胃の前がん状態を逆転させるためのピルビニウムの使用

目的:

この研究の主な目的は、胃腸化生および/または異形成を患うヒト参加者における、完全な腸上皮化生または正常な胃粘膜への復帰のためのピルビニウムの使用の有効性と安全性に関する追加のデータを取得することです。 第二の目的は、化生および/または異形成患者由来のヒト前癌性胃腺におけるピルビニウム治療の有効性を評価し、不均一な前癌性細胞におけるピルビニウム治療の標的効果を決定し、抗癌としてのピルビニウム作用の機能メカニズムを定義することである。 GC リスク予測に関連する血清バイオマーカーのレベルに対するピルビニウムの効果を決定し、ピルビニウムの影響を調査する胃のマイクロバイオーム。

研究デザイン:

これは第 2 相ランダム化臨床試験で、広範な/顕著な腸上皮化生 (IM) および/または異形成を患う 50 人の参加者を募集することを目的としています。 登録後、適切なサンプリングを確保するために、修正されたケンブリッジ プロトコルを使用してベースラインの食道胃十二指腸鏡検査 (OGD) が実行されます。 ほとんどの参加者はベースラインで組織型を確認する前に募集されるため、ベースラインでIMがない、広範な/顕著なIMがない、または異形成がないことが検出された場合、一部の参加者は研究から撤退します。 広範な/顕著な胃IMおよび/または異形成の証拠がある50人の参加者に、ピルビニウム(2mg/kg/日)またはプラセボを1:1のランダム化比で14日間毎日経口投与する。 参加者は治療14日目に症状をモニタリングするためにクリニックまたは電話で追跡調査を受ける。 参加者は盲検のままで、研究チームは盲検チームと非盲検チームに分けられます。 治験のアクティブ段階では、盲検化されていないチームのみが曝露（ピルビニウム対プラセボ）にアクセスできます。 無作為化後、治療最終日から最長 1 年間、合計 3 回の追跡調査がクリニックに来院されます。

ベースライン:

参加者は、IM と異形成の状態を確認するためにベースライン OGD と生検を受けます。 胃粘膜生検は次のように収集されます。

• AL、AG、IA、BL、BG、PP からそれぞれ 1 つの生検を組織学的検査に送る
• BL で 3 つの隣接する生検、IA で 1 つの生検、AL で 5 つの隣接する生検、AG で 1 つの隣接する生検、PP で 2 つの隣接する生検は、液体窒素で瞬間凍結されます。

場所は次のように定義されます。

• AL - 幽門から 2 ～ 3cm 以内の幽門洞の小弯曲
• AG - 幽門から 2 ～ 3cm 以内の幽門洞のより大きな曲率
• IA - 角切歯
• BL - 体部の小曲率、角の近位 4cm
• BG - 噴門から 8cm の体部大弯の中央部分
• PP - プレピロルス

機会があれば胃液を採取し、胃内pHを測定します。 既知の胃IM領域の4つの生検を使用して、胃オルガノイドを生成します。 広範な/顕著な胃IMおよび/または異形成の証拠のある参加者は、ピルビニウムまたはプラセボ治療群のいずれかに無作為に割り当てられます。 併存疾患、薬物使用、ヘリコバクター・ピロリの検査と治療歴、家族歴、タバコとアルコールへの曝露、内視鏡データ、病理学/組織学の結果を含む臨床データが登録時に収集されます。

最初の IM 病変領域は EGGIM II を標的とすることによって位置特定され、これは広範な IM とよく相関します。 HD-WLEに続いてHD-NBIで胃粘膜を観察します。 OGD 手順は検証目的で記録されます。 OGD 中に特定されたすべての粘膜病変は、通常の臨床診療の一環として個別に生検され、組織病理学的評価に送られます。 凍結生検サンプルは高品質の組織バンクに保管されます。 調査員は上記のプロトコルに従います。 ただし、患者の利益のために必要な場合は、プロトコルから逸脱する場合があります。

組織学的評価:

組織学的評価のために、生検は H&E および PAS/アルシアン ブルーで染色されます。 さらに、正常な胃系列、化生（SPEM および IM）、および異形成のマーカーに対して免疫染色が実行されます。 生検におけるマーカー発現は、デジタル画像化および定量化によって評価されます。

食事頻度アンケート (FFQ):

参加者は、便サンプル採取から 4 週間以内のベースライン訪問時に 1 回 FFQ を完了するよう求められます。

フォローアップ：

ピルビニウム群とプラセボ群の両方に同じ追跡手順が行われます。 粘膜生検は、各追跡調査 OGD で次のように収集されます。

• AL、AG、IA、BL、BG、PP からそれぞれ 1 つの生検を組織学的検査に送る
• BL の 2 つの隣接する生検、AL の 4 つの隣接する生検、および PP の 2 つの隣接する生検は、液体窒素で瞬間凍結されます。

追跡内視鏡検査のたびに、最大 14 件の研究用生検が採取されます。 EGGIMスコアが記録されます。 HD-WLEに続いてHD-NBIで胃粘膜を観察します。 OGD 手順は検証目的で記録されます。 OGD 中に特定されたすべての粘膜病変は、通常の臨床診療の一環として個別に生検され、組織病理学的評価に送られます。 凍結生検サンプルは高品質の組織バンクに保管されます。 調査員は上記のプロトコルに従います。 ただし、患者の利益のために必要な場合は、プロトコルから逸脱する場合があります。

追跡調査OGDは、治療の7日目、治療の6週間後、および治療の1年後に行われます。 治療 7 日目の監視 OGD については± 2 日、治療後 6 週間および 1 年後の監視 OGD については± 2 週間のウィンドウ期間が許容されます。

症状は、治療の最終日 (14 日目) に診療所または電話によるフォローアップによって監視されます。 既知のまれな副作用には、皮膚の発疹、日光過敏症、下痢、吐き気/嘔吐、胃けいれんが含まれており、これらおよびその他の症状はすべての被験者で監視されます。

血液の採取、処理、分析:

以下の各時点で各参加者から最大 20 ml の血液が採取されます: ベースライン、治療 7 日目、治療後 6 週間、治療後 1 年。 血清、血漿、バフィーコートが抽出されます。

胃液、唾液、便の採取:

胃液を採取し、各研究内視鏡検査で胃のpHを測定します。つまり、ベースライン、治療7日目、治療6週間後、および治療1年後です。 唾液と便は、ベースライン、治療後 6 週間、および治療後 1 年の時点で、マイクロバイオーム研究のための研究内視鏡検査の参加者から採取されます。

ヒト前がんオルガノイド:

研究者らは、異種前がん細胞におけるピルビニウム治療の標的効果を決定し、抗がん剤としてのピルビニウム作用の機能機構を明らかにすることを目的として、第2相臨床試験に募集された患者由来のヒトオルガノイドを使用して生物学的研究を実施する予定である。

血清バイオマーカープロファイリング:

血清からのトータル RNA が単離され、cDNA に変換され、定量されます。 技術的変動と生物学的変動の両方を正規化した後の標的 miRNA 発現レベルを分析して、健康状態と疾患状態の間で最も高い識別力を持つ miRNA のパネルを特定します。

微生物叢の分析:

組織、胃液、唾液および便は、次世代メタゲノム配列決定および指向性カルチュロミクスを受けて、IMの進行/退行における微生物と宿主の相互作用を研究します。

単一細胞分析:

組織は冷組織保存溶液に入れられ、酵素消化を使用して単一細胞に解離され、細胞生存率を決定するためにトリパンブルー染色が実行されます。 解離した細胞は、scRNA-seq、scDNA-seq、scATAC-seq、単細胞免疫プロファイリング、およびその他の単細胞関連技術（詳細な統合計算データ解析を伴う）などのさまざまな単細胞プラットフォームに使用され、それぞれの生物学的測定値。 これに加えて、組織はいくつかのゲノムプラットフォームにも使用される可能性があります（例: エクソームシーケンスやローパスシーケンスなど）と免疫組織学的プラットフォーム。

サンプルサイズの計算:

治療群（ピルビニウム）と対照群（プラセボ）の間で胃腸化生の減少（主要評価項目）を達成する参加者の割合の30％の差を検出するには、48人の参加者（各グループ24人）のサンプルサイズが必要です。片側タイプ I 過誤率 20% で検出力 80%、参加者の胃腸化生がほぼ 0% 減少すると仮定し、20%潜在的なドロップアウト率。 この研究デザインは第 II 相スクリーニング試験デザインと呼ばれ、治療が本当に有効であることを 80% の確率で検出できます。研究の結果が治療に有利であれば、第 III 相試験でさらに調査する価値があります。 募集目標は48名から50名に切り上げられました。

統計分析:

(A) 一般的な考慮事項

研究者らは、コントロールのプラセボと比較して、ピルビニウム（2mg/kg/日を14日間経口投与）は、胃IMの絶対的な50%の減少をもたらすと仮説を立てており、それにより、我々の進行胃IM患者の平均は75.6% +/- 8.4%( SD) 平均 14% +/- 8.2%(SD) の IM 存在を持つ軽度の胃 IM 患者と比較した生検中の IM の存在胃生検で。

連続変数は、平均、中央値、Q1 と Q3、最小値と最大値、標準偏差などの記述統計を使用して要約されます。 カテゴリ変数は、パーセンテージと度数を使用して要約されます。 すべての信頼区間は 95% です。

(B) 薬効解析

すべての有効性分析は、治療意図のある集団に基づいて実行されます。 胃腸化生（および/または完全な腸上皮化生または正常な胃粘膜への回復のための異形成）が減少した患者の割合の主要評価項目は、治療群とプラセボ群について個別に計算されます。 パーセンテージの差は、95% の正確な信頼区間とともに表示されます。 研究の探索的性質を考慮して、p 値は報告されません。 二値の結果を伴う二次エンドポイントは、一次エンドポイントと同様に分析されます。 二次連続エンドポイントは、追跡時点でのベースラインからの平均変化として提示されます。 グループ間の平均値の差は、95% 信頼区間とともに各追跡時点で表示されます。

(C) 安全性分析

すべての安全性分析は、治療を受けた集団に基づいて提示されます。 有害事象および重篤な有害事象は、各タイプの有害事象および重篤な有害事象を経験した被験者の数とともに、グループとの関係および重症度とともにカウントとパーセンテージを使用して表示されます。 検査結果は、各グループの異常な結果と臨床的に重要な結果の割合とともに、各評価時点での平均値とともに表示されます。

(D) 中間分析

正式な中間分析は計画されていない。 ただし、主任研究者は定期的に安全性データを盲検法で監視します。 NUH内視鏡センター所長、NUH消化器・肝臓科部長、NUH消化器・肝臓科安全責任者で構成される委員会により、安全性データが定期的に監視されることになる。