Effekt av Super-GDF9 på CAPA-IVM av COCs fra små antralfollikler (sGDF-9)

CAPA-IVM (In Vitro Maturation) teknologi er en assistert reproduksjonsmetode som gir betydelige fordeler når det gjelder sikkerhet og behandlingskostnader, spesielt for høyrisikopasienter. Disse inkluderer personer med ovariehyperstimuleringssyndrom (OHSS), venøs trombose, ovarietorsjon eller polycystisk ovariesyndrom (PCOS) - som vanligvis har et høyt antall antralfollikler (som utgjør nesten 15 % av alle pasienter). Selv om fødselsraten etter den første overføringen i CAPA-IVM-gruppen er 35,2 %, noe som ikke er statistisk forskjellig fra den konvensjonelle IVF-gruppen på 43,2 % (risikoforskjell: -8,1 %; 95 % konfidensintervall: -16,6 % til 0,5 %), forblir antall embryoer av god kvalitet per syklus og den kumulative kliniske graviditetsraten lavere enn ved konvensjonell IVF. Derfor er det viktig å forbedre CAPA-IVM-kulturprosessen for å oppnå det optimale antallet og kvaliteten på oocytter.

Samtidig representerer tilsetning av vekstfaktorer som vanligvis finnes i follikulærvæske til kulturmediet et bemerkelsesverdig fremskritt når det gjelder å forbedre oocyttkvaliteten i CAPA-IVM. Noen somatiske rom, som ekspansjon, metabolisme og apoptose, reguleres av løselige vekstfaktorer, kjent som oocyttsekresjonsfaktorer (OSF). To OSF-er, Growth differentiation factor 9 (GDF9) og Bone morfogenetic protein 15 (BMP15), har blitt identifisert som kritiske for follikulær utvikling og fruktbarhet hos forskjellige arter som mus, sauer og mennesker. Under IVM-kultur har både de umodne og modne formene av disse faktorene så vel som deres homo- og heterodimerstrukturer blitt testet. Spesielt har heterodimerstrukturen vist de mest positive effektene på cumulus-oocyttkomplekser (COC) under IVM-kultur.

Selv om begge vekstfaktorene eksisterer i homodimere former, har nyere studier funnet at GDF9- og BMP15-heterodimeren også kan danne en mer potent vekstfaktor kalt cumulin. BMP15 aktiverer latent GDF9 i cumulin, noe som fører til sterk signalering i granulosaceller via type I reseptorer (ALK4/5) og SMAD2/3 transkripsjonsfaktorer. Biomedisinsk konstruert cumulin har blitt foreslått for å merkbart forbedre embryoutfall i muse- og svinemodeller. Nylig har en modifisert versjon av villtype GDF9, kalt super GDF9, blitt vist å være >1000 ganger mer potent enn GDF9 og 4 ganger mer aktivitet enn cumulin i SMAD2/3-responsive transkripsjonsanalyser i granulosaceller. Tidligere forskning har illustrert at tilsetning av super GDF9 til CAPA-IVM-medier hos mus induserer genuttrykk i eggløsningskaskaden under CAPA-IVM-modning som ligner in vivo-modning. Super GDF9 fremmer effektivt cumuluscelleekspansjon og forbedrer oocyttutviklingskompetansen in vitro. Derfor kan super GDF9 potensielt erstatte cumulin, som står overfor utfordringer i produksjon og rensing.

Denne studien undersøker virkningen av å supplere super GDF9 under CAPA-IVM-kultur, med sikte på å forbedre resultatene av cumulus-oocyttkomplekser (COC) fra små follikler og til slutt forbedre behandlingssuksessen.

• Screening for kvalifisering

  • Denne studien vil bli utført ved My Duc Hospital, Ho Chi Minh City, Vietnam.
  • Kvinner som er potensielt kvalifiserte vil bli gitt informasjon om studien på tidspunktet for IVM-behandlingsindikasjon.
  • Screening for kvalifisering vil bli utført på dagen for det første besøket når IVM-behandlingen er indisert.
  • Pasientene vil få informasjon om studien og informert samtykkedokumenter. Etterforskerne vil innhente signerte skjemaer for informert samtykke fra alle kvinner før påmelding.
  • Kvalifiserte kvinner vil etter planen gjennomgå prosedyrer for oocytthenting innen 1-7 dager fra informert samtykke.
• Henting av oocytter. Oocytthentingsprosedyren vil bli utført i henhold til senterets standardpraksis for CAPA-IVM-sykluser.

Cumulus-oocyttkomplekser (COC) fra små follikler etter OPU vil bli delt inn i 2 grupper:

• Gruppe 1: 10 donerte p-piller vil bli dyrket i CAPA- og IVM-trinnene, og legge til 50ng/ml Super-GDF9 under begge trinnene i CAPA-IVM.
• Gruppe 2: Fagets gjenværende COC vil bli dyrket i CAPA- og IVM-trinnene uten å legge til Super-GDF9 under CAPA-IVM.

Gruppe 1 og 2: Innsamling etter kapasiteringstrinnet: brukte medier og tomme brønner. Innsamling etter modningstrinnet: brukte medier, cumuluscelle og tomme brønner.

+ CAPA og modningskultur: CAPA og modningskultur vil bli utført rutinemessig etter gjeldende laboratorieprotokoller. ICSI vil bli brukt til å befrukte modne oocytter.