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Découverte et validation des complexes structurels protéiques dans les biofluides circulants comme de nouveaux biomarqueurs pour le diagnostic précoce, le pronostic et la gestion thérapeutique des patients affectés par les troubles neurodégénératifs

17 mars 2025 mis à jour par: Teresa Esposito, Neuromed IRCCS

Les troubles neurodégénératifs (NDDS), tels que la maladie de Parkinson (PD), la maladie d'Alzheimer (AD), la démence frontotemporale (FTD) et la sclérose latérale amyotrophique (ALS) sont caractérisées par l'agrégation et l'accumulation intracellulaire de protéines malpliées, qui sont crues pour jouer un rôle clé dans le dysfonctionnement synaptique et la mort neuronale. Des complexes structurels protéiques dans les biofluides ont été proposés pour refléter des conditions pathologiques suggérant leur utilisation comme biomarqueurs pour les NDD caractérisés par l'agrégation des protéines. Dans ce cadre, nous prévoyons: i) collecter une grande cohorte de patients NDD et prodromiques et de sujets sains en utilisant des procédures cliniques et génétiques standardisées; ii) Appliquer une nouvelle méthode basée sur la génomique, la protéomique et l'analyse bioinformatique pour cartographier les complexes protéiques dans les biofluides; iii) identifier de nouveaux biomarqueurs circulants et les corréler au profilage génétique et aux endophénotypes de la maladie, et; iv) Valider les propriétés biologiques dans les tissus cérébraux humains et les cultures dopaminergiques.

Aperçu de l'étude

Statut

Recrutement

Les conditions

Intervention / Traitement

Description détaillée

Le projet est une étude d'observation multicrententrique. Les institutions impliquées sont:

OU1 - IRCCS INM NeuromEd OU2 - Université de Piemonte Orientale Le projet tire parti de la disponibilité d'une grande collection d'échantillons de MP à partir de cas familiers et sporadiques, recrutés chez IRCCS NeuromEd, pour lesquels nous avons déjà collecté et stocké des informations cliniques, des données génétiques également également comme ADN, sérum, plasma et cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) pour l'ensemble de la cohorte de l'étude. Les cellules souches pluripotentes induites (IPSC) sont disponibles pour 6 patients PD et 5 sujets sains.

Les activités de l'unité d'exploitation (OU1) sont:

Stratification des patients NDD basée sur la génétique et les dossiers cliniques;
Recrutement d'échantillon de LCR de patients NDD;
Recrutement, WES et analyse bioinformatique d'une cohorte sélectionnée de parents NDD (200 échantillons);
Analyse bioinformatique pour identifier les altérations structurelles des protéines, les gènes candidats, les profils génétiques et les voies de déréglemente (OU1 / OU2);
Corrélation du complexe circulant avec les endophénotypes PD pour identifier les biomarqueurs de la maladie (OU1 / OU2);
Validation chez les patients RBD et les parents PD pour identifier les biomarqueurs précoces pour la MP (OU1 / OU2);
Validation des complexes protéiques dans les tranches de cerveau humain et analyse de l'activité biologique des complexes CSF et plasmatiques les plus pertinents dans les neurones MDDA dérivés d'IPSC (OU1 / OU2).

Les activités de l'unité d'exploitation (OU2) sont:

CSF et collection d'échantillons de plasma et stockage pour les patients atteints de NDDS;
Stratification des patients basée sur la génétique et les dossiers cliniques (en collaboration avec OU1);
Détecter des altérations des complexes protéiques dans les échantillons de LCR (100 échantillons);
Identification et validation des biomarqueurs du LCR pour PD (100 échantillons) (en collaboration avec OU1);
Valider les biomarqueurs complexes en utilisant une analyse immunochimique ou ciblée sur des échantillons de plasma (450 échantillons);
Identifier les complexes potentiels de médicaments (en collaboration avec OU1);
Évaluez si les protéines ayant des changements structurels dans le LCR / plasma ont également ces changements dans le cerveau;
Corréler les informations structurelles des protéines avec la génétique et les données cliniques (en collaboration avec OU1).

Type d'étude

Observationnel

Inscription (Estimé)

110

Contacts et emplacements

Cette section fournit les coordonnées de ceux qui mènent l'étude et des informations sur le lieu où cette étude est menée.

Coordonnées de l'étude

Nom: Teresa Esposito, PhD
Numéro de téléphone: +39 0865915249
E-mail: teresa.esposito@igb.cnr.it

Lieux d'étude

Italie
- - Pozzilli, Italie, 86077
    - Recrutement
    - IRCCS INM Neuromed
    - Contact:
      
      Teresa Esposito, PhD
      
      Numéro de téléphone: +30 0865915249
      
      E-mail: teresa.esposito@igb.cnr.it

Critères de participation

Les chercheurs recherchent des personnes qui correspondent à une certaine description, appelée critères d'éligibilité. Certains exemples de ces critères sont l'état de santé général d'une personne ou des traitements antérieurs.

Critère d'éligibilité

Âges éligibles pour étudier

Adulte
Adulte plus âgé

Accepte les volontaires sains

Oui

Méthode d'échantillonnage

Échantillon de probabilité

Population étudiée

L'étude sera réalisée sur une population totale de 510 sujets (140 PD, 150 AD / ALS / FTD, 120 témoins, 100 parents de patients portant des mutations), dont 90 patients avec un diagnostic clinique de maladie neurodégénérative (40 cas de PD , 30 cas de publicité, 20 cas de SLA / FTD) seront recrutés dans cette étude. L'étude comprend également le recrutement et l'analyse de 20 personnes témoins sélectionnées parmi ceux qui subiront un échantillonnage du LCR dans un régime diagnostique pour les maladies non inflammatoires et non neurodégératives. La cohorte de validation, partiellement déjà disponible dans les centres cliniques impliqués dans l'étude, est composé de 400 sujets dont: 100 patients PD (UO1), 100 patients AD / FTD / ALS (UO2), 100 membres de la famille en bonne santé des patients NDD portant Mutations pathogènes et qui n'ont pas encore développé la maladie (UO1) et 100 individus témoins (UO1).

La description

Critères d'inclusion:
Critères d'inclusion pour les patients atteints de MP.

Pour l'IRCCS INM Neuromed, les patients seront recrutés parmi les personnes affiliées au Centre pour l'étude et le traitement de la maladie de Parkinson de l'Institut Neuromed de Pozzilli. Les sujets affectés seront sélectionnés selon les critères proposés par Gelb et al en 1999. Il s'agit d'un schéma très pragmatique basé sur la présence de quatre signes cardinaux, la réponse à une administration de test de levodopa et l'absence de signes atypiques:

A) Présence d'au moins 2 des 4 signes cardinaux (tremblement, rigidité, bradykinésie, début asymétrique) dont l'un doit être un tremblement ou une bradykinésie; B) absence de symptômes atypiques tels que: i) instabilité posturale précoce, phénomènes de congélation, détérioration cognitive, hallucinations, mouvements involontaires pathologiques, paralysie verticale; ii) les causes prouvées du parkinsonisme secondaire (lésions focales, médicaments, substances toxiques); C) Réponse documentée à l'utilisation des agonistes de L-DOPA ou de dapamine (ou l'absence d'une tentative thérapeutique adéquate avec L-DOPA ou des agonistes de dopamine).

Critères d'inclusion Patients Forad. Les patients seront sélectionnés au Centre pour les troubles cognitifs et les démences (CDCD) SCDU Neurology, Aou Maggiore della Carità, Novara. Les patients atteints de MA seront inclus après un diagnostic de maladie d'Alzheimer probable selon les critères de McKhann (2011) et soutenus par des biomarqueurs positifs pour l'amyloidopathie (TEP avec traceur amyloïde ou dosage du liquide céphalo-rachidé).
Critères d'inclusion pour les patients FTD / ALS. Pour l'UPO, les patients seront sélectionnés au centre tertiaire du centre de la sclérose latérale amyotrophique - SCDU Neurology, Aou Maggiore della Carità, Novara. Les patients atteints de sclérose latérale amyotrophique seront inclus après un diagnostic selon les critères El Escorial - révisés (2015): à cet égard, seuls les patients présentant un diagnostic défini ou probable soutenu par le laboratoire seront inclus. Pour les patients atteints de FTD, ils seront sélectionnés dans les deux centres mentionnés ci-dessus avec un diagnostic selon les critères de Rascovsky (2011). Dans ce groupe, le diagnostic sera étayé par des biomarqueurs négatifs pour l'amylodopathie (TEP avec un traceur amyloïde ou un dosage du liquide céphalorachidien amyloïde). Pour les patients atteints de SLA et de FTD concomitants, les critères El Escorial (2015) associés aux critères solides (2017) seront utilisés.

Critères d'exclusion:

Patients atteints de PD
- pathologies psychiatriques préexistantes;
- Des maladies neurodégénératives neurologiques telles que la sclérose en plaques, la sclérose latérale amyotrophique, la Alzheimer, les maladies neuromusculaires, l'épilepsie;
- diagnostic de démence;
Patients AD / FTD / ALS
- pathologies psychiatriques préexistantes;
- Diagnostic antérieur d'autres maladies neurodégénératives neurologiques;
- Les patients incapables de signer le consentement éclairé.
Commandes
- pathologies psychiatriques préexistantes;
- Des maladies neurodégénératives neurologiques telles que la parkinson, la sclérose en plaques, la sclérose latérale amyotrophique, la maladie d'Alzheimer, les maladies neuromusculaires, l'épilepsie;
- diagnostic de démence;
- dépression;
- Prise prolongée de médicaments stimulants anxiolytiques, antidépresseurs, antipsychotiques, induisant le sommeil.

Plan d'étude

Cette section fournit des détails sur le plan d'étude, y compris la façon dont l'étude est conçue et ce que l'étude mesure.

Comment l'étude est-elle conçue ?

Détails de conception

Que mesure l'étude ?

Principaux critères de jugement

Mesure des résultats	Description de la mesure	Délai
Les symptômes motrices des patients atteints de MP seront évalués avec le score Hoehn et Yahr (HY) Délai: 2 ans	L'échelle Hoehn et Yahr sera utilisée pour mesurer la progression des symptômes de Parkinson et le niveau d'invalidité. Ittincs States 1 à 5: Stade 1. Agmentation unilatérale uniquement, généralement avec une déficience fonctionnelle minimale ou sans fonctionnement; Stade 2 = maladie bilatérale, sans altération de l'équilibre; Stade 3 = maladie bilatérale légère à modérée; une certaine instabilité posturale; physiquement indépendant. Étape 4 = handicap sévère; toujours capable de marcher ou de se tenir debout sans aide. Étape 5 = fauteuil roulant lié ou noué à moins d'être aidé.	2 ans
Les symptômes moteurs et non moteurs des patients atteints de MP seront évalués avec les MDS-UPRS Délai: 2 ans	Le MDS-UPDRS a quatre parties, à savoir I: expériences non moteur de la vie quotidienne; II: expériences motrices de dailyliving; III: examen moteur; IV: Complications motrices. Vingt questions sont complétées par le patient / soignant	2 ans
Évaluation clinique des troubles cognitifs des patients PD, AD, ALS / FTD Délai: 2 ans	Les patients atteints de MP seront évalués avec le test d'évaluation cognitive de Montréal (MOCA). Il s'agit d'un test utilisé par les prestataires de soins de santé pour évaluer les personnes présentant une perte de mémoire ou d'autres symptômes de déclin cognitif. Le MOCA contient 30 questions et vérifie différents types de capacités cognitives ou de réflexion. Ceux-ci incluent: orientation, mémoire à court terme / rappel retardé, fonction exécutive / capacité visuospatiale, test d'horloge. Évaluation des troubles linguistiques. ALS / FTD - Évaluation des troubles cognitifs (et classification selon les critères forts, 2017); - Évaluation des troubles linguistiques. Patients de publicité: - Évaluation des troubles cognitifs (MMSE, test MOCA, test d'horloge); - Évaluation des troubles linguistiques.	2 ans
Évaluation clinique des patients SLA / FTD Délai: 2 ans	Classification clinique selon El Escorial - révisé	2 ans
Identification des variantes / mutations Délai: 2 ans	Patients PD: le nombre de multiples rares (fréquence des allèles mineurs, MAF <0,01) Des variantes délétères (faux-sens, non sensation, de cadréage et d'épissage) dans les gènes PD seront comptées chez les patients atteints de MP et les sujets sains non apparentés. L'étude d'assurance cas-témoins évaluera le risque de MP. AD, ALS / FTD: des variantes délétères (faux-sens, non sensation, cadrou et épissage) dans des gènes responsables seront prises en compte.	2 ans
Identification des complexes protéiques dans le LCR Délai: 2 ans	Les complexes protéiques présents dans le LCR des patients PD / AD / FTD / ALS et les sujets témoins recrutés dans les deux centres cliniques participant à l'étude seront analysés par chromatographie d'exclusion de taille (SEC) et par analyse protéomique sans étiquette. Les complexes seront séparés et fractionnés par SEC et identifiés et quantifiés par des spectromètres de masse. L'analyse statistique permettra d'identifier la présence / absence ou la différente de l'abondance de complexes protéiques chez les patients par rapport aux témoins et donc l'identification des biomarqueurs et des cibles thérapeutiques potentielles.	2 ans
Analyse bioinformatique pour l'identification des protéines et des voies moléculaires impliquées Délai: 2 ans	Grâce à une analyse avancée de la bioinformatique, les techniques d'analyse statistique multivariées et l'apprentissage automatique, les protéines et les voies moléculaires impliquées dans différentes maladies neurodégénératives et leur développement sera identifié. Cela nous permettra de comprendre et d'améliorer les connaissances de ces pathologies et d'identifier les cibles / voies / voies thérapeutiques ou diagnostiques potentiels.	2 ans
Validation des complexes de protéines dans le plasma Délai: 2 ans	Les complexes de protéines de marqueur clés identifiés dans la phase 1 seront validés dans des échantillons de plasma de patients PD / AD / FTD / ALS et des sujets témoins par des analyses de spectrométrie de masse ciblées et par des analyses techniques immunochimiques telles que ELISA, Western blot et immunobélisation.	2 ans
Analyse d'association avec les endophénotypes Délai: 2 ans	Les analyses de corrélation viseront à évaluer si la présence d'agrégats a un impact sur l'âge de l'apparition (AAO), les symptômes neurologiques, les symptômes non moteurs, ainsi que la réponse au traitement L-DOPA. De plus, les données génétiques des patients atteints de MP seront intégrées aux données biomoléculaires pour identifier les voies moléculaires altérées. Les courbes ROC seront utilisées pour évaluer la puissance de diagnostic du test.	2 ans
Analyse de l'impact biologique des complexes de protéines identifiés dans le LCR sur la viabilité des neurones dopaminergiques MDDA obtenus à partir d'IPSC des patients et témoins Délai: 2 ans	Les lignées IPSC du patient et témoin seront différenciées en neurones dopaminergiques mésodiencephaliques en utilisant des protocoles publiés. Les cellules seront exposées à des agrégats de protéines purifiés à partir du PATICE CSF et la vulnérabilité des cellules à la neurodégénérescence sera évaluée.	2 ans

Collaborateurs et enquêteurs

C'est ici que vous trouverez les personnes et les organisations impliquées dans cette étude.

Parrainer

Neuromed IRCCS

Collaborateurs

Università del Piemonte Orientale AOU Maggiore della Carità - Novara

Les enquêteurs

Chercheur principal: TERESA ESPOSITO, PhD, IRCCS INM Neuromed

Dates d'enregistrement des études

Ces dates suivent la progression des dossiers d'étude et des soumissions de résultats sommaires à ClinicalTrials.gov. Les dossiers d'étude et les résultats rapportés sont examinés par la Bibliothèque nationale de médecine (NLM) pour s'assurer qu'ils répondent à des normes de contrôle de qualité spécifiques avant d'être publiés sur le site Web public.

Dates principales de l'étude

Début de l'étude (Réel)

4 février 2025

Achèvement primaire (Estimé)

31 août 2026

Achèvement de l'étude (Estimé)

1 décembre 2026

Dates d'inscription aux études

Première soumission

27 janvier 2025

Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité

27 janvier 2025

Première publication (Réel)

25 mars 2025

Mises à jour des dossiers d'étude

Dernière mise à jour publiée (Réel)