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神経変性障害の影響を受けた患者の早期診断、予後、治療管理のための新しいバイオマーカーとしての循環バイオフライドにおけるタンパク質構造複合体の発見と検証

2025年3月17日 更新者:Teresa Esposito、Neuromed IRCCS
パーキンソン病(PD)、アルツハイマー病(AD)、前頭側頭肺認知症(FTD)、筋萎縮性側索硬化症(ALS)などの神経変性障害(NDD)は、誤って肥大化したプロテインの凝集と細胞内蓄積によって特徴付けられます。シナプス機能障害とニューロンの死において重要な役割を果たす。 バイオ流体のタンパク質構造複合体は、タンパク質凝集を特徴とするNDDのバイオマーカーとしての使用を示唆する病理学的状態を反映するために提案されています。 このフレームワークでは、次の計画を立てています。i)標準化された臨床および遺伝学の手順を使用して、NDD患者と前駆者患者と健康な被験者の大規模なコホートを収集する。 ii)ゲノミクス、プロテオミクス、バイオインフォマティック分析に基づいた新しい方法を適用して、バイオ流体のタンパク質複合体をマッピングする。 iii)新規循環バイオマーカーを特定し、それらを遺伝的プロファイリングと疾患の内フェノ型と相関させます。 iv)ヒト脳組織およびドーパミン作動性培養の生物学的特性を検証します。

調査の概要

詳細な説明

このプロジェクトは、多語の観察研究です。 関係する機関は次のとおりです。

OU1 -IRCCS INM NEUROMED OU2 -UNIVISSITY OF PIEMONTE ORIENTALEプロジェクトは、IRCCS Neuromedで募集された、既に臨床情報、遺伝子データを収集して保存したIRCCS Neuromedで募集された、おなじみの散発的な症例からのPDサンプルの大規模なコレクションの利用可能性から活用されます。研究コホート全体のDNA、血清、血漿、末梢血単核細胞(PBMC)として。 誘導された多能性幹細胞(IPSC)は、6人のPD患者と5人の健康な被験者に利用可能です。

オペレーティングユニット(OU1)の活動は次のとおりです。

  1. 遺伝学および臨床記録に基づくNDD患者の層別化。
  2. NDD患者のCSFサンプルの募集。
  3. NDD親relativeの選択されたコホートの募集、WESおよびバイオインフォマティック分析(200サンプル);
  4. タンパク質の構造変化、候補遺伝子、遺伝子プロファイル、および調節パタル(OU1/ OU2)を特定するためのバイオインフォマティック分析。
  5. 循環複合体とPDエンドフェノ型との相関は、疾患バイオマーカーを特定します(OU1/ OU2)。
  6. PD(OU1/ OU2)の初期バイオマーカーを特定するためのRBD患者およびPD親relativeの検証。
  7. ヒト脳のスライスにおけるタンパク質複合体の検証と、iPSC由来のMDDAニューロン(OU1/ OU2)の最も関連性の高いCSFおよび形質型複合体の生物学的活性の分析。

オペレーティングユニット(OU2)の活動は次のとおりです。

  1. NDDS患者のCSFおよび血漿サンプル収集と貯蔵。
  2. 遺伝学と臨床記録に基づく患者の層別化(OU1との共同);
  3. CSFサンプル(100サンプル)のタンパク質複合体の変化を検出します。
  4. PD(100サンプル)のCSFバイオマーカーの識別と検証(OU1との共同);
  5. 血漿サンプル(450サンプル)の免疫化学的または標的分析を使用して、複雑なバイオマーカーを検証します。
  6. 潜在的な薬物標的錯体を特定します(OU1との共同)。
  7. CSF/血漿に構造的な変化を伴うタンパク質が脳にもそれらの変化があるかどうかを評価します。
  8. タンパク質の構造情報を遺伝学および臨床データと相関させます(OU1と協力して)。

研究の種類

観察的

入学 (推定)

110

連絡先と場所

このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。

研究連絡先

研究場所

参加基準

研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。

適格基準

就学可能な年齢

  • 大人
  • 高齢者

健康ボランティアの受け入れ

はい

サンプリング方法

確率サンプル

調査対象母集団

この研究は、510人の被験者の総人口(140 PD、150 AD/ALS/FTD、120のコントロール、変異を患っている患者の100人の親relative)で実施されます。 、30のADケース、20 ALS/FTDケース)がこの研究で募集されます。 この研究には、非炎症性および非神経変性疾患の診断レジメンでCSFサンプリングを受ける人々の間で選択された20人の対照個人の募集と分析も含まれています。 検証コホートは、研究に関与する臨床センターで部分的に既に入手可能であり、そのうち400人の被験者で構成されています:100人のPD患者(UO1)、100人のAD/FTD/ALS患者(UO2)、100人の健康な家族のNDD患者の健康な家族メンバー病原性変異と、まだ疾患を発症していない人(UO1)および100人のコントロール個体(UO1)。

説明

  • 包含基準:
  • PD患者の包含基準。

IRCCS INM Neuromedの場合、患者は、ポッツィリの神経診断研究所のパーキンソン病研究センターと提携した患者から募集されます。 影響を受けた被験者は、1999年にGelbらによって提案された基準に従って選択されます。 これは、4つの基本的な兆候の存在、レボドパのテスト投与に対する反応、および非定型兆候の欠如に基づく非常に実用的なスキームです。

a)4つの基本的な兆候のうち少なくとも2つの存在(振戦、剛性、ブラディキネシア、非対称の開始)の1つは、振戦またはブラディキネシアでなければなりません。 b):i)早期の姿勢不安定性、凍結現象、認知劣化、幻覚、病理学的不随意運動、垂直視線麻痺。 ii)二次パーキンソニズムの実証済みの原因(局所病変、薬物、毒性物質); c)L-DOPAまたはダパミンアゴニストの使用に対する文書化された反応(または、L-DOPAまたはドーパミンアゴニストによる適切な治療試みの欠如)。

  • インクルージョン基準FORAD患者。 患者は、認知障害および認知症センター(CDCD)SCDU神経学、Aou Maggiore DellaCarità、Novaraで選ばれます。 AD患者は、McKhann基準(2011)に従ってアルツハイマー病の可能性の診断後に含まれ、アミロイド障害の陽性バイオマーカー(アミロイドトレーサーまたはアミロイド脳脊髄液剤剤を含むPET)によってサポートされます。
  • FTD/ALS患者の包含基準。 UPOのために、患者は第三紀中心筋萎縮性側索硬化症 - SCDU神経学、aou maggiore dellacarità、novaraで選択されます。 筋萎縮性側索硬化症の患者は、EL ESCORIAL基準-Revised(2015)に従って診断後に含まれます。この点で、実験室でサポートされている明確または可能性のある診断を受けた患者のみが含まれます。 FTD患者の場合、Rascovsky基準(2011)に従って診断を受けて、上記の両方のセンターで選択されます。 このグループでは、診断は、アミロイド障害の陰性バイオマーカー(アミロイドトレーサーまたはアミロイド脳脊髄液量のPET)によってサポートされます。 付随するALSおよびFTDの患者の場合、強力な基準(2017)に関連するEL ESCORIAL基準(2015)が使用されます。

除外基準:

  • PD患者

    • 既存の精神病理学;
    • 多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、神経筋疾患、てんかんなどの神経変性神経疾患;
    • 認知症の診断;
  • AD/FTD/ALS患者

    • 既存の精神病理学;
    • 他の神経変性神経疾患の以前の診断;
    • インフォームドコンセントに署名できない患者。
  • コントロール

    • 既存の精神病理学;
    • パーキンソン病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、神経筋疾患、てんかんなどの神経変性神経疾患;
    • 認知症の診断;
    • うつ;
    • 抗不安、抗うつ薬、抗精神病薬、睡眠誘導、認知刺激薬の長期摂取。

研究計画

このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。

研究はどのように設計されていますか?

デザインの詳細

この研究は何を測定していますか?

主要な結果の測定

結果測定
メジャーの説明
時間枠
PD患者の運動症状は、HoehnとYahr(HY)スコアで評価されます
時間枠:2年
HoehnとYahrのスケールは、パーキンソン病の症状がどのように進行し、障害のレベルを測定するために使用されます。 ステージ1〜5:ステージ1。片側性の関与のみが、通常は機能障害が最小限またはまったくありません。ステージ2 =バランス障害のない二国間疾患。ステージ3 =軽度から中程度の二国間疾患。ある程度の姿勢不安定。物理的に独立しています。 ステージ4 =重度の障害。まだ歩いたり、アシストされていないことができます。 ステージ5 =支援を受けない限り、車椅子または寝たきり。
2年
PD患者の運動症状と非運動症状は、MDS-Updrsで評価されます
時間枠:2年
MDS-Updrsには4つの部分があります。つまり、i:日常生活の非運動体験。 II:ダイリライブの運動経験。 III:運動検査; IV:運動合併症。 患者/介護者によって20の質問が完了しました
2年
PD、AD、ALS/FTD患者の認知障害の臨床評価
時間枠:2年

PD患者は、モントリオール認知評価(MOCA)テストで評価されます。 これは、医療提供者が記憶喪失または認知機能低下の他の症状を持つ人々を評価するために使用するテストです。 MOCAには30の質問が含まれており、さまざまな種類の認知能力または思考能力をチェックします。 これらには、オリエンテーション、短期メモリ/遅延リコール、実行機能/視覚空間能力、時計描画テスト。 言語障害の評価。

ALS/FTD-認知障害の評価(および強力な基準、2017年に従って分類)。 - 言語障害の評価。

AD患者: - 認知障害の評価(MMSE、MOCAテスト、時計検査);

- 言語障害の評価。

2年
ALS/FTD患者の臨床評価
時間枠:2年
El Escorialによる臨床分類 - 改訂
2年
バリアント/変異の識別
時間枠:2年

PD患者:複数のレアの数(マイナーアレル頻度、MAF <0.01) PD遺伝子の有害な(ミスセンス、非感覚、フレームシフト、スプライシング)バリアントは、PD患者および無関係な健康な被験者でカウントされます。 症例対照攻撃研究は、PDリスクを評価します。

AD、ALS/FTD:責任ある遺伝子の有害なバリアント(ミスセンス、非感覚、フレームシフト、スプライシング)が考慮されます。

2年
CSFのタンパク質複合体の同定
時間枠:2年
PD/AD/FTD/ALS患者のCSFに存在するタンパク質複合体および研究に参加した2つの臨床センターで募集された対照被験者は、サイズ除外クロマトグラフィー(SEC)およびラベルフリープロテオミクス分析によって分析されます。 複合体は分離され、SECで分別され、質量分析計によって識別および定量化されます。 統計分析により、コントロールと比較して、患者のタンパク質複合体の有無、したがって、バイオマーカーと潜在的な治療標的の同定を特定することができます。
2年
関与するタンパク質と分子経路の同定のためのバイオインフォマティック分析
時間枠:2年
高度なバイオインフォマティクス分析、多変量統計分析技術と機械学習、さまざまな神経変性疾患に関与するタンパク質と分子経路とその発達が特定されます。 これにより、これらの病理の知識を理解して改善し、潜在的な治療または診断の標的/経路を特定することができます。
2年
血漿中のタンパク質複合体の検証
時間枠:2年
フェーズ1で特定された主要なマーカータンパク質複合体は、PD/AD/FTD/ALS患者の血漿サンプルで検証され、標的質量分析分析を介して、ELISA、ウエスタンブロット、免疫測定などの免疫化学的技術分析を通じて被験者を対照します。
2年
エンドフェノタイプとの関連分析
時間枠:2年
相関分析は、凝集体の存在が発症年齢(AAO)、神経学的症状、非運動症状、およびL-DOPA治療に対する反応に影響するかどうかを評価することを目的としています。 さらに、PD患者の遺伝データは生体分子データと統合され、変化した分子経路を特定します。 ROC曲線は、テストの診断力を評価するために使用されます。
2年
CSFで同定されたタンパク質複合体の生物学的影響の分析患者およびコントロールのiPSCから得られたMDDAドーパミン作動性ニューロンの生存率に及ぼす分析
時間枠:2年
患者とコントロールのiPSC系統は、公開されたプロトコルを使用してメソジエンス性ドーパミン作動性ニューロンに区別されます。 細胞は患者CSFから精製されたタンパク質凝集体にさらされ、神経変性に対する細胞の脆弱性が評価されます。
2年

協力者と研究者

ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。

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捜査官

  • 主任研究者:TERESA ESPOSITO, PhD、IRCCS INM Neuromed

研究記録日

これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。

主要日程の研究

研究開始 (実際)

2025年2月4日

一次修了 (推定)

2026年8月31日

研究の完了 (推定)

2026年12月1日

試験登録日

最初に提出

2025年1月27日

QC基準を満たした最初の提出物

2025年1月27日

最初の投稿 (実際)

2025年3月25日

学習記録の更新

投稿された最後の更新 (実際)

2025年3月25日

QC基準を満たした最後の更新が送信されました

2025年3月17日

最終確認日

2025年3月1日

詳しくは

本研究に関する用語

個々の参加者データ (IPD) の計画

個々の参加者データ (IPD) を共有する予定はありますか?

いいえ

医薬品およびデバイス情報、研究文書

米国FDA規制医薬品の研究

いいえ

米国FDA規制機器製品の研究

いいえ

米国で製造され、米国から輸出された製品。

いいえ

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