Optimierung Zytokin-induzierter Killerzellen bei Glioblastom-Patienten (KillGlio)
Eine eingehende Untersuchung von Zytokin-induzierten Killerzellen bei Glioblastom-Patienten
Das Ziel dieser prospektiven Beobachtungskohortenstudie besteht darin, das optimale In-vitro-Produktionsprotokoll für die Erzeugung von Zytokin-induzierten Killerzellen (CIK), einer Art T-Lymphozyten, zu bewerten und die möglichen nachteiligen Auswirkungen gleichzeitiger neuroonkologischer Therapien auf diese Zellen zu bewerten bei Patienten mit Glioblastom (GBM). Darüber hinaus zielt die Studie darauf ab, Mechanismen zur Steigerung der Antitumoraktivität von CIK-Zellen gegen GBM zu erforschen, indem die Immun-Escape-Mechanismen von GBM untersucht werden, die der HLA-unabhängigen Aktivität von CIK-Zellen entgegenwirken können.
Die wichtigsten Fragen, die beantwortet werden sollen, sind:
Was ist das effektivste In-vitro-Produktionsprotokoll zur Erzeugung hochaktiver CIK-Zellen aus GBM-Patienten? Beeinträchtigen gleichzeitige Radiochemotherapien oder Steroidbehandlungen die Aktivierung oder Wirksamkeit von CIK-Zellen? Welche möglichen Strategien gibt es, um GBM-Immunfluchtmechanismen gegen CIK-Zellen entgegenzuwirken? Die Forscher werden CIK-Zellen vergleichen, die nach verschiedenen Protokollen hergestellt wurden, einschließlich der Verwendung von Medien, die mit kommerziellen Blutderivaten ergänzt wurden, um das wirksamste Protokoll zu ermitteln und die Auswirkungen begleitender Therapien auf die Funktionalität von CIK-Zellen zu bewerten.
Die Teilnehmer werden:
Führen Sie eine einzige periphere Blutentnahme durch (GBM-Patienten und gesunde Kontrollpersonen).
Lassen Sie mononukleäre Zellen aus Ihren Blutproben isolieren und mithilfe verschiedener Produktionsprotokolle in vitro als CIK-Zellen vermehren.
Lassen Sie Ihre CIK-Zellen in vitro testen, um den Aktivierungsstatus und die Antitumoraktivität zu beurteilen und optimale Produktionsmethoden und mögliche Strategien zur Überwindung der GBM-Immunflucht zu ermitteln.
Studienübersicht
Status
Bedingungen
Detaillierte Beschreibung
Ziel dieser Studie ist die Optimierung des Expansions- und Herstellungsprotokolls von CIK-Zellen, die von Patienten mit Glioblastom (GBM) gewonnen wurden, und die Beurteilung ihrer Wechselwirkung mit klinischen Variablen, einschließlich der gleichzeitigen Anwendung einer Steroidtherapie und einer alkylierenden Chemotherapie. Die Studie befasst sich mit mehreren Hypothesen, die jeweils einem bestimmten Ziel des Projekts entsprechen.
Für die Optimierung des Herstellungsprozesses besteht die primäre Hypothese darin, dass die Zugabe von Hämoderivaten (wie kommerzielles Humanserum oder aus Blutplättchen gewonnenes Lysat) die Effizienz der CIK-Zellproduktion steigern kann (primärer Endpunkt: höhere Faltungsexpansion) und die Qualität des endgültigen Zellprodukts verbessern kann (sekundärer Endpunkt: höhere CIK-Lebensfähigkeit und Antikrebsaktivität). Diese Hypothese wird durch veröffentlichte Daten gestützt, wurde jedoch nicht an CIK-Zellen getestet, die von GBM-Patienten stammen.
Das zweite Ziel der Studie besteht darin, die möglichen nachteiligen Auswirkungen häufig verwendeter neuroonkologischer Therapien auf CIK-Zellen zu bewerten. Insbesondere gehen wir davon aus, dass Steroide wie Dexamethason eine schädliche Wirkung haben könnten, indem sie Zytotoxizität ausüben und die Antikrebsaktivität von CIK-Zellen verringern. Obwohl diese Hypothese für andere Lymphozytentypen nachgewiesen wurde, wurde sie für CIK-Zellen nicht untersucht. Die Festlegung potenzieller Schwellenwerte für die Toxizität (mittlere toxische Dosis) könnte angesichts der breiten Verwendung von CIK-Zellen bei der Behandlung hämatologischer und solider Tumoren wertvolle Informationen über neuroonkologische Anwendungen hinaus liefern.
Darüber hinaus wird die Studie die möglichen negativen Auswirkungen von Temozolomid auf die CIK-Therapie untersuchen. Temozolomid, ein Alkylierungsmittel, hat eine unterschiedliche Zytotoxizität für Lymphozyten gezeigt, wobei T-Zellen empfindlicher sind als NK-Zellen. Die Hypothese hier ist, dass CIK-Zellen die Empfindlichkeit gegenüber Temozolomid möglicherweise von ihren CD3+-T-Zell-Ursprüngen erben. Dies ist besonders relevant, da in einer kürzlich durchgeführten multizentrischen klinischen Phase-III-Studie zur Evaluierung der CIK-Therapie bei GBM CIK-Zellinfusionen zeitlich mit der adjuvanten Phase der Standardtherapie zusammenfallen, die eine höhere Temozolomid-Dosierung beinhaltet.
Der zweite Teil der Studie wird sich auf die Erforschung der Immun-Escape-Mechanismen konzentrieren, die GBM einsetzt, um der HLA-unabhängigen Immunüberwachung, wie sie durch CIK-Zellen vermittelt wird, zu entgehen.
Um diese Ziele zu erreichen, werden GBM-Patienten vor Beginn der Radiochemotherapie zusammen mit gesunden Spendern (HDs) als Kontrollen im San Raffaele Hospital aufgenommen. Jeder Teilnehmer stellt eine einzelne periphere Blutprobe (ca. 10 ml) in einem EDTA-Röhrchen bereit. Die Studie ist als Querschnittsstudie mit einem einzigen Zeitpunkt für die Sammlung biologischer Proben konzipiert. Ungefähr 40 Teilnehmer (20 Patienten und 20 gesunde Freiwillige) werden über einen Zeitraum von 24 Monaten eingeschrieben, sodass wir Ziel 1 (5 Patienten und 5 HDs), Ziel 2 (5 Patienten und 5 HDs) und die explorative Analyse ( 10 Patienten und 10 HDs). Für die Datenanalyse und Manuskripterstellung ist eine zusätzliche rekrutierungsfreie Zeit von 12 Monaten vorgesehen.
Für alle Probanden werden epidemiologische Daten erhoben, darunter Alter, Geschlecht, relevante Komorbiditäten und Medikamenteneinnahme. Bei GBM-Patienten werden zusätzliche Details zur onkologischen Vorgeschichte erfasst, einschließlich der Verwendung von Steroiden (Ja/Nein, Dosierung und Zeitpunkt) und des Zeitpunkts der chirurgischen Behandlung.
Nach der Blutentnahme werden periphere mononukleäre Blutzellen (PBMCs) durch Ficoll-Gradientenzentrifugation isoliert und 21 Tage lang in vitro expandiert, mit aufeinanderfolgenden Behandlungen von IFN-γ, OKT3 und IL-2. Die Zellen werden manuell mit Trypanblau-Farbstoff gezählt und ihr Phänotyp wird durch Durchflusszytometrie charakterisiert. Die Antikrebsaktivität von CIK-Zellen wird durch Co-Kultivierung mit Gliomzellen und Bewertung ihrer Degranulationsfähigkeit (CD107a-Assay) und zytotoxischen Aktivität gegenüber Zielzellen, ermittelt durch Durchflusszytometrie, bewertet.
Studientyp
Einschreibung (Geschätzt)
Kontakte und Standorte
Studienkontakt
- Name: Giacomo Sferruzza, MD
- Telefonnummer: +393514190013
- E-Mail: sferruzza.giacomo@hsr.it
Studieren Sie die Kontaktsicherung
- Name: Gaetano Finocchiaro, MD
- Telefonnummer: +39022643-2878
- E-Mail: finocchiaro.gaetano@hsr.it
Teilnahmekriterien
Zulassungskriterien
Studienberechtigtes Alter
- Erwachsene
- Älterer Erwachsener
Akzeptiert gesunde Freiwillige
Probenahmeverfahren
Studienpopulation
Wir werden die von GBM betroffenen Patienten untersuchen, die im San Raffaele Hospital gemäß den Kriterien der Weltgesundheitsorganisation 2021 diagnostiziert wurden. Patienten, die die Einschluss- und Ausschlusskriterien erfüllen, werden aufgenommen und im Zeitfenster zwischen der Diagnose (Biopsie oder Tumordebulking) und dem Beginn der Standard-Radiochemotherapie wird eine Blutprobe entnommen. Es werden sowohl männliche als auch weibliche Patienten eingeschlossen, um eine möglichst gleichberechtigte Vertretung in der Analyse zu erreichen.
In die Studie werden auch gesunde Spender aufgenommen, die als Kontrollen im Herstellungsprozess und in der explorativen Analyse dienen.
Beschreibung
Einschlusskriterien für die GBM-Kohorte:
- Alter ≥18 Jahre.
- Der Proband ist bereit und in der Lage, eine Einverständniserklärung zur Teilnahme an der Studie abzugeben.
- Proband mit einer dokumentierten Diagnose von GBM (WHO-Kriterien 2021), bestätigt durch Referenzhistopathologie im San Raffaele Hospital.
Einschlusskriterien für die Kohorte gesunder Freiwilliger:
- Alter ≥18 Jahre.
- Der Proband ist bereit und in der Lage, eine Einverständniserklärung zur Teilnahme an der Studie abzugeben.
- Die Probanden verfügen über einen guten allgemeinen Gesundheitszustand, wie aus der Krankengeschichte hervorgeht
Ausschlusskriterien:
- Der Proband ist nicht bereit oder in der Lage, eine Einverständniserklärung zur Teilnahme an der Studie abzugeben. - Schwangerschaft
- Vorliegen einer akuten Infektion, die eine aktive Behandlung erfordert.
- Dokumentierte ematologische Anomalien: Leukozyten < 3.000/μl oder Lymphozyten < 500/μl oder Neutrophile < 1.000/μl oder Hämoglobin < 9 g/100 ml oder Thrombozyten < 100.000/μl, basierend auf den neuesten Labortests für die klinische Praxis.
- Dokumentierte Immunschwäche
- Dokumentierte Autoimmunerkrankung.
- Dokumentierte positive Serologie für HIV- oder HBs-Antigen.
Studienplan
Wie ist die Studie aufgebaut?
Designdetails
Kohorten und Interventionen
Gruppe / Kohorte |
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Gesunde Kontrollen
In die Studie werden auch gesunde Spender aufgenommen, die als Kontrollen im Herstellungsprozess und in der explorativen Analyse dienen.
Sie werden aus gesunden Personen rekrutiert, die unsere Einheit besuchen
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Patienten, die von einem Glioblastom betroffen sind
Proband mit einer dokumentierten Diagnose eines Glioblastoms (WHO-Kriterien 2021), bestätigt durch Referenzhistopathologie im San Raffaele Hospital.
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Was misst die Studie?
Primäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
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Optimierung des Herstellungsprozesses zur Gewinnung von CIK bei Patienten mit GBM.
Zeitfenster: 3 bis 5 Wochen nach der Einschreibung
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Zytokin-induzierte Killerzellen werden nach verschiedenen Protokollen aus Patienten mit Glioblastom vermehrt.
Eine statistisch signifikant höhere Expansionsfalte im Vergleich zum Standardprotokoll (serumfrei) wird als primärer Endpunkt von Ziel 1 angesehen
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3 bis 5 Wochen nach der Einschreibung
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Ermittlung der besten Anwendbarkeitsbedingungen von CIK bei Patienten mit GBM.
Zeitfenster: 3 bis 5 Wochen nach der Einschreibung
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Zytokininduzierte Killerzellen (CIK) werden mit aufeinanderfolgenden Dosen von Dexamethason und Temozolomid behandelt.
Die Bestimmung der mittleren toxischen Dosis (TD50) wird als Endpunkt zur Untersuchung der gleichzeitigen Anwendung dieser Therapien angesehen.
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3 bis 5 Wochen nach der Einschreibung
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Mitarbeiter und Ermittler
Sponsor
Studienaufzeichnungsdaten
Haupttermine studieren
Studienbeginn (Geschätzt)
Primärer Abschluss (Geschätzt)
Studienabschluss (Geschätzt)
Studienanmeldedaten
Zuerst eingereicht
Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat
Zuerst gepostet (Tatsächlich)
Studienaufzeichnungsaktualisierungen
Letztes Update gepostet (Geschätzt)
Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt
Zuletzt verifiziert
Mehr Informationen
Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie
Schlüsselwörter
Zusätzliche relevante MeSH-Bedingungen
Andere Studien-ID-Nummern
- KillGlio
Plan für individuelle Teilnehmerdaten (IPD)
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Arzneimittel- und Geräteinformationen, Studienunterlagen
Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Arzneimittelprodukt
Studiert ein von der US-amerikanischen FDA reguliertes Geräteprodukt
Produkt, das in den USA hergestellt und aus den USA exportiert wird
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