Donorudvælgelses rolle på resultatet af fækal mikrobiotatransplantation hos patienter med irritabel tyktarm

Studiebeskrivelse Kort opsummering: To hundrede patienter randomiseres 1:1:1:1 til placebo (egen fæces), der modtager 90 g fækal transplantation fra donor A, donor B eller donor C. Fækalt transplantat administreres til distal duodenum via arbejdskanalen af et gastroskop. Patienterne skal udfylde 5 spørgeskemaer, der måler symptomer, træthed, livskvalitet og diætindtag ved baseline og ved slutpunktet af forsøget og give en fæcesprøve ved baseline og 3, 6 og 12 måneder efter FMT. Dysbiose og fækal bakteriel bestemmes ved anvendelse af 16S rRNA-gen PCR DNA-amplifikation/probehybridisering, der dækker regionerne V3-V9.

Detaljeret beskrivelse: Patienter: To hundrede patienter, der opfylder Rom IV-kriterierne for irritabel tyktarm (IBS), skal inkluderes i undersøgelsen. Alle IBS-undertyper skal inkluderes med undtagelse af IBS-U. Donorer: Investigatorerne har udvalgt 3 donorer (A, B og C) i henhold til kriterierne brugt i deres tidligere randomiserede dobbeltblindede, placebokontrollerede undersøgelse. Disse kriterier omfattede: at være en sund mand eller kvinde uden sygdomshistorie og uden brug af medicin, i alderen 20-50 år, være ikke-ryger og motionere regelmæssigt. De blev båret af vaginal fødsel og ammet. De blev kun behandlet få gange med antibiotika i løbet af deres liv. De er screenet efter de europæiske retningslinjer for donorer for FMT. Før de accepteres som donorer, blev bakterieprofilen og dysbiosen analyseret i en fæcesprøve ved hjælp af GA-map dysbiosetesten, med et dysbioseindeks (DI)=1, hvilket indikerer normobiose. Deres afføring skal testes hver tredje måned under forsøget for at udelukke smitsom sygdom. Donor A er en mand på 41 år, donor B er en kvinde på 31 år, og donor C er en mand på 35 år.

Protokol: Patienterne randomiseres 1:1:1:1 til placebo (for at modtage deres egen afføring), for at modtage 90 g fækal transplantation fra donor A, fra donor B eller donor C. Fækal transplantation administreres til den distale duodenum via arbejdskanal i et gastroskop. Patienterne skal udfylde 5 spørgeskemaer og levere fækale prøver ved baseline og 3, 6 og 12 måneder efter FMT. Opsamling, forberedelse og administration af afføring: Afføring fra både donorer og patienter skal opsamles og opbevares ved -80ºC. Frosset donorfæces skal optøs i køleskabet ved 4ºC, og hver 30 g portion opløses i 30 ml 4ºC koldt 0,9 % sterilt saltvand. Den opløste afføring administreres til patienterne, efter nattens faste, gennem arbejdskanalen på et gastroduodenoskop i pars descendens af duodenum, altid distalt for Vaters papilla. Spørgeskemaer

1. IBS Symptom Severity Scale (IBS-SSS).
2. Birmingham Symptom Scale.
3. Fatigue Assessment Scale (FAS).
4. Spørgeskema for IBS-livskvalitet (IBSQoL).
5. Semi-kvantitive Food Frequency Questionnaire (FFQ)
6. Bristol Taburet Form Scale

Bakterieanalyse: Fækal bakteriel analyse udføres under anvendelse af en 16S rRNA gen PCR DNA amplifikation/probe hybridiseringsteknik, der dækker regionerne V3-V9. DNA-ekstraktion udføres ved hjælp af magnetiske perler. DI er baseret på 54 DNA-prober rettet mod mere end 300 bakteriestammer baseret på deres 16S rRNA-sekvens i syv variable regioner (V3-V9). 49 bakterielle prober er artsspecifikke, 19 påviser bakterier på slægtsniveau, og 9 prober påviser bakterier på højere taksonomiske niveauer. Probemærkning er ved enkelt nukleotidforlængelse og hybridisering til komplementære prober koblet til magnetiske perler og signalpåvisning ved brug af BioCode 1000A 128-Plex Analyzer (Applied BioCode, Santa Fe Springs, CA, USA). En DI over 2 viser en mikrobiotaprofil, der adskiller sig fra den normobiotiske referencesamling (DI 1-2: non-dysbiose, DI: moderat, DI 4-5: svær dysbiose).