Účinek Super-GDF9 na CAPA-IVM COC z malých antrálních folikulů (sGDF-9)

Technologie CAPA-IVM (In Vitro Maturation) je metoda asistované reprodukce nabízející významné výhody z hlediska bezpečnosti a nákladů na léčbu, zejména u vysoce rizikových pacientů. Patří mezi ně jedinci s ovariálním hyperstimulačním syndromem (OHSS), žilní trombózou, torzí ovárií nebo syndromem polycystických ovarií (PCOS) – kteří mají typicky vysoký počet antrálních folikulů (tvoří téměř 15 % všech pacientů). Přestože míra porodnosti po prvním transferu ve skupině CAPA-IVM je 35,2 %, což se statisticky neliší od skupiny konvenčního IVF na úrovni 43,2 % (rozdíl rizika: -8,1 %; 95% interval spolehlivosti: -16,6 % až 0,5 %), počet kvalitních embryí na cyklus a kumulativní počet klinických těhotenství zůstávají nižší než u konvenčního IVF. Proto je nezbytné zlepšit proces kultivace CAPA-IVM pro dosažení optimálního počtu a kvality oocytů.

Současně přidání růstových faktorů běžně se vyskytujících ve folikulární tekutině do kultivačního média představuje pozoruhodný pokrok ve zlepšování kvality oocytů u CAPA-IVM. Některé somatické kompartmenty, jako je expanze, metabolismus a apoptóza, jsou regulovány rozpustnými růstovými faktory, známými jako faktory sekrece oocytů (OSF). Dva OSF, růstový diferenciační faktor 9 (GDF9) a kostní morfogenetický protein 15 (BMP15), byly identifikovány jako kritické pro vývoj folikulů a plodnost u různých druhů, jako jsou myši, ovce a lidé. Během IVM kultivace byly testovány jak nezralé, tak zralé formy těchto faktorů, stejně jako jejich homo- a heterodimerní struktury. Je pozoruhodné, že heterodimerní struktura prokázala nejpozitivnější účinky na komplexy cumulus-oocyte (COC) během IVM kultivace.

Ačkoli oba růstové faktory existují v homodimerních formách, nedávné studie zjistily, že heterodimer GDF9 a BMP15 může také tvořit silnější růstový faktor nazývaný cumulin. BMP15 aktivuje latentní GDF9 v cumulinu, což vede k silné signalizaci v granulózních buňkách prostřednictvím receptorů typu I (ALK4/5) a transkripčních faktorů SMAD2/3. Biomedicínsky upravený kumulín byl navržen pro výrazné zlepšení výsledků embryí u myších a prasečích modelů. Nedávno bylo prokázáno, že modifikovaná verze GDF9 divokého typu, nazývaná super GDF9, je >1000krát účinnější než GDF9 a 4krát větší aktivita než cumulin v SMAD2/3-responzivních transkripčních testech v granulózních buňkách. Předchozí výzkum ukázal, že přidání super GDF9 do média CAPA-IVM u myší indukuje expresi genu v ovulační kaskádě během zrání CAPA-IVM, která se velmi podobá zrání in vivo. Super GDF9 účinně podporuje expanzi buněk cumulus a zvyšuje vývojovou kompetenci oocytů in vitro. Super GDF9 tedy může potenciálně nahradit cumulin, který čelí výzvám při výrobě a čištění.

Tato studie zkoumá dopad suplementace super GDF9 během kultivace CAPA-IVM s cílem zlepšit výsledky komplexů cumulus-oocyte (COC) z malých folikulů a v konečném důsledku zvýšit úspěšnost léčby.

• Prověřování způsobilosti

  • Tato studie bude provedena v nemocnici My Duc v Ho Či Minově Městě ve Vietnamu.
  • Ženám, které jsou potenciálně vhodné, budou poskytnuty informace o studii v době indikace IVM léčby.
  • Screening způsobilosti bude proveden v den první návštěvy, kdy je indikována léčba IVM.
  • Pacientům budou poskytnuty informace o studii a dokumenty informovaného souhlasu. Vyšetřovatelé získají od všech žen před zařazením podepsané formuláře informovaného souhlasu.
  • Oprávněné ženy budou naplánovány k odběru oocytů během 1-7 dnů od informovaného souhlasu.
• Získávání oocytů Postup odběru oocytů bude prováděn podle standardních postupů centra pro cykly CAPA-IVM.

Kumulus-oocytové komplexy (COC) z malých folikulů po OPU budou rozděleny do 2 skupin:

• Skupina 1: 10 darovaných COC bude kultivováno v krocích CAPA a IVM s přidáním 50 ng/ml Super-GDF9 během obou kroků v CAPA-IVM.
• Skupina 2: Zbývající COC subjektu budou kultivovány v krocích CAPA a IVM bez přidání Super-GDF9 během CAPA-IVM.

Skupiny 1 a 2: Sběr po kapacitním kroku: použité médium a prázdné jamky. Odběr po kroku zrání: použité médium, kumula a prázdné jamky.

+ CAPA a kultivace zrání: CAPA a kultivace zrání budou prováděny rutinně podle současných laboratorních protokolů. ICSI bude použito k oplodnění zralých oocytů.