과민성 대장 증후군 환자의 대변 미생물군 이식 결과에 대한 기증자 선택의 역할

연구 설명 요약: 200명의 환자를 기증자 A, 기증자 B 또는 기증자 C로부터 90g 대변 이식을 받은 위약(자신의 대변)으로 1:1:1:1로 무작위 배정합니다. 대변 이식은 작업 채널을 통해 십이지장 말단에 투여됩니다. 위내시경. 환자는 기준선과 시험 종료 시점에 증상, 피로, 삶의 질 및 식이 섭취량을 측정하는 5개의 설문지를 작성해야 하며 기준선과 FMT 후 3, 6, 12개월에 대변 샘플을 제공해야 합니다. 장내 세균 불균형 및 배설물 박테리아는 16S rRNA 유전자 PCR DNA 증폭/프로브 혼성화 덮음 영역 V3-V9를 사용하여 결정됩니다.

상세한 설명: 환자: 과민성 대장 증후군(IBS)에 대한 로마 IV 기준을 충족하는 200명의 환자가 연구에 포함될 것입니다. IBS-U를 제외한 모든 IBS 하위 유형이 포함됩니다. 기증자: 연구자들은 이전의 무작위 이중 맹검, 위약 대조 연구에서 사용된 기준에 따라 3명의 기증자(A, B 및 C)를 선택했습니다. 이러한 기준에는 질병 병력이 없고 약물을 사용하지 않는 건강한 남성 또는 여성, 20~50세, 비흡연자, 규칙적인 운동이 포함됩니다. 그들은 질분만으로 태어났고 모유수유를 했습니다. 그들은 일생 동안 항생제 치료를 몇 번밖에 받지 못했습니다. FMT 기증자를 위한 유럽 지침에 따라 선별됩니다. 기증자로 인정되기 전에 GA-map dysbiosis 테스트를 사용하여 대변 샘플에서 세균 프로필과 dysbiosis를 분석했으며, dysbiosis index(DI)=1은 정상 생체증을 나타냅니다. 전염병을 배제하기 위해 임상시험 기간 중 3개월마다 대변을 검사해야 합니다. 기증자 A는 41세 남성, 기증자 B는 31세 여성, 기증자 C는 35세 남성입니다.

프로토콜: 환자는 기증자 A, 기증자 B 또는 기증자 C로부터 90g 대변 이식을 받기 위해 위약(자신의 대변을 받기 위해)으로 1:1:1:1로 무작위 배정됩니다. 대변 이식은 다음을 통해 원위 십이지장에 투여됩니다. 위내시경의 작업 채널. 환자는 5개의 설문지를 작성하고 기준선과 FMT 후 3, 6, 12개월에 대변 샘플을 전달해야 합니다. 대변 ​​수집, 준비 및 투여: 기증자와 환자 모두의 대변을 수집하여 -80°C에서 보관해야 합니다. 냉동된 기증자 대변은 4°C 냉장고에서 해동되어야 하며, 각 30g 부분을 4°C의 차가운 0.9% 멸균 식염수 30mL에 녹입니다. 용해된 대변은 밤새 단식한 후 항상 바터 유두의 원위 십이지장의 하강부에 있는 위십이지장경의 작업 채널을 통해 환자에게 투여됩니다. 설문지

1. IBS 증상 심각도 척도(IBS-SSS).
2. 버밍엄 증상 척도.
3. 피로 평가 척도(FAS).
4. IBS-삶의 질(IBSQoL) 설문지.
5. 반정량적 식품 빈도 설문지(FFQ)
6. 브리스톨 대변 형태 규모

세균 분석: 대변 세균 분석은 V3-V9 영역을 포괄하는 16S rRNA 유전자 PCR DNA 증폭/프로브 혼성화 기술을 사용하여 수행됩니다. DNA 추출은 Magnetic Bead를 이용하여 이루어집니다. DI는 7개 가변 영역(V3-V9)의 16S rRNA 서열을 기반으로 300개 이상의 박테리아 균주를 표적으로 하는 54개 DNA 프로브를 기반으로 합니다. 49개의 박테리아 프로브는 종 특이적이며, 19개는 속 수준에서 박테리아를 감지하고, 9개 프로브는 더 높은 분류학적 수준에서 박테리아를 감지합니다. 프로브 라벨링은 단일 뉴클레오티드 확장과 자성 비드에 결합된 상보적 프로브에 대한 혼성화 및 BioCode 1000A 128-Plex 분석기(Applied BioCode, Santa Fe Springs, CA, USA)를 사용하여 신호 검출을 통해 이루어집니다. 2를 초과하는 DI는 정상생물학적 참조 컬렉션과 다른 미생물군 프로파일을 보여줍니다(DI 1-2: 비-장내 세균총 이상, DI: 중간, DI 4-5: 심각한 세균 불균형).