小さな胞状濾胞由来の COC の CAPA-IVM に対する Super-GDF9 の効果 (sGDF-9)

CAPA-IVM (In Vitro Maturation) テクノロジーは、特に高リスク患者にとって、安全性と治療コストの面で大きな利点を提供する生殖補助医療法です。 これらには、卵巣過剰刺激症候群（OHSS）、静脈血栓症、卵巣捻転、または多嚢胞性卵巣症候群（PCOS）を患う患者が含まれます。これらの患者は通常、多数の胞状卵胞（全患者のほぼ15％を占める）を示します。 CAPA-IVM グループの最初の移植後の出生率は 35.2% ですが、これは従来の IVF グループの 43.2% と統計的には変わりません (リスク差: -8.1%、95% 信頼区間: -16.6% ～ 0.5) %)、1サイクルあたりの良質な胚の数と累積臨床妊娠率は従来の体外受精よりも低いままです。 したがって、CAPA-IVM 培養プロセスを改善して、最適な卵母細胞の数と品質を達成することが不可欠です。

同時に、卵胞液に一般的に見られる成長因子を培地に添加することは、CAPA-IVM における卵母細胞の品質の改善において顕著な進歩を表します。 拡大、代謝、アポトーシスなどの一部の体細胞区画は、卵母細胞分泌因子 (OSF) として知られる可溶性成長因子によって制御されています。 2 つの OSF、成長分化因子 9 (GDF9) と骨形成タンパク質 15 (BMP15) は、マウス、ヒツジ、ヒトなどのさまざまな種の卵胞の発育と生殖能力に重要であることが確認されています。 IVMの培養中に、これらの因子の未成熟型と成熟型の両方、さらにそれらのホモ二量体構造とヘテロ二量体構造が検査されています。 注目すべきことに、ヘテロ二量体構造は、IVM培養中の卵丘-卵母細胞複合体（COC）に対して最もプラスの効果を示しています。

どちらの成長因子もホモ二量体で存在しますが、最近の研究では、GDF9 と BMP15 ヘテロ二量体がクムリンと呼ばれる、より強力な成長因子を形成することもできることが判明しました。 BMP15 はクムリンの潜在的な GDF9 を活性化し、I 型受容体 (ALK4/5) および SMAD2/3 転写因子を介して顆粒膜細胞に強力なシグナル伝達を引き起こします。 生物医学的に操作されたクムリンは、マウスおよびブタモデルにおける胚の転帰を顕著に改善することが提案されている。 最近、スーパー GDF9 と呼ばれる野生型 GDF9 の改変バージョンは、顆粒膜細胞における SMAD2/3 応答性転写アッセイにおいて、GDF9 よりも 1000 倍以上強力で、クムリンより 4 倍以上の活性があることが実証されました。 これまでの研究では、マウスの CAPA-IVM 培地にスーパー GDF9 を添加すると、生体内成熟とよく似た CAPA-IVM 成熟中の排卵カスケードにおける遺伝子発現が誘導されることが示されています。 スーパー GDF9 は、卵丘細胞の増殖を効果的に促進し、インビトロでの卵母細胞の発生能力を高めます。 したがって、スーパー GDF9 は、生産と精製において課題に直面しているクムリンに代わる可能性があります。

この研究では、CAPA-IVM培養中にスーパーGDF9を補給することの影響を調査し、小卵胞からの卵丘-卵母細胞複合体（COC）の結果を改善し、最終的に治療の成功を高めることを目的としています。

• 資格審査

  • この研究はベトナムのホーチミン市にあるミードゥック病院で実施されます。
  • 潜在的に適格な女性には、IVM治療の適応時に研究に関する情報が提供されます。
  • 適格性のスクリーニングは、IVM治療が必要な場合、最初の訪問日に行われます。
  • 患者には研究に関する情報とインフォームドコンセント文書が提供されます。 研究者は、登録前にすべての女性から署名済みのインフォームドコンセント用紙を入手します。
  • 適格な女性は、インフォームドコンセントから 1 ～ 7 日以内に採卵手順を受ける予定です。
• 採卵 採卵手順は、CAPA-IVM サイクルに関するセンターの標準手順に従って行われます。

OPU 後の小卵胞からの卵丘 - 卵母細胞複合体 (COC) は 2 つのグループに分けられます。

• グループ 1: 10 個の寄付された COC を CAPA および IVM ステップで培養し、CAPA-IVM の両方のステップ中に 50 ng/ml Super-GDF9 を添加します。
• グループ 2: 被験者の残りの COC は、CAPA-IVM 中に Super-GDF9 を添加せずに CAPA および IVM ステップで培養されます。

グループ 1 および 2: 容量獲得ステップ後の収集: 使用済み培地およびブランク ウェル。 成熟ステップ後の収集: 使用済み培地、卵丘細胞、およびブランクウェル。

+ CAPA および成熟培養: CAPA および成熟培養は、現在の実験室プロトコルに従って定期的に実行されます。 ICSI は成熟卵母細胞を受精させるために使用されます。