Die Rolle der Spenderauswahl für das Ergebnis einer fäkalen Mikrobiota-Transplantation bei Patienten mit Reizdarmsyndrom

Studienbeschreibung Kurzzusammenfassung: Zweihundert Patienten werden 1:1:1:1 in Placebo (eigener Kot) randomisiert und erhalten 90 g Stuhltransplantat von Spender A, Spender B oder Spender C. Das Stuhltransplantat wird über den Arbeitskanal von in den distalen Zwölffingerdarm verabreicht ein Gastroskop. Die Patienten müssen 5 Fragebögen zur Messung von Symptomen, Müdigkeit, Lebensqualität und Nahrungsaufnahme zu Beginn und am Ende des Versuchs ausfüllen und zu Beginn sowie 3, 6 und 12 Monate nach der FMT eine Kotprobe abgeben. Dysbiose und fäkale Bakterien werden mithilfe der 16S-rRNA-Gen-PCR-DNA-Amplifikation/Sondenhybridisierung bestimmt, die die Regionen V3–V9 abdeckt.

Detaillierte Beschreibung: Patienten: Zweihundert Patienten, die die Rom-IV-Kriterien für Reizdarmsyndrom (IBS) erfüllen, sollen in die Studie einbezogen werden. Mit Ausnahme von IBS-U sind alle IBS-Subtypen einzubeziehen. Spender: Die Forscher haben 3 Spender (A, B und C) gemäß den in ihrer vorherigen randomisierten, doppelblinden, placebokontrollierten Studie verwendeten Kriterien ausgewählt. Zu diesen Kriterien gehörten: ein gesunder Mann oder eine gesunde Frau ohne Krankheitsgeschichte und ohne Einnahme von Medikamenten, im Alter von 20 bis 50 Jahren, Nichtraucher und regelmäßige körperliche Betätigung. Sie wurden vaginal entbunden und gestillt. Sie wurden im Laufe ihres Lebens nur wenige Male mit Antibiotika behandelt. Sie werden gemäß den europäischen Richtlinien für Spender auf FMT untersucht. Bevor sie als Spender akzeptiert wurden, wurden das Bakterienprofil und die Dysbiose in einer Stuhlprobe mit dem GA-map-Dysbiosetest analysiert, wobei ein Dysbioseindex (DI) = 1 auf Normobiose hinweist. Ihr Kot wird während des Versuchs alle drei Monate untersucht, um eine übertragbare Krankheit auszuschließen. Spender A ist ein Mann im Alter von 41 Jahren, Spender B ist eine Frau im Alter von 31 Jahren und Spender C ist ein Mann im Alter von 35 Jahren.

Protokoll: Die Patienten werden im Verhältnis 1:1:1:1 randomisiert in ein Placebo (um ihren eigenen Kot zu erhalten) eingeteilt und erhalten ein 90-g-Kottransplantat von Spender A, von Spender B oder Spender C. Das Kottransplantat wird dem distalen Zwölffingerdarm über verabreicht Arbeitskanal eines Gastroskops. Die Patienten müssen 5 Fragebögen ausfüllen und zu Studienbeginn sowie 3, 6 und 12 Monate nach der FMT Stuhlproben abgeben. Sammlung, Vorbereitung und Verabreichung von Fäkalien: Die Fäkalien von Spendern und Patienten werden gesammelt und bei -80 °C gelagert. Gefrorener Spenderkot wird im Kühlschrank bei 4 °C aufgetaut und jede 30-g-Portion wird in 30 ml 4 °C kalter, 0,9 %iger steriler Kochsalzlösung gelöst. Der gelöste Stuhl wird den Patienten nach nächtlichem Fasten durch den Arbeitskanal eines Gastroduodenoskops in der Pars Descendens des Duodenums, immer distal der Vater-Papille, verabreicht. Fragebögen

1. Schweregradskala für Reizdarmsyndrom (IBS-SSS).
2. Birmingham-Symptomskala.
3. Fatigue Assessment Scale (FAS).
4. IBS-Lebensqualitätsfragebogen (IBSQoL).
5. Halbquantitativer Fragebogen zur Lebensmittelhäufigkeit (FFQ)
6. Bristol-Hockerform-Skala

Bakterienanalyse: Die fäkale Bakterienanalyse wird mithilfe einer 16S-rRNA-Gen-PCR-DNA-Amplifikations-/Sondenhybridisierungstechnik durchgeführt, die die Regionen V3–V9 abdeckt. Die DNA-Extraktion erfolgt mithilfe von Magnetkügelchen. DI basiert auf 54 DNA-Sonden, die auf der Grundlage ihrer 16S-rRNA-Sequenz in sieben variablen Regionen (V3-V9) auf mehr als 300 Bakterienstämme abzielen. Neunundvierzig Bakteriensonden sind artspezifisch, 19 erkennen Bakterien auf Gattungsebene und 9 Sonden erkennen Bakterien auf höheren taxonomischen Ebenen. Die Sondenmarkierung erfolgt durch Einzelnukleotidverlängerung und Hybridisierung an komplementäre Sonden, die an Magnetkügelchen gekoppelt sind, und Signaldetektion mithilfe des BioCode 1000A 128-Plex-Analysators (Applied BioCode, Santa Fe Springs, CA, USA). Ein DI über 2 zeigt ein Mikrobiota-Profil, das sich von dem der normobiotischen Referenzsammlung unterscheidet (DI 1-2: keine Dysbiose, DI: mäßig, DI 4-5: schwere Dysbiose).