Влияние Super-GDF9 на CAPA-IVM КОК из мелких антральных фолликулов (sGDF-9)

Технология CAPA-IVM (созревание in vitro) — это вспомогательный репродуктивный метод, предлагающий значительные преимущества с точки зрения безопасности и затрат на лечение, особенно для пациентов из группы высокого риска. К ним относятся лица с синдромом гиперстимуляции яичников (СГЯ), венозным тромбозом, перекрутом яичника или синдромом поликистозных яичников (СПКЯ), у которых обычно наблюдается большое количество антральных фолликулов (составляющих почти 15% всех пациентов). Хотя уровень живорождения после первого переноса в группе CAPA-IVM составляет 35,2%, что статистически не отличается от группы обычного ЭКО - 43,2% (разница рисков: -8,1%; 95% доверительный интервал: от -16,6% до 0,5). %), количество эмбрионов хорошего качества за цикл и кумулятивная частота клинической беременности остаются ниже, чем при традиционном ЭКО. Поэтому улучшение процесса культивирования CAPA-IVM для достижения оптимального количества и качества ооцитов имеет важное значение.

В то же время добавление в культуральную среду факторов роста, обычно встречающихся в фолликулярной жидкости, представляет собой значительный прогресс в улучшении качества ооцитов при CAPA-IVM. Некоторые соматические компартменты, такие как экспансия, метаболизм и апоптоз, регулируются растворимыми факторами роста, известными как факторы секреции ооцитов (OSF). Два OSF, фактор дифференциации роста 9 (GDF9) и костный морфогенетический белок 15 (BMP15), были идентифицированы как критические для развития фолликулов и фертильности у различных видов, таких как мыши, овцы и люди. При культивировании IVM были протестированы как незрелые, так и зрелые формы этих факторов, а также их гомо- и гетеродимерные структуры. Примечательно, что структура гетеродимера показала наиболее положительное влияние на комплексы кумулюс-ооциты (COC) во время культуры IVM.

Хотя оба фактора роста существуют в гомодимерных формах, недавние исследования показали, что гетеродимеры GDF9 и BMP15 также могут образовывать более мощный фактор роста, называемый кумулин. BMP15 активирует латентный GDF9 в кумулине, что приводит к сильной передаче сигналов в гранулезных клетках через рецепторы типа I (ALK4/5) и факторы транскрипции SMAD2/3. Было предложено, что биомедицинский кумулин заметно улучшает исход эмбрионов на моделях мышей и свиней. Недавно было продемонстрировано, что модифицированная версия GDF9 дикого типа, названная суперGDF9, в более чем в 1000 раз более эффективна, чем GDF9, и в 4 раза более активна, чем кумулин, в SMAD2/3-чувствительных транскрипционных анализах в гранулезных клетках. Предыдущие исследования показали, что добавление суперGDF9 к среде CAPA-IVM у мышей индуцирует экспрессию генов в овуляторном каскаде во время созревания CAPA-IVM, что очень похоже на созревание in vivo. Super GDF9 эффективно способствует расширению кумулюсных клеток и повышает способность к развитию ооцитов in vitro. Следовательно, суперGDF9 потенциально может заменить кумулин, производство и очистка которого сталкивается с проблемами.

В этом исследовании изучается влияние добавления суперGDF9 во время культивирования CAPA-IVM с целью улучшения результатов кумулюсно-ооцитарных комплексов (COC) из небольших фолликулов и, в конечном итоге, повышения успеха лечения.

• Проверка на соответствие требованиям

  • Это исследование будет проводиться в больнице My Duc, Хошимин, Вьетнам.
  • Женщинам, которые потенциально соответствуют критериям участия, будет предоставлена ​​информация об исследовании во время назначения лечения IVM.
  • Проверка соответствия требованиям будет проводиться в день первого визита, когда показано лечение IVM.
  • Пациентам будет предоставлена ​​информация об исследовании и документы об информированном согласии. Перед включением в исследование исследователи получат подписанные формы информированного согласия от всех женщин.
  • Женщинам, имеющим право на участие в программе, будет назначено проведение процедур забора яйцеклеток в течение 1–7 дней с момента информированного согласия.
• Извлечение ооцитов Процедура забора ооцитов будет проводиться в соответствии со стандартной практикой центра для циклов CAPA-IVM.

Кумулюсно-ооцитарные комплексы (КОК) из малых фолликулов после ОПУ будут разделены на 2 группы:

• Группа 1: 10 донорских КОК будут культивированы на этапах CAPA и IVM, добавляя 50 нг/мл Super-GDF9 на обоих этапах CAPA-IVM.
• Группа 2: Остальные КОК субъекта будут культивироваться на этапах CAPA и IVM без добавления Super-GDF9 во время CAPA-IVM.

Группы 1 и 2: Сбор после этапа капацитации: отработанная среда и пустые лунки. Сбор после стадии созревания: отработанная среда, кумулюсные клетки и пустые лунки.

+ CAPA и культура созревания: CAPA и культура созревания будут проводиться регулярно в соответствии с действующими лабораторными протоколами. ИКСИ будет использоваться для оплодотворения зрелых яйцеклеток.