス) を使用してシグナル検出が行われます。 DI が 2 を超える場合は、正常生物参照コレクションの微生物叢プロファイルとは異なる微生物叢プロファイルを示します (DI 1 ～ 2: 非腸内細菌叢、DI: 中等度、DI 4～5: 重度の腸内細菌叢異常)。