Wpływ Super-GDF9 na CAPA-IVM COC z małych pęcherzyków antralnych (sGDF-9)

Technologia CAPA-IVM (dojrzewanie in vitro) to metoda wspomaganego rozrodu oferująca znaczne korzyści w zakresie bezpieczeństwa i kosztów leczenia, szczególnie w przypadku pacjentów wysokiego ryzyka. Należą do nich osoby z zespołem hiperstymulacji jajników (OHSS), zakrzepicą żylną, skrętem jajnika lub zespołem policystycznych jajników (PCOS), u których zazwyczaj występuje duża liczba pęcherzyków antralnych (co stanowi prawie 15% wszystkich pacjentek). Chociaż wskaźnik urodzeń żywych po pierwszym transferze w grupie CAPA-IVM wynosi 35,2%, co nie różni się statystycznie od grupy konwencjonalnego IVF wynoszącej 43,2% (różnica ryzyka: -8,1%; 95% przedział ufności: -16,6% do 0,5 %), liczba dobrej jakości zarodków na cykl i skumulowany odsetek ciąż klinicznych pozostają niższe niż w przypadku konwencjonalnego zapłodnienia in vitro. Dlatego niezbędne jest usprawnienie procesu hodowli CAPA-IVM w celu uzyskania optymalnej liczby i jakości oocytów.

Jednocześnie dodanie czynników wzrostu powszechnie występujących w płynie pęcherzykowym do pożywki hodowlanej stanowi niezwykły postęp w poprawie jakości oocytów w CAPA-IVM. Niektóre przedziały somatyczne, takie jak ekspansja, metabolizm i apoptoza, są regulowane przez rozpuszczalne czynniki wzrostu, znane jako czynniki wydzielania oocytów (OSF). Stwierdzono, że dwa OSF, czynnik różnicowania wzrostu 9 (GDF9) i białko morfogenetyczne kości 15 (BMP15), mają kluczowe znaczenie dla rozwoju pęcherzyków i płodności u różnych gatunków, takich jak myszy, owce i ludzie. W trakcie hodowli IVM badano zarówno niedojrzałe, jak i dojrzałe formy tych czynników, a także ich struktury homo- i heterodimeryczne. Warto zauważyć, że struktura heterodimeru wykazała najbardziej pozytywny wpływ na kompleksy wzgórek-oocyt (COC) podczas hodowli IVM.

Chociaż oba czynniki wzrostu występują w postaciach homodimerycznych, ostatnie badania wykazały, że heterodimer GDF9 i BMP15 może również tworzyć silniejszy czynnik wzrostu zwany kumulą. BMP15 aktywuje utajony GDF9 w kumulnie, prowadząc do silnej sygnalizacji w komórkach ziarnistych za pośrednictwem receptorów typu I (ALK4/5) i czynników transkrypcyjnych SMAD2/3. Zaproponowano, że kumulina uzyskana biomedycznie może zauważalnie poprawić wyniki zarodków w modelach myszy i świń. Niedawno wykazano, że zmodyfikowana wersja GDF9 typu dzikiego, zwana super GDF9, jest > 1000 razy silniejsza niż GDF9 i 4 razy większa aktywność niż kumulina w testach transkrypcji reagujących na SMAD2/3 w komórkach ziarnistych. Poprzednie badania wykazały, że dodanie super GDF9 do pożywki CAPA-IVM u myszy indukuje ekspresję genów w kaskadzie owulacyjnej podczas dojrzewania CAPA-IVM, które bardzo przypomina dojrzewanie in vivo. Super GDF9 skutecznie promuje ekspansję komórek wzgórka i zwiększa kompetencje rozwojowe oocytów in vitro. Dlatego super GDF9 może potencjalnie zastąpić kumulę, która stoi przed wyzwaniami w produkcji i oczyszczaniu.

W tym badaniu zbadano wpływ suplementacji super GDF9 podczas hodowli CAPA-IVM, mając na celu poprawę wyników leczenia kompleksów wzgórek-oocyt (COC) z małych pęcherzyków i ostatecznie zwiększenie skuteczności leczenia.

• Sprawdzanie kwalifikowalności

  • Badanie to zostanie przeprowadzone w szpitalu My Duc w Ho Chi Minh w Wietnamie.
  • Kobiety, które potencjalnie kwalifikują się do badania, otrzymają informacje na temat badania w momencie wskazania wskazania do leczenia IVM.
  • Badanie kwalifikacyjne zostanie przeprowadzone w dniu pierwszej wizyty, gdy wskazane jest leczenie IVM.
  • Pacjenci otrzymają informacje na temat badania i dokumenty dotyczące świadomej zgody. Przed włączeniem do badania badacze otrzymają od wszystkich kobiet podpisane formularze świadomej zgody.
  • Kwalifikujące się kobiety zostaną poddane procedurze pobrania oocytów w ciągu 1–7 dni od uzyskania świadomej zgody.
• Pobieranie oocytów Procedura pobierania oocytów zostanie przeprowadzona zgodnie ze standardowymi praktykami ośrodka dotyczącymi cykli CAPA-IVM.

Kompleksy Cumulus-Oocyte (COC) z małych pęcherzyków po OPU zostaną podzielone na 2 grupy:

• Grupa 1: 10 oddanych COC będzie hodowanych na etapach CAPA i IVM, dodając 50 ng/ml Super-GDF9 na obu etapach CAPA-IVM.
• Grupa 2: Pozostałe COC pacjenta będą hodowane na etapach CAPA i IVM bez dodawania Super-GDF9 podczas CAPA-IVM.

Grupy 1 i 2: Zbieranie po etapie kapacytacji: zużyte podłoża i ślepe dołki. Zbieranie po etapie dojrzewania: zużyte podłoże, wzgórek i ślepe dołki.

+ CAPA i kultura dojrzewania: CAPA i hodowla dojrzewania będą przeprowadzane rutynowo zgodnie z obowiązującymi protokołami laboratoryjnymi. ICSI zostanie użyte do zapłodnienia dojrzałych oocytów.