Wirkung von Super-GDF9 auf CAPA-IVM von KOK aus kleinen Antralfollikeln (sGDF-9)

Die CAPA-IVM-Technologie (In-vitro-Maturation) ist eine assistierte Reproduktionsmethode, die insbesondere für Hochrisikopatienten erhebliche Vorteile hinsichtlich Sicherheit und Behandlungskosten bietet. Dazu gehören Personen mit ovariellem Überstimulationssyndrom (OHSS), Venenthrombose, Ovarialtorsion oder polyzystischem Ovarialsyndrom (PCOS), die typischerweise eine hohe Anzahl an Antralfollikeln aufweisen (was fast 15 % aller Patienten ausmacht). Obwohl die Lebendgeburtenrate nach dem ersten Transfer in der CAPA-IVM-Gruppe 35,2 % beträgt, unterscheidet sie sich statistisch gesehen nicht von der konventionellen IVF-Gruppe mit 43,2 % (Risikounterschied: -8,1 %; 95 %-Konfidenzintervall: -16,6 % bis 0,5). %), bleiben die Anzahl qualitativ hochwertiger Embryonen pro Zyklus und die kumulative klinische Schwangerschaftsrate niedriger als bei der konventionellen IVF. Daher ist die Verbesserung des CAPA-IVM-Kulturprozesses zur Erzielung der optimalen Anzahl und Qualität der Eizellen unerlässlich.

Gleichzeitig stellt die Zugabe von Wachstumsfaktoren, die üblicherweise in der Follikelflüssigkeit vorkommen, zum Kulturmedium einen bemerkenswerten Fortschritt bei der Verbesserung der Eizellenqualität bei CAPA-IVM dar. Einige somatische Kompartimente wie Expansion, Stoffwechsel und Apoptose werden durch lösliche Wachstumsfaktoren reguliert, die als Oozytensekretionsfaktoren (OSFs) bekannt sind. Zwei OSFs, Wachstumsdifferenzierungsfaktor 9 (GDF9) und Knochenmorphogenetisches Protein 15 (BMP15), wurden als entscheidend für die Follikelentwicklung und Fruchtbarkeit bei verschiedenen Arten wie Mäusen, Schafen und Menschen identifiziert. Während der IVM-Kultur wurden sowohl die unreifen und reifen Formen dieser Faktoren als auch ihre Homo- und Heterodimerstrukturen getestet. Bemerkenswert ist, dass die Heterodimerstruktur während der IVM-Kultur die positivsten Auswirkungen auf Cumulus-Oozyten-Komplexe (COCs) gezeigt hat.

Obwohl beide Wachstumsfaktoren in homodimeren Formen vorliegen, haben neuere Studien ergeben, dass das GDF9- und BMP15-Heterodimer auch einen wirksameren Wachstumsfaktor namens Cumulin bilden kann. BMP15 aktiviert latentes GDF9 in Cumulin, was zu einer starken Signalübertragung in Granulosazellen über Typ-I-Rezeptoren (ALK4/5) und SMAD2/3-Transkriptionsfaktoren führt. Es wurde vorgeschlagen, dass biomedizinisch hergestelltes Cumulin die Embryonenergebnisse in Maus- und Schweinemodellen deutlich verbessert. Kürzlich wurde gezeigt, dass eine modifizierte Version von Wildtyp-GDF9, Super-GDF9 genannt, in SMAD2/3-responsiven Transkriptionstests in Granulosazellen > 1000-mal wirksamer als GDF9 und 4-mal aktiver als Cumulin ist. Frühere Untersuchungen haben gezeigt, dass die Zugabe von Super-GDF9 zu CAPA-IVM-Medien bei Mäusen die Genexpression in der Ovulationskaskade während der CAPA-IVM-Reifung induziert, die der In-vivo-Reifung sehr ähnlich ist. Super GDF9 fördert effektiv die Expansion von Kumuluszellen und verbessert die Entwicklungskompetenz der Eizelle in vitro. Daher kann Super-GDF9 möglicherweise Cumulin ersetzen, das bei der Herstellung und Reinigung vor Herausforderungen steht.

Diese Studie untersucht die Auswirkungen der Ergänzung von Super-GDF9 während der CAPA-IVM-Kultur mit dem Ziel, die Ergebnisse von Cumulus-Oozyten-Komplexen (COCs) aus kleinen Follikeln zu verbessern und letztendlich den Behandlungserfolg zu steigern.

• Prüfung auf Eignung

  • Diese Studie wird im My Duc Hospital in Ho-Chi-Minh-Stadt, Vietnam, durchgeführt.
  • Frauen, die potenziell geeignet sind, werden zum Zeitpunkt der IVM-Behandlungsindikation über die Studie informiert.
  • Das Screening auf Eignung wird am Tag des ersten Besuchs durchgeführt, wenn die IVM-Behandlung angezeigt ist.
  • Den Patienten werden Informationen über die Studie und Einverständniserklärungen zur Verfügung gestellt. Die Ermittler werden vor der Einschreibung von allen Frauen unterschriebene Einverständniserklärungen einholen.
  • Berechtigte Frauen werden innerhalb von 1–7 Tagen nach Einverständniserklärung einer Eizellentnahme unterzogen.
• Entnahme der Eizellen Das Verfahren zur Entnahme der Eizellen wird gemäß den Standardpraktiken des Zentrums für CAPA-IVM-Zyklen durchgeführt.

Cumulus-Oozyten-Komplexe (COCs) aus kleinen Follikeln nach OPU werden in zwei Gruppen eingeteilt:

• Gruppe 1: 10 gespendete COCs werden in den CAPA- und IVM-Schritten kultiviert, wobei in beiden Schritten in CAPA-IVM 50 ng/ml Super-GDF9 hinzugefügt werden.
• Gruppe 2: Die verbleibenden COCs des Probanden werden in den CAPA- und IVM-Schritten kultiviert, ohne dass während der CAPA-IVM Super-GDF9 hinzugefügt wird.

Gruppen 1 und 2: Sammeln nach dem Kapazitationsschritt: verbrauchte Medien und leere Vertiefungen. Sammeln nach dem Reifungsschritt: verbrauchtes Medium, Kumuluszelle und leere Vertiefungen.

+ CAPA und Reifungskultur: CAPA und Reifungskultur werden routinemäßig gemäß den aktuellen Laborprotokollen durchgeführt. ICSI wird zur Befruchtung reifer Eizellen eingesetzt.