Effect van Super-GDF9 op CAPA-IVM van COC's uit kleine antrale follikels (sGDF-9)

CAPA-IVM-technologie (In Vitro Maturation) is een geassisteerde voortplantingsmethode die aanzienlijke voordelen biedt op het gebied van veiligheid en behandelingskosten, vooral voor patiënten met een hoog risico. Hiertoe behoren personen met het ovarieel hyperstimulatiesyndroom (OHSS), veneuze trombose, ovariële torsie of polycysteus ovariumsyndroom (PCOS) – die doorgaans een groot aantal antrale follikels vertonen (bijna 15% van alle patiënten). Hoewel het levendgeborenencijfer na de eerste overdracht in de CAPA-IVM-groep 35,2% bedraagt, wat met 43,2% statistisch niet verschilt van de conventionele IVF-groep (risicoverschil: -8,1%; 95% betrouwbaarheidsinterval: -16,6% tot 0,5%) %) blijven het aantal embryo's van goede kwaliteit per cyclus en het cumulatieve klinische zwangerschapspercentage lager dan bij conventionele IVF. Daarom is het verbeteren van het CAPA-IVM-kweekproces om het optimale aantal en de optimale kwaliteit van eicellen te bereiken essentieel.

Tegelijkertijd vertegenwoordigt het toevoegen van groeifactoren die gewoonlijk worden aangetroffen in folliculair vocht aan het kweekmedium een ​​opmerkelijke vooruitgang in het verbeteren van de eicelkwaliteit bij CAPA-IVM. Sommige somatische compartimenten, zoals expansie, metabolisme en apoptose, worden gereguleerd door oplosbare groeifactoren, bekend als oöcytsecretiefactoren (OSF's). Er is vastgesteld dat twee OSF's, groeidifferentiatiefactor 9 (GDF9) en botmorfogenetisch eiwit 15 (BMP15), cruciaal zijn voor de folliculaire ontwikkeling en vruchtbaarheid bij verschillende soorten zoals muizen, schapen en mensen. Tijdens de IVM-cultuur zijn zowel de onvolwassen als de volwassen vormen van deze factoren, evenals hun homo- en heterodimere structuren getest. Met name de heterodimeerstructuur heeft tijdens de IVM-kweek de meest positieve effecten op cumulus-oöcytencomplexen (COC's) laten zien.

Hoewel beide groeifactoren in homodimere vormen voorkomen, hebben recente onderzoeken aangetoond dat het GDF9- en BMP15-heterodimeer ook een krachtigere groeifactor kunnen vormen, genaamd cumuline. BMP15 activeert latent GDF9 in cumuline, wat leidt tot sterke signalering in granulosacellen via type I-receptoren (ALK4/5) en SMAD2/3-transcriptiefactoren. Er is voorgesteld dat biomedisch gemanipuleerd cumuline de embryo-uitkomsten in muis- en varkensmodellen merkbaar verbetert. Onlangs is aangetoond dat een gemodificeerde versie van wildtype GDF9, super GDF9 genaamd,> 1000 keer krachtiger is dan GDF9 en 4 keer meer activiteit dan cumuline in SMAD2/3-responsieve transcriptionele testen in granulosacellen. Eerder onderzoek heeft geïllustreerd dat het toevoegen van super GDF9 aan CAPA-IVM-media bij muizen genexpressie induceert in de ovulatoire cascade tijdens CAPA-IVM-rijping, die sterk lijkt op in vivo rijping. Super GDF9 bevordert effectief de expansie van cumuluscellen en verbetert de ontwikkelingscompetentie van eicellen in vitro. Daarom kan super-GDF9 mogelijk cumuline vervangen, dat voor uitdagingen staat bij de productie en zuivering.

Deze studie onderzoekt de impact van het aanvullen van super GDF9 tijdens CAPA-IVM-kweek, met als doel de resultaten van cumulus-oöcytencomplexen (COC's) uit kleine follikels te verbeteren en uiteindelijk het succes van de behandeling te vergroten.

• Screening op geschiktheid

  • Deze studie zal worden uitgevoerd in het My Duc Hospital, Ho Chi Minh City, Vietnam.
  • Vrouwen die mogelijk in aanmerking komen, krijgen informatie over het onderzoek op het moment van de IVM-behandelingsindicatie.
  • Screening op geschiktheid vindt plaats op de dag van het eerste bezoek wanneer de IVM-behandeling geïndiceerd is.
  • Patiënten ontvangen informatie over het onderzoek en documenten over geïnformeerde toestemming. De onderzoekers zullen vóór inschrijving ondertekende toestemmingsformulieren van alle vrouwen verkrijgen.
  • Vrouwen die in aanmerking komen, zullen binnen 1-7 dagen na geïnformeerde toestemming een procedure voor het ophalen van eicellen ondergaan.
• Ophalen van eicellen De procedure voor het ophalen van eicellen zal worden uitgevoerd volgens de standaardpraktijken van het centrum voor CAPA-IVM-cycli.

Cumulus-oöcytcomplexen (COC's) uit kleine follikels na OPU zullen in 2 groepen worden verdeeld:

• Groep 1: 10 gedoneerde COC's zullen worden gekweekt in de CAPA- en IVM-stappen, waarbij 50 ng/ml Super-GDF9 wordt toegevoegd tijdens beide stappen in CAPA-IVM.
• Groep 2: De resterende COC's van de proefpersoon zullen worden gekweekt in de CAPA- en IVM-stappen zonder Super-GDF9 toe te voegen tijdens CAPA-IVM.

Groepen 1 en 2: Verzamelen na de capacitatiestap: verbruikte media en blanco putjes. Verzamelen na de rijpingsstap: verbruikte media, cumuluscellen en blanco putjes.

+ CAPA en rijpingscultuur: CAPA en rijpingscultuur zullen routinematig worden uitgevoerd volgens de huidige laboratoriumprotocollen. ICSI zal worden gebruikt om rijpe eicellen te bevruchten.