膠芽腫患者におけるサイトカイン誘導性キラー細胞の最適化 (KillGlio)

この研究の目的は、神経膠芽腫（GBM）患者から得られたCIK細胞の増殖および製造プロトコルを最適化し、ステロイド療法やアルキル化化学療法の併用などの臨床変数との相互作用を評価することです。 この研究では、プロジェクトの特定の目的にそれぞれ対応する複数の仮説に取り組んでいます。

製造プロセスの最適化の主な仮説は、血液誘導体（市販のヒト血清や血小板由来ライセートなど）を添加すると、CIK 細胞生産の効率が向上し（主要評価項目：より高い倍率）、最終細胞製品の品質が向上する可能性があるというものです。 （二次エンドポイント：より高いCIK生存率と抗がん活性）。 この仮説は公表されたデータによって裏付けられていますが、GBM 患者から増殖させた CIK 細胞についてはテストされていません。

研究の 2 番目の目的は、一般的に使用されている神経腫瘍療法が CIK 細胞に及ぼす潜在的な悪影響を評価することです。 具体的には、デキサメタゾンのようなステロイドは、細胞毒性を発揮し、CIK 細胞の抗がん活性を低下させることによって有害な影響を及ぼしているのではないかという仮説を立てています。 この仮説は他のリンパ球タイプでは実証されていますが、CIK 細胞では検討されていません。 血液腫瘍および固形腫瘍の治療における CIK 細胞の広範な使用を考慮すると、毒性の潜在的な閾値 (毒性用量の中央値) を確立することで、神経腫瘍学への応用を超えた貴重な情報が得られる可能性があります。

さらに、この研究では、CIK療法に対するテモゾロミドの潜在的な悪影響も調査されます。 アルキル化剤であるテモゾロミドは、リンパ球に対して異なる細胞毒性を示し、T 細胞は NK 細胞よりも感受性が高くなります。 ここでの仮説は、CIK 細胞が CD3+ T 細胞起源からテモゾロミドに対する感受性を受け継いでいる可能性があるというものです。 GBMにおけるCIK療法を評価する最近の多施設共同第III相臨床試験では、より高用量のテモゾロミドを必要とする標準レジメンのアジュバント段階に合わせてCIK細胞注入が計画されているため、これは特に関連性がある。

研究の第 2 部では、CIK 細胞によって媒介されるような HLA 非依存性免疫監視を回避するために GBM が採用する免疫回避機構の探索に焦点を当てます。

これらの目的を達成するために、GBM患者は、対照としての健康なドナー（HD）とともに、放射線化学療法の開始前にサン・ラファエレ病院に登録される。 各参加者は、EDTA チューブに末梢血サンプル (約 10 ml) を 1 つ提供します。 この研究は、生物学的サンプルを単一時点で収集する横断的研究として設計されています。 約 40 人の参加者 (患者 20 名と健康ボランティア 20 名) が 24 か月間登録され、目的 1 (患者 5 名と HD 5 名)、目的 2 (患者 5 名と HD 5 名)、および探索的分析 (患者 10 名と HD 10 名）。 データ分析と原稿準備のため、さらに 12 か月の非採用期間が予定されています。

年齢、性別、関連する併存疾患、薬物使用状況などの疫学データがすべての被験者について収集されます。 GBM患者の場合、ステロイドの使用（はい/いいえ、投与量、タイミング）や外科的治療のタイミングなど、追加の腫瘍学的病歴の詳細が記録されます。

採血後、末梢血単核球 (PBMC) をフィコール勾配遠心分離によって単離し、IFN-γ、OKT3、および IL-2 で順次処理しながら、21 日間インビトロで増殖させます。 細胞はトリパンブルー色素を使用して手動でカウントされ、それらの表現型はフローサイトメトリーによって特徴付けられます。 CIK 細胞の抗がん活性は、神経膠腫細胞と共培養し、その脱顆粒能力 (CD107a アッセイ) およびフローサイトメトリーで検出される標的細胞に対する細胞傷害活性を評価することによって評価されます。