De rol van donorselectie op de uitkomst van fecale microbiota-transplantatie bij patiënten met het prikkelbaredarmsyndroom

Studiebeschrijving Korte samenvatting: Tweehonderd patiënten worden 1:1:1:1 gerandomiseerd naar placebo (eigen ontlasting) en ontvangen een fecaal transplantaat van 90 g van donor A, donor B of donor C. Het fecale transplantaat wordt toegediend aan het distale duodenum via een werkkanaal van een gastroscoop. De patiënten moeten 5 vragenlijsten invullen die symptomen, vermoeidheid, kwaliteit van leven en dieetinname meten bij de basislijn en op het eindpunt van de proef en een ontlastingsmonster verstrekken bij de basislijn, en 3, 6 en 12 maanden na FMT. Dysbiose en fecale bacteriën worden bepaald met behulp van 16S rRNA-gen PCR DNA-amplificatie/probe-hybridisatie die de gebieden V3-V9 omvat.

Gedetailleerde beschrijving: Patiënten: Tweehonderd patiënten die voldoen aan de Rome IV-criteria voor het prikkelbare darm syndroom (IBS) zullen in het onderzoek worden opgenomen. Alle IBS-subtypen worden opgenomen, met uitzondering van IBS-U. Donoren: De onderzoekers hebben 3 donoren (A, B en C) geselecteerd op basis van de criteria die zijn gebruikt in hun vorige gerandomiseerde, dubbelblinde, placebogecontroleerde studie. Deze criteria omvatten: een gezonde man of vrouw zijn zonder ziektegeschiedenis en geen medicijnen gebruiken, tussen de 20 en 50 jaar oud zijn, niet-roker zijn en regelmatig sporten. Ze werden gedragen door vaginale bevalling en borstvoeding. Ze werden tijdens hun leven slechts enkele keren met antibiotica behandeld. Zij worden gescreend volgens de Europese richtlijnen voor donoren voor FMT. Voordat ze als donoren werden geaccepteerd, werden het bacteriële profiel en de dysbiose geanalyseerd in een fecaal monster met behulp van de GA-map dysbiose-test, met een dysbiose-index (DI) = 1, wat normobiosis aangeeft. Hun uitwerpselen moeten tijdens de proef elke derde maand worden getest om overdraagbare ziekten uit te sluiten. Donor A is een man van 41 jaar, donor B is een vrouw van 31 jaar en donor C is een man van 35 jaar.

Protocol: De patiënten worden 1:1:1:1 gerandomiseerd naar placebo (om hun eigen ontlasting te ontvangen), om 90 g fecale transplantatie te ontvangen van donor A, van donor B of donor C. Fecale transplantatie wordt toegediend aan het distale duodenum via de werkkanaal van een gastroscoop. De patiënten moeten vijf vragenlijsten invullen en fecale monsters afgeven bij de basislijn, en 3, 6 en 12 maanden na FMT. Verzameling, bereiding en toediening van ontlasting: Feces van zowel de donoren als de patiënten worden verzameld en bewaard bij -80ºC. Bevroren donorfeces wordt in de koelkast bij 4ºC ontdooid en elke portie van 30 g wordt opgelost in 30 ml koude 0,9% steriele zoutoplossing van 4ºC. De opgeloste ontlasting wordt, na een nacht vasten, aan de patiënten toegediend via het werkkanaal van een gastroduodenoscoop in de pars afstammend van de twaalfvingerige darm, altijd distaal van de papilla van Vater. Vragenlijsten

1. IBS-symptoomernstschaal (IBS-SSS).
2. Symptoomschaal van Birmingham.
3. Vermoeidheidsbeoordelingsschaal (FAS).
4. IBS-kwaliteit van leven (IBSQoL) Vragenlijst.
5. Semi-kwantitatieve voedselfrequentievragenlijst (FFQ)
6. Bristol-krukvormschaal

Bacteriële analyse: Fecale bacteriële analyse wordt uitgevoerd met behulp van een 16S rRNA-gen-PCR-DNA-amplificatie/probe-hybridisatietechniek die de regio's V3-V9 omvat. DNA-extractie gebeurt met behulp van magnetische kralen. DI is gebaseerd op 54 DNA-sondes die zich richten op meer dan 300 bacteriestammen op basis van hun 16S-rRNA-sequentie in zeven variabele regio's (V3-V9). Negenenveertig bacteriële probes zijn soortspecifiek, 19 detecteren bacteriën op geslachtsniveau en 9 probes detecteren bacteriën op hogere taxonomische niveaus. Het labelen van probes vindt plaats door verlenging van één nucleotide en hybridisatie met complementaire probes gekoppeld aan magnetische kralen, en signaaldetectie met behulp van BioCode 1000A 128-Plex Analyzer (Applied BioCode, Santa Fe Springs, CA, VS). Een DI boven de 2 toont een microbiotaprofiel dat afwijkt van dat van de normobiotische referentiecollectie (DI 1-2: non-dysbiose, DI: matig, DI 4-5: ernstige dysbiose).