Effekt av Super-GDF9 på CAPA-IVM av COCs från små antrala folliklar (sGDF-9)

CAPA-IVM (In Vitro Maturation) teknologi är en assisterad reproduktionsmetod som erbjuder betydande fördelar när det gäller säkerhet och behandlingskostnader, särskilt för högriskpatienter. Dessa inkluderar individer med ovariehyperstimuleringssyndrom (OHSS), venös trombos, ovarietorsion eller polycystiskt ovariesyndrom (PCOS) - som vanligtvis uppvisar ett stort antal antralfolliklar (som utgör nästan 15 % av alla patienter). Även om antalet levande födslar efter den första överföringen i CAPA-IVM-gruppen är 35,2 %, vilket inte skiljer sig statistiskt från den konventionella IVF-gruppen på 43,2 % (riskskillnad: -8,1 %; 95 % konfidensintervall: -16,6 % till 0,5 %), förblir antalet embryon av god kvalitet per cykel och den kumulativa kliniska graviditetsfrekvensen lägre än vid konventionell IVF. Därför är det viktigt att förbättra CAPA-IVM-odlingsprocessen för att uppnå det optimala antalet och kvaliteten på oocyter.

Samtidigt, att lägga till tillväxtfaktorer som vanligtvis finns i follikulär vätska till odlingsmediet representerar ett anmärkningsvärt framsteg när det gäller att förbättra oocytkvaliteten i CAPA-IVM. Vissa somatiska fack, såsom expansion, metabolism och apoptos, regleras av lösliga tillväxtfaktorer, kända som oocytsekretionsfaktorer (OSF). Två OSF, Growth differentiation factor 9 (GDF9) och Bone morfogenetic protein 15 (BMP15), har identifierats som kritiska för follikelutveckling och fertilitet hos olika arter som möss, får och människor. Under IVM-odling har både de omogna och mogna formerna av dessa faktorer samt deras homo- och heterodimerstrukturer testats. Noterbart har heterodimerstrukturen visat de mest positiva effekterna på cumulus-oocytkomplex (COC) under IVM-odling.

Även om båda tillväxtfaktorerna existerar i homodimera former, har nya studier funnit att GDF9- och BMP15-heterodimeren också kan bilda en mer potent tillväxtfaktor som kallas cumulin. BMP15 aktiverar latent GDF9 i cumulin, vilket leder till stark signalering i granulosaceller via typ I-receptorer (ALK4/5) och SMAD2/3-transkriptionsfaktorer. Biomedicinskt konstruerad kumulin har föreslagits för att märkbart förbättra embryonresultat i mus- och svinmodeller. Nyligen har en modifierad version av vildtyp GDF9, kallad super GDF9, visats vara >1000 gånger mer potent än GDF9 och 4 gånger mer aktivitet än kumulin i SMAD2/3-responsiva transkriptionsanalyser i granulosaceller. Tidigare forskning har illustrerat att tillsats av super GDF9 till CAPA-IVM-media hos möss inducerar genuttryck i ägglossningskaskaden under CAPA-IVM-mognad som nära liknar mognad in vivo. Super GDF9 främjar effektivt cumuluscellexpansion och förbättrar oocyternas utvecklingskompetens in vitro. Därför kan super GDF9 potentiellt ersätta kumulin, som står inför utmaningar i produktion och rening.

Denna studie undersöker effekten av att komplettera super GDF9 under CAPA-IVM-odling, i syfte att förbättra resultaten av cumulus-oocytkomplex (COC) från små folliklar och i slutändan förbättra behandlingsframgången.

• Screening för behörighet

  • Denna studie kommer att genomföras på My Duc Hospital, Ho Chi Minh City, Vietnam.
  • Kvinnor som är potentiellt kvalificerade kommer att få information om studien vid tidpunkten för IVM-behandlingsindikation.
  • Screening för behörighet kommer att utföras på dagen för det första besöket när IVM-behandlingen är indicerad.
  • Patienterna kommer att få information om studien och informerade samtyckesdokument. Utredarna kommer att få undertecknade informerade samtyckesformulär från alla kvinnor före registreringen.
  • Kvalificerade kvinnor kommer att genomgå oocytupptagningsprocedurer inom 1-7 dagar från informerat samtycke.
• Oocythämtning. Oocytupptagningsproceduren kommer att utföras enligt centrets standardpraxis för CAPA-IVM-cykler.

Cumulus-oocytkomplex (COC) från små folliklar efter OPU kommer att delas in i 2 grupper:

• Grupp 1: 10 donerade p-piller kommer att odlas i CAPA- och IVM-stegen och lägga till 50 ng/ml Super-GDF9 under båda stegen i CAPA-IVM.
• Grupp 2: Ämnets återstående COC kommer att odlas i CAPA- och IVM-stegen utan att lägga till Super-GDF9 under CAPA-IVM.

Grupp 1 och 2: Insamling efter kapaciteringssteget: förbrukade media och tomma brunnar. Insamling efter mognadssteget: förbrukade media, cumuluscell och tomma brunnar.

+ CAPA och Mognadskultur: CAPA och Mognadskultur kommer att utföras rutinmässigt enligt gällande laboratorieprotokoll. ICSI kommer att användas för att befrukta mogna oocyter.