El papel de la selección de donantes en el resultado del trasplante de microbiota fecal en pacientes con síndrome del intestino irritable

Descripción del estudio Breve resumen: Doscientos pacientes son aleatorizados 1:1:1:1 a placebo (sus propias heces), y reciben 90 g de trasplante fecal del donante A, donante B o donante C. El trasplante fecal se administra al duodeno distal a través del canal de trabajo de un gastroscopio. Los pacientes deberán completar 5 cuestionarios que midan los síntomas, la fatiga, la calidad de vida y la ingesta dietética al inicio y al final del ensayo y proporcionar una muestra de heces al inicio y a los 3, 6 y 12 meses después del FMT. La disbiosis y las bacterias fecales se determinan mediante el uso de amplificación de ADN por PCR/hibridación de sonda del gen 16S rRNA que cubre las regiones V3-V9.

Descripción detallada: Pacientes: Se incluirán en el estudio doscientos pacientes que cumplan con los criterios de Roma IV para el síndrome del intestino irritable (SII). Se incluirán todos los subtipos de SII a excepción del SII-U. Donantes: Los investigadores han seleccionado 3 donantes (A, B y C) según los criterios utilizados en su anterior estudio aleatorizado, doble ciego y controlado con placebo. Estos criterios incluyeron: ser un hombre o una mujer sanos, sin antecedentes de enfermedades y sin uso de medicamentos, tener entre 20 y 50 años, no fumar y hacer ejercicio con regularidad. Nacieron por parto vaginal y fueron amamantados. Fueron tratados sólo unas pocas veces con antibióticos durante su vida. Se examinan según las directrices europeas para donantes para FMT. Antes de ser aceptados como donantes, se analizó el perfil bacteriano y la disbiosis en una muestra fecal mediante la prueba de disbiosis GA-map, con un índice de disbiosis (DI) = 1, lo que indica normobiosis. Sus heces se analizarán cada tres meses durante el ensayo para excluir enfermedades transmisibles. El donante A es un hombre de 41 años, el donante B es una mujer de 31 años y el donante C es un hombre de 35 años.

Protocolo: Los pacientes se asignan al azar 1:1:1:1 a placebo (para recibir sus propias heces), para recibir 90 g de trasplante fecal del donante A, del donante B o del donante C. El trasplante fecal se administra al duodeno distal a través del Canal de trabajo de un gastroscopio. Los pacientes completarán 5 cuestionarios y entregarán muestras fecales al inicio y a los 3, 6 y 12 meses después del FMT. Recogida, preparación y administración de heces: Las heces tanto de los donantes como de los pacientes se recogerán y almacenarán a -80ºC. Las heces de los donantes congeladas se descongelarán en el frigorífico a 4 ºC y cada porción de 30 g se disolverá en 30 ml de solución salina estéril al 0,9 % fría a 4 ºC. Las heces disueltas se administran a los pacientes, después del ayuno nocturno, a través del canal de trabajo de un gastroduodenoscopio en la pars descendente del duodeno, siempre distal a la papila de Vater. Cuestionarios

1. Escala de gravedad de los síntomas del SII (IBS-SSS).
2. Escala de síntomas de Birmingham.
3. Escala de Evaluación de la Fatiga (FAS).
4. Cuestionario IBS-calidad de vida (IBSQoL).
5. Cuestionario semicuantitativo de frecuencia alimentaria (FFQ)
6. Escala de forma de taburete Bristol

Análisis bacteriano: El análisis bacteriano fecal se realiza utilizando una técnica de hibridación de sonda/amplificación de ADN por PCR del gen 16S rRNA que cubre las regiones V3-V9. La extracción de ADN se realiza mediante el uso de perlas magnéticas. DI se basa en 54 sondas de ADN que se dirigen a más de 300 cepas bacterianas en función de su secuencia de ARNr 16S en siete regiones variables (V3-V9). Cuarenta y nueve sondas bacterianas son específicas de especie, 19 detectan bacterias a nivel de género y 9 sondas detectan bacterias en niveles taxonómicos superiores. El etiquetado de la sonda se realiza mediante extensión de un solo nucleótido e hibridación con sondas complementarias acopladas a perlas magnéticas y detección de señales mediante el analizador BioCode 1000A 128-Plex (Applied BioCode, Santa Fe Springs, CA, EE. UU.). Un DI superior a 2 muestra un perfil de microbiota que difiere del de la colección de referencia normobiótica (DI 1-2: no disbiosis, DI: moderado, DI 4-5: disbiosis grave).