Effet du Super-GDF9 sur CAPA-IVM des COC des petits follicules antraux (sGDF-9)

La technologie CAPA-IVM (In Vitro Maturation) est une méthode de procréation assistée offrant des avantages significatifs en termes de sécurité et de coûts de traitement, notamment pour les patientes à haut risque. Il s'agit notamment des personnes atteintes du syndrome d'hyperstimulation ovarienne (SHO), de thrombose veineuse, de torsion ovarienne ou du syndrome des ovaires polykystiques (SOPK) - qui présentent généralement un nombre élevé de follicules antraux (constituant près de 15 % de tous les patients). Bien que le taux de natalité vivante suite au premier transfert dans le groupe CAPA-IVM soit de 35,2 %, ce qui n'est pas statistiquement différent du groupe FIV conventionnelle à 43,2 % (différence de risque : -8,1 % ; intervalle de confiance à 95 % : -16,6 % à 0,5 %), le nombre d’embryons de bonne qualité par cycle et le taux de grossesse clinique cumulé restent inférieurs à ceux de la FIV conventionnelle. Par conséquent, il est essentiel d’améliorer le processus de culture CAPA-IVM pour obtenir le nombre et la qualité optimaux des ovocytes.

Parallèlement, l’ajout de facteurs de croissance couramment présents dans le liquide folliculaire au milieu de culture représente une avancée remarquable dans l’amélioration de la qualité des ovocytes dans CAPA-IVM. Certains compartiments somatiques, tels que l'expansion, le métabolisme et l'apoptose, sont régulés par des facteurs de croissance solubles, appelés facteurs de sécrétion ovocytaire (OSF). Deux OSF, le facteur de différenciation de croissance 9 (GDF9) et la protéine morphogénétique osseuse 15 (BMP15), ont été identifiés comme essentiels au développement folliculaire et à la fertilité chez diverses espèces telles que la souris, le mouton et l'homme. Au cours de la culture IVM, les formes immatures et matures de ces facteurs ainsi que leurs structures homo- et hétérodimères ont été testées. Notamment, la structure hétérodimère a montré les effets les plus positifs sur les complexes cumulus-ovocytes (COC) au cours de la culture IVM.

Bien que les deux facteurs de croissance existent sous des formes homodimères, des études récentes ont montré que les hétérodimères GDF9 et BMP15 peuvent également former un facteur de croissance plus puissant appelé cumuline. BMP15 active le GDF9 latent dans la cumuline, conduisant à une forte signalisation dans les cellules de la granulosa via les récepteurs de type I (ALK4/5) et les facteurs de transcription SMAD2/3. Il a été proposé que la cumuline issue du génie biomédical améliore sensiblement les résultats embryonnaires dans les modèles murins et porcins. Récemment, il a été démontré qu'une version modifiée du GDF9 de type sauvage, appelée super GDF9, est > 1 000 fois plus puissante que le GDF9 et 4 fois plus active que la cumuline dans les tests transcriptionnels sensibles à SMAD2/3 dans les cellules de la granulosa. Des recherches antérieures ont montré que l'ajout de super GDF9 au milieu CAPA-IVM chez la souris induit l'expression de gènes dans la cascade ovulatoire au cours de la maturation CAPA-IVM qui ressemble beaucoup à la maturation in vivo. Le Super GDF9 favorise efficacement l’expansion des cellules cumulus et améliore la compétence de développement des ovocytes in vitro. Le super GDF9 peut donc potentiellement remplacer la cumuline, qui fait face à des défis de production et de purification.

Cette étude examine l'impact de la supplémentation en super GDF9 pendant la culture CAPA-IVM, dans le but d'améliorer les résultats des complexes cumulus-ovocyte (COC) des petits follicules et, à terme, d'améliorer le succès du traitement.

• Vérification de l'éligibilité

  • Cette étude sera menée à l'hôpital My Duc, Hô Chi Minh-Ville, Vietnam.
  • Les femmes potentiellement éligibles recevront des informations sur l'étude au moment de l'indication du traitement IVM.
  • Le dépistage de l'éligibilité sera effectué le jour de la première visite lorsque le traitement IVM est indiqué.
  • Les patients recevront des informations sur l'étude et des documents de consentement éclairé. Les enquêteurs obtiendront des formulaires de consentement éclairé signés de toutes les femmes avant l'inscription.
  • Les femmes éligibles devront subir des procédures de prélèvement d'ovocytes dans les 1 à 7 jours suivant leur consentement éclairé.
• Récupération des ovocytes La procédure de prélèvement des ovocytes sera menée selon les pratiques standard du centre pour les cycles CAPA-IVM.

Les complexes cumulus-ovocytes (COC) issus de petits follicules après OPU seront divisés en 2 groupes :

• Groupe 1 : 10 COC donnés seront cultivés dans les étapes CAPA et IVM, en ajoutant 50 ng/ml de Super-GDF9 pendant les deux étapes de CAPA-IVM.
• Groupe 2 : Les COC restants du sujet seront cultivés dans les étapes CAPA et IVM sans ajouter de Super-GDF9 pendant CAPA-IVM.

Groupes 1 et 2 : Collecte après l'étape de capacitation : milieux usés et puits vierges. Collecte après l'étape de maturation : milieux usés, cumulus et puits à blanc.

+ Culture CAPA et Maturation : La culture CAPA et Maturation sera réalisée en routine selon les protocoles de laboratoire en vigueur. L'ICSI sera utilisée pour féconder les ovocytes matures.