Brug af Pyrvinium til at vende forstadier til mave

Mål:

Hovedformålene med undersøgelsen er at opnå yderligere data om effektiviteten og sikkerheden ved brugen af ​​pyrvinium hos menneskelige deltagere med gastrisk intestinal metaplasi og/eller dysplasi for tilbagevenden til fuldstændig intestinal metaplasi eller normal gastrisk slimhinde. De sekundære mål er at evaluere effektiviteten af ​​pyrviniumbehandling i humane præcancerøse gastroider afledt af patienter med metaplasi og/eller dysplasi, bestemme målrettede effekter af pyrviniumbehandling i heterogene præcancerøse celler, definere funktionelle mekanismer for pyrviniums virkning som en anti-cancer lægemiddel, bestemme virkningerne af pyrvinium på niveauet af serumbiomarkører forbundet med forudsigelse af GC-risiko og undersøge pyrviniums indvirkning på det gastriske mikrobiom.

Studiedesign:

Dette er et fase 2 randomiseret klinisk forsøg, som har til formål at rekruttere 50 deltagere med omfattende/markeret intestinal metaplasi (IM) og/eller dysplasi. Efter tilmelding udføres en baseline-øsophagogastroduodenoskopi (OGD) ved hjælp af en modificeret Cambridge-protokol for at sikre tilstrækkelig prøveudtagning. Da de fleste deltagere vil blive rekrutteret før bekræftelse af deres histologi ved baseline, vil nogle deltagere blive trukket tilbage fra undersøgelsen, hvis de opdages at have ingen IM, ingen omfattende/markeret IM eller ingen dysplasi ved baseline. 50 deltagere med tegn på omfattende/markeret gastrisk IM og/eller dysplasi vil modtage pyrvinium (2mg/kg/dag) eller placebo oralt i et randomiseringsforhold på 1:1 dagligt i en periode på 14 dage. Deltagerne vil blive fulgt op på klinikken eller telefonisk for monitorering af symptomer på behandlingsdag 14. Deltagerne forbliver blindede, og studieholdet vil blive opdelt i blindede og ublindede hold. Kun det ublindede team vil have adgang til eksponering (pyrvinium vs placebo) i den aktive fase af forsøget. I alt vil der være 3 opfølgende studiebesøg på klinikken efter randomisering, i op til et år efter sidste behandlingsdag.

Baseline:

Deltagerne vil gennemgå en baseline OGD og biopsi for at fastslå IM og dysplasistatus. Maveslimhindebiopsier vil blive indsamlet som følger:

• 1 biopsi hver fra AL, AG, IA, BL, BG, PP og sendt til histologisk undersøgelse
• 3 tilstødende biopsier ved BL, 1 biopsi ved IA, 5 tilstødende biopsier ved AL, 1 biopsi ved AG og 2 tilstødende biopsier ved PP, skal lynfryses i flydende nitrogen

Stederne er defineret som følger:

• AL - mindre krumning af antrum, inden for 2-3 cm fra pylorus
• AG - større krumning af antrum, inden for 2-3 cm fra pylorus
• IA - incisura angularis
• BL - mindre krumning af corpus, 4 cm proksimalt til angulus
• BG - midterste del af den større krumning af corpus, 8 cm fra cardia
• PP - prepylorus

Der vil blive taget mavesaft, hvis der er mulighed for det, og mave-pH vil blive målt. 4 biopsier af områder med kendt gastrisk IM vil blive brugt til at generere gastriske organoider. Deltagere med tegn på omfattende/markeret gastrisk IM og/eller dysplasi vil derefter blive randomiseret til enten pyrvinium- eller placebobehandlingsarmen. Kliniske data, herunder komorbiditeter, medicinbrug, H. pylori-testning og behandlingshistorie, familiehistorie, tobaks- og alkoholeksponeringer, endoskopiske data og patologi/histologiske resultater vil blive indsamlet på tidspunktet for tilmelding.

Det indledende IM-læsionsområde er lokaliseret ved at målrette EGGIM II, som korrelerer godt med omfattende IM. Maveslimhinden observeres med HD-WLE efterfulgt af HD-NBI. OGD-proceduren vil blive registreret til verifikationsformål. Alle slimhindelæsioner identificeret under OGD vil blive biopsieret separat som en del af normal klinisk praksis og sendt til histopatologisk vurdering. Frosne biopsiprøver vil blive opbevaret i en vævsbank af høj kvalitet. Efterforskere vil følge ovenstående protokol. De kan dog fravige protokol, hvis patientens interesser kræver det.

Histologisk vurdering:

Til histologisk vurdering vil biopsier blive farvet for H&E samt PAS/Alcian blue. Derudover vil der blive udført immunfarvning for markører for normale gastriske linier, metaplasi (SPEM og IM) og dysplasi. Markørekspression i biopsier vil blive evalueret med digital billeddannelse og kvantificering.

Madhyppighedsspørgeskema (FFQ):

Deltagerne vil blive bedt om at udfylde en FFQ én gang ved baseline-besøget inden for 4 uger fra afføringsprøven.

Opfølgning:

Både pyrvinium- og placebogrupper vil gennemgå de samme opfølgningsprocedurer. Slimhindebiopsier vil blive indsamlet ved hver af de opfølgende overvågnings OGD'er som følger:

• 1 biopsi hver fra AL, AG, IA, BL, BG, PP og sendt til histologisk undersøgelse
• 2 tilstødende biopsier ved BL, 4 tilstødende biopsier ved AL og 2 tilstødende biopsier ved PP vil blive lynfrosset i flydende nitrogen

Der vil maksimalt blive taget 14 forskningsbiopsier ved hver af de opfølgende endoskopier. EGGIM-resultatet vil blive registreret. Maveslimhinden observeres med HD-WLE efterfulgt af HD-NBI. OGD-proceduren vil blive registreret til verifikationsformål. Alle slimhindelæsioner identificeret under OGD vil blive biopsieret separat som en del af normal klinisk praksis og sendt til histopatologisk vurdering. Frosne biopsiprøver vil blive opbevaret i en vævsbank af høj kvalitet. Efterforskere vil følge ovenstående protokol. De kan dog fravige protokol, hvis patientens interesser kræver det.

Opfølgende overvågning OGD'er vil blive udført på dag 7 af behandlingen, 6 uger efter behandling og 1 år efter behandling. En vinduesperiode på ± 2 dage for overvågnings-OGD på dag 7 af behandlingen og ± 2 uger for overvågnings-OGD 6 uger og 1 år efter behandling er acceptabel.

Symptomer vil blive monitoreret via klinik eller telefonopfølgning på den sidste dag af behandlingen (dag 14). Kendte sjældne bivirkninger omfatter hududslæt, solfølsomhed, diarré, kvalme/opkastning, mavekramper, og disse og andre symptomer vil blive overvåget hos alle forsøgspersoner.

Blodopsamling, behandling og analyser:

Op til 20 ml blod vil blive udtaget fra hver deltager på hvert af følgende tidspunkter: baseline, dag 7 af behandlingen, 6 uger efter behandling og 1 år efter behandling. Serum, plasma og buffy coat vil blive ekstraheret.

Indsamling af mavesaft, spyt og afføring:

Mavesaft vil blive taget, og mave-pH vil blive målt ved hver forskningsendoskopi, dvs. baseline, dag 7 af behandling, 6 uger efter behandling og 1 år efter behandling. Spyt og afføring vil også blive indhentet fra deltagere ved forskningsendoskopi til mikrobiomundersøgelser på følgende tidspunkter: baseline, 6 uger efter behandling og 1 år efter behandling.

Menneskelige præ-cancer organoider:

Efterforskerne vil udføre biologiske undersøgelser ved hjælp af humane organoider afledt af patienter rekrutteret til fase 2 kliniske forsøg med det formål at bestemme målrettede effekter af pyrviniumbehandling i heterogene præ-cancerceller og definere funktionelle mekanismer for pyrviniums virkning som et anti-cancer lægemiddel.

Serum biomarkør profilering:

Totalt RNA fra serum isoleres og omdannes til cDNA, som derefter kvantificeres. Mål miRNA-ekspressionsniveauer efter normalisering af både tekniske og biologiske variationer analyseres for at identificere paneler af miRNA'er med den højeste diskriminerende kraft mellem sunde og sygdomstilstande.

Mikrobiotaanalyser:

Væv, mavesaft, spyt og afføring vil gennemgå næste generations metagenomisk sekventering og rettet kulturomik for at studere mikrobe-værts interaktioner i IM progression/regression.

Enkeltcelleanalyse:

Væv vil blive anbragt i koldtvævsopløsning og dissocieret i enkeltceller ved hjælp af enzymatisk fordøjelse, og trypanblåt farvning vil blive udført for at bestemme cellelevedygtighed. Dissocierede celler vil derefter blive brugt til forskellige enkeltcelleplatforme såsom scRNA-seq, scDNA-seq, scATAC-seq, enkeltcelle-immunprofilering og andre enkeltcelle-relaterede teknologier (ledsaget af dybdegående integrativ beregningsdataanalyse) for at bestemme de respektive biologiske målinger. Ud over dette kan væv også bruges til flere genomiske platforme (f. exome-sekventering og lavpas-sekventering osv.) og immunhistologiske platforme.

Beregning af prøvestørrelse:

En prøvestørrelse på 48 deltagere (24 pr. gruppe) vil være påkrævet for at påvise en forskel på 30 % i andelen af ​​deltagere med en reduktion i gastrisk intestinal metaplasi (primært endepunkt) mellem behandlings- (Pyrvinium) og kontrol (Placebo) grupper for at opnå 80 % effekt ved 20 % ensidig type I fejlrate, forudsat at tæt på 0 % deltagere vil have nogen reduktion i gastrisk intestinal metaplasi, og 20 % potentiel frafaldsprocent. Undersøgelsesdesignet omtales som Phase II Screening Trial Design, som har 80 % chance for at opdage, at behandlingen er virkelig effektiv og værd at undersøge nærmere i et fase III-studie, hvis undersøgelsens resultater er gunstige for behandlingen. Rekrutteringsmålet er rundet op fra 48 til 50 deltagere.

Statistisk analyse:

(A) Generelle betragtninger

Efterforskerne antager, at pyrvinium (oral 2 mg/kg/dag i 14 dage) sammenlignet med kontrol placebo ville resultere i en absolut 50 % reduktion i gastrisk IM, hvorved vores fremskredne gastriske IM patienter har en gennemsnitlig 75,6 % +/- 8,4 %( SD) tilstedeværelse af IM i deres biopsier sammenlignet med milde gastriske IM-patienter med en gennemsnitlig 14 % +/- 8,2% (SD) tilstedeværelse af IM i deres gastriske biopsier.

Kontinuerlige variabler vil blive opsummeret ved hjælp af beskrivende statistik, herunder middelværdier, medianer, Q1 og Q3, minimum og maksimum og standardafvigelser. Kategoriske variabler vil blive opsummeret ved hjælp af procenter og frekvenser. Alle konfidensintervaller er 95 %.

(B) Effektivitetsanalyser

Al effektivitetsanalyse vil blive udført baseret på intention-to-treat-populationen. Det primære endepunkt for procentdelen af ​​patienter med en reduktion i gastrisk intestinal metaplasi (og/eller dysplasi for tilbagevenden til fuldstændig intestinal metaplasi eller normal gastrisk slimhinde) vil blive beregnet separat for behandlings- og placebogruppen. Forskellen i procentdelen vil blive præsenteret sammen med 95 % nøjagtigt konfidensinterval. Ingen p-værdier vil blive rapporteret i betragtning af undersøgelsens eksplorative karakter. Sekundære endepunkter med binære resultater vil blive analyseret svarende til det primære endepunkt. Sekundære kontinuerlige endepunkter vil blive præsenteret som gennemsnitlig ændring fra baseline ved opfølgningstidspunkterne. Forskellen i middelværdier mellem grupperne vil blive præsenteret på hvert opfølgningstidspunkt sammen med deres 95 % konfidensintervaller.

(C) Sikkerhedsanalyser

Alle sikkerhedsanalyser vil blive præsenteret baseret på den behandlede population. Uønskede og alvorlige uønskede hændelser vil blive præsenteret med antallet af forsøgspersoner, der oplever hver type uønskede hændelser og alvorlige hændelser sammen med deres forhold til gruppen og sværhedsgrad ved hjælp af tællinger og procenter. Laboratorieresultater vil blive præsenteret med deres middelværdier på hvert vurderingstidspunkt sammen med procentdelen af ​​unormale og klinisk signifikante resultater for hver gruppe.

(D) Midlertidige analyser

Der er ikke planlagt nogen formel foreløbig analyse. Principal Investigator vil dog periodisk overvåge sikkerhedsdataene på en blind måde. Der ville være periodisk overvågning af sikkerhedsdataene af en komité bestående af NUH Endoskopi Centers direktør, NUH Gastroenterology and Hepatology Afdelingschef og NUH Gastroenterology and Hepatology Department Safety Lead.