Efecto de Super-GDF9 sobre CAPA-IVM de AOC de pequeños folículos antrales (sGDF-9)

La tecnología CAPA-IVM (Maduración In Vitro) es un método de reproducción asistida que ofrece importantes beneficios en términos de seguridad y costes de tratamiento, especialmente para pacientes de alto riesgo. Estos incluyen personas con síndrome de hiperestimulación ovárica (SHO), trombosis venosa, torsión ovárica o síndrome de ovario poliquístico (SOP), que normalmente presentan una gran cantidad de folículos antrales (que constituyen casi el 15% de todos los pacientes). Aunque la tasa de nacidos vivos después de la primera transferencia en el grupo CAPA-IVM es del 35,2 %, lo que no es estadísticamente diferente del grupo de FIV convencional con un 43,2 % (diferencia de riesgo: -8,1 %; intervalo de confianza del 95 %: -16,6 % a 0,5 %), el número de embriones de buena calidad por ciclo y la tasa acumulada de embarazo clínico siguen siendo inferiores que en la FIV convencional. Por lo tanto, es esencial mejorar el proceso de cultivo CAPA-IVM para lograr el número y la calidad óptimos de ovocitos.

Al mismo tiempo, agregar factores de crecimiento que se encuentran comúnmente en el líquido folicular al medio de cultivo representa un avance notable en la mejora de la calidad de los ovocitos en CAPA-IVM. Algunos compartimentos somáticos, como la expansión, el metabolismo y la apoptosis, están regulados por factores de crecimiento solubles, conocidos como factores de secreción de ovocitos (OSF). Se han identificado dos OSF, el factor de diferenciación del crecimiento 9 (GDF9) y la proteína morfogenética ósea 15 (BMP15), como críticos para el desarrollo folicular y la fertilidad en varias especies, como ratones, ovejas y humanos. Durante el cultivo IVM, se han probado tanto las formas inmaduras como maduras de estos factores, así como sus estructuras homo y heterodímeras. En particular, la estructura del heterodímero ha mostrado los efectos más positivos sobre los complejos cúmulo-ovocito (AOC) durante el cultivo de MIV.

Aunque ambos factores de crecimiento existen en formas homodiméricas, estudios recientes han encontrado que el heterodímero GDF9 y BMP15 también puede formar un factor de crecimiento más potente llamado cumulina. BMP15 activa el GDF9 latente en la cumulina, lo que genera una fuerte señalización en las células de la granulosa a través de receptores tipo I (ALK4/5) y factores de transcripción SMAD2/3. Se ha propuesto que la cumulina modificada biomédicamente mejore notablemente los resultados de los embriones en modelos de ratón y porcino. Recientemente, se ha demostrado que una versión modificada de GDF9 de tipo salvaje, llamada super GDF9, es >1000 veces más potente que GDF9 y 4 veces más actividad que la cumulina en ensayos transcripcionales de respuesta a SMAD2/3 en células de la granulosa. Investigaciones anteriores han ilustrado que la adición de super GDF9 al medio CAPA-IVM en ratones induce la expresión genética en la cascada ovulatoria durante la maduración de CAPA-IVM que se parece mucho a la maduración in vivo. Super GDF9 promueve eficazmente la expansión de las células del cúmulo y mejora la competencia de desarrollo de los ovocitos in vitro. Por lo tanto, el super GDF9 puede potencialmente reemplazar la cumulina, que enfrenta desafíos en la producción y purificación.

Este estudio investiga el impacto de suplementar super GDF9 durante el cultivo CAPA-IVM, con el objetivo de mejorar los resultados de los complejos cúmulo-ovocitos (AOC) de folículos pequeños y, en última instancia, mejorar el éxito del tratamiento.

• Evaluación de elegibilidad

  • Este estudio se llevará a cabo en el Hospital My Duc, Ciudad Ho Chi Minh, Vietnam.
  • Las mujeres que sean potencialmente elegibles recibirán información sobre el estudio en el momento de la indicación del tratamiento con MIV.
  • La evaluación de elegibilidad se realizará el día de la primera visita cuando esté indicado el tratamiento IVM.
  • Los pacientes recibirán información sobre el estudio y documentos de consentimiento informado. Los investigadores obtendrán formularios de consentimiento informado firmados de todas las mujeres antes de la inscripción.
  • Se programará que las mujeres elegibles se sometan a procedimientos de recolección de ovocitos dentro de 1 a 7 días desde el consentimiento informado.
• Recuperación de ovocitos El procedimiento de recogida de ovocitos se llevará a cabo de acuerdo con las prácticas estándar del centro para los ciclos CAPA-IVM.

Los complejos cúmulo-ovocitos (AOC) de folículos pequeños después de la OPU se dividirán en 2 grupos:

• Grupo 1: se cultivarán 10 AOC donados en los pasos CAPA e IVM, agregando 50 ng/ml de Super-GDF9 durante ambos pasos en CAPA-IVM.
• Grupo 2: los AOC restantes del sujeto se cultivarán en los pasos CAPA e IVM sin agregar Super-GDF9 durante CAPA-IVM.

Grupos 1 y 2: Recolección después del paso de capacitación: medios gastados y pocillos en blanco. Recolección después del paso de maduración: medios gastados, células de cúmulo y pocillos en blanco.

+ CAPA y cultivo de maduración: CAPA y cultivo de maduración se realizarán de forma rutinaria siguiendo los protocolos de laboratorio actuales. Se utilizará ICSI para fertilizar ovocitos maduros.