Utilisation du pyrvinium pour inverser les affections précancéreuses de l'estomac

Objectifs :

Les principaux objectifs de l'étude sont d'obtenir des données supplémentaires sur l'efficacité et l'innocuité de l'utilisation du pyrvinium chez les participants humains atteints de métaplasie et/ou de dysplasie intestinale gastrique pour le retour à une métaplasie intestinale complète ou à une muqueuse gastrique normale. Les objectifs secondaires sont d'évaluer l'efficacité du traitement au pyrvinium dans les gastroides précancéreux humains dérivés de patients atteints de métaplasie et/ou de dysplasie, de déterminer les effets ciblés du traitement au pyrvinium dans les cellules précancéreuses hétérogènes, de définir les mécanismes fonctionnels de l'action du pyrvinium comme anticancéreux. médicament, déterminer les effets du pyrvinium sur le niveau de biomarqueurs sériques associés à la prédiction du risque de GC et étudier l'impact du pyrvinium sur le microbiome gastrique.

Conception de l'étude :

Il s'agit d'un essai clinique randomisé de phase 2 qui vise à recruter 50 participants atteints de métaplasie intestinale (IM) et/ou de dysplasie étendue/marquée. Après l'inscription, une œsophagogastroduodénoscopie (OGD) de base est réalisée en utilisant un protocole de Cambridge modifié pour garantir un échantillonnage adéquat. Comme la plupart des participants seront recrutés avant de confirmer leur histologie au départ, certains participants seront retirés de l'étude s'il est détecté qu'ils n'ont pas de MI, pas de MI étendue/marquée ou pas de dysplasie au départ. 50 participants présentant des signes de MI gastrique étendue/marquée et/ou de dysplasie recevront quotidiennement du pyrvinium (2 mg/kg/jour) ou un placebo par voie orale dans un rapport de randomisation de 1 : 1 pendant une période de 14 jours. Les participants seront suivis à la clinique ou par téléphone pour la surveillance des symptômes au jour 14 du traitement. Les participants resteront aveuglés et l'équipe d'étude sera divisée en équipes aveugles et non aveugles. Seule l'équipe ouverte aura accès à l'exposition (pyrvinium vs placebo) pendant la phase active de l'essai. Au total, il y aura 3 visites d'étude de suivi à la clinique après randomisation, jusqu'à un an après le dernier jour de traitement.

Base de référence :

Les participants subiront un autre examen de base et une biopsie pour vérifier l'état de la MI et de la dysplasie. Les biopsies de la muqueuse gastrique seront collectées comme suit :

• 1 biopsie de chacun de AL, AG, IA, BL, BG, PP et envoyée pour examen histologique
• 3 biopsies adjacentes à BL, 1 biopsie à IA, 5 biopsies adjacentes à AL, 1 biopsie à AG et 2 biopsies adjacentes à PP, seront congelées instantanément dans de l'azote liquide

Les emplacements sont définis comme suit :

• AL - petite courbure de l'antre, à moins de 2-3 cm du pylore
• AG - plus grande courbure de l'antre, à moins de 2-3 cm du pylore
• IA - incisure angulaire
• BL - petite courbure du corps, 4 cm à proximité de l'angle
• BG - partie médiane de la grande courbure du corps, à 8 cm du cardia
• PP - prépylore

Le suc gastrique sera prélevé si possible et le pH gastrique sera mesuré. 4 biopsies de zones de MI gastrique connues seront utilisées pour générer des organoïdes gastriques. Les participants présentant des signes de MI gastrique étendue/marquée et/ou de dysplasie seront ensuite randomisés dans le bras de traitement au pyrvinium ou au placebo. Données cliniques, y compris les comorbidités, l'utilisation de médicaments, les tests et antécédents de traitement de H. pylori, les antécédents familiaux, les expositions au tabac et à l'alcool, les données endoscopiques et les résultats de pathologie/histologie seront collectés au moment de l'inscription.

La zone de lésion IM initiale est localisée en ciblant EGGIM II, ce qui correspond bien à une IM étendue. La muqueuse gastrique est observée avec HD-WLE suivi de HD-NBI. La procédure OGD sera enregistrée à des fins de vérification. Toutes les lésions muqueuses identifiées au cours d'autres ministères seront biopsiées séparément dans le cadre de la pratique clinique normale et envoyées pour évaluation histopathologique. Les échantillons de biopsie congelés seront conservés dans une banque de tissus de haute qualité. Les enquêteurs suivront le protocole ci-dessus. Ils peuvent toutefois s’écarter du protocole si l’intérêt du patient l’exige.

Évaluation histologique :

Pour l'évaluation histologique, les biopsies seront colorées pour H&E ainsi que pour le bleu PAS/Alcian. De plus, une immunocoloration sera réalisée pour les marqueurs des lignées gastriques normales, de la métaplasie (SPEM et IM) et de la dysplasie. L'expression des marqueurs dans les biopsies sera évaluée par imagerie numérique et quantification.

Questionnaire sur la fréquence des aliments (FFQ) :

Les participants seront invités à remplir un FFQ une fois lors de la visite de référence, dans les 4 semaines suivant le prélèvement d'échantillons de selles.

Suivi:

Les groupes pyrvinium et placebo subiront les mêmes procédures de suivi. Des biopsies muqueuses seront collectées dans chacun des autres ministères de surveillance de suivi comme suit :

• 1 biopsie de chacun de AL, AG, IA, BL, BG, PP et envoyée pour examen histologique
• 2 biopsies adjacentes à BL, 4 biopsies adjacentes à AL et 2 biopsies adjacentes à PP seront congelées dans de l'azote liquide

Un maximum de 14 biopsies de recherche seront effectuées à chacune des endoscopies de suivi. Le score EGGIM sera enregistré. La muqueuse gastrique est observée avec HD-WLE suivi de HD-NBI. La procédure OGD sera enregistrée à des fins de vérification. Toutes les lésions muqueuses identifiées au cours d'autres ministères seront biopsiées séparément dans le cadre de la pratique clinique normale et envoyées pour évaluation histopathologique. Les échantillons de biopsie congelés seront conservés dans une banque de tissus de haute qualité. Les enquêteurs suivront le protocole ci-dessus. Ils peuvent toutefois s’écarter du protocole si l’intérêt du patient l’exige.

Les autres ministères de surveillance de suivi seront effectués au jour 7 du traitement, 6 semaines après le traitement et 1 an après le traitement. Une période fenêtre de ± 2 jours pour les autres mois de surveillance au jour 7 du traitement et de ± 2 semaines pour les autres mois de surveillance à 6 semaines et 1 an après le traitement sont acceptables.

Les symptômes seront surveillés via un suivi clinique ou téléphonique le dernier jour du traitement (jour 14). Les effets secondaires rares connus comprennent les éruptions cutanées, la sensibilité au soleil, la diarrhée, les nausées/vomissements, les crampes d'estomac et ces symptômes ainsi que d'autres seront surveillés chez tous les sujets.

Collecte de sang, traitement et analyses :

Jusqu'à 20 ml de sang seront prélevés sur chaque participant à chacun des moments suivants : référence, jour 7 de traitement, 6 semaines après le traitement et 1 an après le traitement. Le sérum, le plasma et la couche leucocytaire seront extraits.

Collecte de sucs gastriques, de salive et de selles :

Le suc gastrique sera prélevé et le pH gastrique sera mesuré à chaque endoscopie de recherche, c'est-à-dire au départ, au jour 7 du traitement, 6 semaines après le traitement et 1 an après le traitement. La salive et les selles seront également obtenues auprès des participants à l'endoscopie de recherche pour les études sur le microbiome aux moments suivants : référence, 6 semaines après le traitement et 1 an après le traitement.

Organoïdes humains pré-cancer :

Les enquêteurs réaliseront des études biologiques en utilisant des organoïdes humains dérivés de patients recrutés pour l'essai clinique de phase 2, dans le but de déterminer les effets ciblés du traitement au pyrvinium dans des cellules précancéreuses hétérogènes et de définir les mécanismes fonctionnels de l'action du pyrvinium en tant que médicament anticancéreux.

Profilage des biomarqueurs sériques :

L'ARN total du sérum est isolé et converti en ADNc, qui est ensuite quantifié. Les niveaux d'expression cibles des miARN après normalisation des variations techniques et biologiques sont analysés pour identifier les panels de miARN présentant le pouvoir discriminant le plus élevé entre les états sains et pathologiques.

Analyses du microbiote :

Les tissus, le suc gastrique, la salive et les selles subiront un séquençage métagénomique de nouvelle génération et une culturomique dirigée, pour étudier les interactions microbe-hôte dans la progression/régression IM.

Analyse de cellule unique :

Les tissus seront placés dans une solution froide de stockage de tissus et dissociés en cellules individuelles par digestion enzymatique et une coloration au bleu trypan sera effectuée pour déterminer la viabilité cellulaire. Les cellules dissociées seront ensuite utilisées pour diverses plates-formes unicellulaires telles que scRNA-seq, scDNA-seq, scATAC-seq, le profilage immunitaire unicellulaire et d'autres technologies liées aux cellules uniques (accompagnées d'une analyse approfondie des données informatiques intégratives) pour déterminer les mesures biologiques respectives. En plus de cela, les tissus pourraient également être utilisés pour plusieurs plateformes génomiques (par ex. séquençage de l'exome et séquençage passe-bas, etc.) et plateformes immunohistologiques.

Calcul de la taille de l'échantillon :

Un échantillon de 48 participants (24 par groupe) sera nécessaire pour détecter une différence de 30 % dans la proportion de participants présentant une réduction de la métaplasie intestinale gastrique (critère principal) entre les groupes de traitement (Pyrvinium) et témoin (Placebo) pour atteindre Puissance de 80 % avec un taux d'erreur unilatéral de type I de 20 %, en supposant que près de 0 % des participants auront une réduction de la métaplasie intestinale gastrique et un taux d'abandon potentiel de 20 %. La conception de l'étude est appelée conception d'essai de dépistage de phase II, qui a 80 % de chances de détecter que le traitement est vraiment efficace et mérite d'être approfondi dans un essai de phase III si les résultats de l'étude sont favorables au traitement. L'objectif de recrutement a été arrondi de 48 à 50 participants.

Analyse statistique :

(A) Considérations générales

Les enquêteurs émettent l'hypothèse que le pyrvinium (par voie orale 2 mg/kg/jour pendant 14 jours) par rapport au placebo témoin entraînerait une réduction absolue de 50 % de la MI gastrique, nos patients atteints de MI gastrique avancée ayant une moyenne de 75,6 % +/- 8,4 % ( SD) présence de MI dans leurs biopsies par rapport aux patients atteints de MI gastrique légère avec une présence moyenne de 14 % +/- 8,2 % (SD) de MI dans leurs biopsies gastriques.

Les variables continues seront résumées à l'aide de statistiques descriptives comprenant les moyennes, les médianes, Q1 et Q3, minimum et maximum et écarts types. Les variables catégorielles seront résumées en utilisant des pourcentages et des fréquences. Tous les intervalles de confiance sont de 95 %.

(B) Analyses d'efficacité

Toutes les analyses d'efficacité seront effectuées sur la base de la population en intention de traiter. Le critère d'évaluation principal du pourcentage de patients présentant une réduction de la métaplasie intestinale gastrique (et/ou dysplasie pour retour à une métaplasie intestinale complète ou à une muqueuse gastrique normale) sera calculé séparément pour le groupe de traitement et le groupe placebo. La différence de pourcentage sera présentée avec un intervalle de confiance exact à 95 %. Aucune valeur p ne sera rapportée compte tenu de la nature exploratoire de l'étude. Les critères d'évaluation secondaires avec des résultats binaires seront analysés de la même manière que le critère d'évaluation principal. Les critères d'évaluation secondaires continus seront présentés comme un changement moyen par rapport à la ligne de base aux moments de suivi. La différence des valeurs moyennes entre les groupes sera présentée à chaque instant de suivi avec leurs intervalles de confiance à 95 %.

(C) Analyses de sécurité

Toutes les analyses de sécurité seront présentées en fonction de la population traitée. Les événements indésirables et graves seront présentés avec le nombre de sujets présentant chaque type d'événements indésirables et d'événements indésirables graves ainsi que leur relation avec le groupe et leur gravité en utilisant des chiffres et des pourcentages. Les résultats de laboratoire seront présentés avec leurs valeurs moyennes à chaque moment d'évaluation ainsi que le pourcentage de résultats anormaux et cliniquement significatifs pour chaque groupe.

(D) Analyses intermédiaires

Aucune analyse intermédiaire formelle n’est prévue. Cependant, le chercheur principal surveillera périodiquement les données de sécurité en aveugle. Il y aurait une surveillance périodique des données de sécurité par un comité comprenant le directeur du centre d'endoscopie du NUH, le chef du département de gastroentérologie et d'hépatologie du NUH et le responsable de la sécurité du département de gastroentérologie et d'hépatologie du NUH.