Effekt af Super-GDF9 på CAPA-IVM af COC'er fra små antralfollikler (sGDF-9)

CAPA-IVM (In Vitro Maturation) teknologi er en assisteret reproduktionsmetode, der giver betydelige fordele med hensyn til sikkerhed og behandlingsomkostninger, især for højrisikopatienter. Disse omfatter personer med ovariehyperstimuleringssyndrom (OHSS), venøs trombose, ovarietorsion eller polycystisk ovariesyndrom (PCOS) - som typisk har et højt antal antralfollikler (som udgør næsten 15 % af alle patienter). Selvom den levende fødselsrate efter den første overførsel i CAPA-IVM-gruppen er 35,2 %, hvilket ikke er statistisk forskellig fra den konventionelle IVF-gruppe på 43,2 % (risikoforskel: -8,1 %; 95 % konfidensinterval: -16,6 % til 0,5 %), forbliver antallet af embryoner af god kvalitet pr. cyklus og den kumulative kliniske graviditetsrate lavere end ved konventionel IVF. Derfor er det vigtigt at forbedre CAPA-IVM dyrkningsprocessen for at opnå det optimale antal og kvaliteten af ​​oocytter.

Samtidig repræsenterer tilføjelse af vækstfaktorer, der almindeligvis findes i follikulær væske, til dyrkningsmediet et bemærkelsesværdigt fremskridt med hensyn til at forbedre oocytkvaliteten i CAPA-IVM. Nogle somatiske kompartmenter, såsom ekspansion, metabolisme og apoptose, reguleres af opløselige vækstfaktorer, kendt som oocytsekretionsfaktorer (OSF'er). To OSF'er, Growth differentiation factor 9 (GDF9) og Bone morfogenetic protein 15 (BMP15), er blevet identificeret som kritiske for follikulær udvikling og fertilitet hos forskellige arter såsom mus, får og mennesker. Under IVM-kultur er både de umodne og modne former af disse faktorer såvel som deres homo- og heterodimere strukturer blevet testet. Navnlig har heterodimerstrukturen vist de mest positive virkninger på cumulus-oocytkomplekser (COC'er) under IVM-kultur.

Selvom begge vækstfaktorer eksisterer i homodimere former, har nyere undersøgelser fundet, at GDF9 og BMP15 heterodimeren også kan danne en mere potent vækstfaktor kaldet cumulin. BMP15 aktiverer latent GDF9 i cumulin, hvilket fører til stærk signalering i granulosaceller via type I-receptorer (ALK4/5) og SMAD2/3-transkriptionsfaktorer. Biomedicinsk manipuleret cumulin er blevet foreslået til mærkbart at forbedre embryoresultater i muse- og svinemodeller. For nylig er en modificeret version af vildtype GDF9, kaldet super GDF9, blevet vist at være >1000 gange mere potent end GDF9 og 4 gange mere aktivitet end cumulin i SMAD2/3-responsive transkriptionsassays i granulosaceller. Tidligere forskning har illustreret, at tilføjelse af super GDF9 til CAPA-IVM-medier i mus inducerer genekspression i ægløsningskaskaden under CAPA-IVM-modning, der ligner in vivo-modning. Super GDF9 fremmer effektivt cumulus-celleudvidelse og forbedrer oocyternes udviklingskompetence in vitro. Derfor kan super GDF9 potentielt erstatte cumulin, som står over for udfordringer i produktion og oprensning.

Denne undersøgelse undersøger virkningen af ​​at supplere super GDF9 under CAPA-IVM-kultur med det formål at forbedre resultaterne af cumulus-oocytkomplekser (COC'er) fra små follikler og i sidste ende forbedre behandlingssuccesen.

• Screening for berettigelse

  • Denne undersøgelse vil blive udført på My Duc Hospital, Ho Chi Minh City, Vietnam.
  • Kvinder, der er potentielt kvalificerede, vil få information om undersøgelsen på tidspunktet for IVM-behandlingsindikation.
  • Screening for egnethed vil blive udført på dagen for det første besøg, når IVM-behandlingen er indiceret.
  • Patienterne vil modtage information om undersøgelsen og informerede samtykkedokumenter. Efterforskerne vil indhente underskrevne informerede samtykkeformularer fra alle kvinder før tilmelding.
  • Kvalificerede kvinder vil blive planlagt til at gennemgå oocytopsamlingsprocedurer inden for 1-7 dage fra informeret samtykke.
• Udvinding af oocytter. Oocytopsamlingsproceduren vil blive udført i overensstemmelse med centrets standardpraksis for CAPA-IVM-cyklusser.

Cumulus-oocytkomplekser (COC'er) fra små follikler efter OPU vil blive opdelt i 2 grupper:

• Gruppe 1: 10 donerede COC'er vil blive dyrket i CAPA- og IVM-trinene, tilsat 50ng/ml Super-GDF9 under begge trin i CAPA-IVM.
• Gruppe 2: Emnets resterende COC'er vil blive dyrket i CAPA- og IVM-trinene uden at tilføje Super-GDF9 under CAPA-IVM.

Gruppe 1 og 2: Indsamling efter kapaciteringstrinnet: brugte medier og tomme brønde. Indsamling efter modningstrinnet: brugte medier, cumuluscelle og tomme brønde.

+ CAPA og modningskultur: CAPA og modningskultur vil blive udført rutinemæssigt efter gældende laboratorieprotokoller. ICSI vil blive brugt til at befrugte modne oocytter.