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循环生物流体中蛋白质结构复合物的发现和验证,作为受神经退行性疾病影响的患者的早期诊断,预后和治疗管理的新生物标志物

2025年3月17日 更新者:Teresa Esposito、Neuromed IRCCS
神经退行性疾病(NDDS),例如帕金森病(PD),阿尔茨海默氏病(AD),额叶痴呆(FTD)和肌营养性侧面硬化症(ALS),其特征是聚集和内膜内蛋白质的聚集和内部积累的特征。在突触功能障碍和神经元死亡中发挥关键作用。 已经提出了生物流体中的蛋白质结构复合物来反映病理条件,表明它们用作蛋白质聚集的NDD的生物标志物。 在此框架中,我们计划:i)使用标准化的临床和遗传学程序收集大量NDD和前驱患者以及健康受试者; ii)应用一种基于基因组学,蛋白质组学和生物信息学分析的新方法来绘制生物流体中的蛋白质复合物; iii)确定新颖的循环生物标志物,并将它们与基因分析和疾病内表型相关联,以及; iv)验证人脑组织和多巴胺能培养物中的生物学特性。

研究概览

详细说明

该项目是一项多次观察性研究。 涉及的机构是:

OU1 -IRCCS INM神经元素OU2- PIEMONTE ORIENTALE的大学,该项目从熟悉和零星病例中的大量PD样品中利用了优势,在IRCCS Neuromed招募,我们已经收集并存储了临床信息,遗传数据,遗传学数据,遗传数据作为整个研究队列的DNA,血清,血浆和外周血单核细胞(PBMC)。 诱导的多能干细胞(IPSC)可用于6例PD患者和5名健康受试者。

操作单元(OU1)的活动是:

  1. 根据遗传学和临床记录对NDD患者的分层;
  2. NDD患者的CSF样本招募;
  3. 招募,WES和生物信息学分析NDD亲戚的选定队列(200个样本);
  4. 生物信息学分析以鉴定蛋白质结构改变,候选基因,遗传特征和失控的路径(OU1/ OU2);
  5. 循环复合物与PD内表型的相关性以鉴定疾病生物标志物(OU1/ OU2);
  6. RBD患者和PD亲戚的验证以鉴定PD的早期生物标志物(OU1/ OU2);
  7. 在IPSC衍生的MDDA神经元(OU1/ OU2)中,对人脑切片中蛋白质复合物的验证以及最相关的CSF和浆膜复合物的生物学活性的验证。

操作单元(OU2)的活动是:

  1. NDD患者的CSF和血浆样品收集和存储;
  2. 基于遗传学和临床记录的患者分层(与OU1合作);
  3. 检测CSF样品中蛋白质复合物的改变(100个样品);
  4. 对PD的CSF生物标志物的识别和验证(100个样本)(与OU1合作);
  5. 使用对血浆样品的免疫化学或靶向分析来验证复合物生物标志物(450个样品);
  6. 确定潜在的药物目标复合物(与OU1合作);
  7. 评估CSF/血浆结构变化的蛋白质是否也会在大脑中发生这些变化;
  8. 将蛋白质结构信息与遗传学和临床数据相关联(与OU1合作)。

研究类型

观察性的

注册 (估计的)

110

联系人和位置

本节提供了进行研究的人员的详细联系信息,以及有关进行该研究的地点的信息。

学习联系方式

学习地点

参与标准

研究人员寻找符合特定描述的人,称为资格标准。这些标准的一些例子是一个人的一般健康状况或先前的治疗。

资格标准

适合学习的年龄

  • 成人
  • 年长者

接受健康志愿者

是的

取样方法

概率样本

研究人群

这项研究将对510名受试者的总人口进行(140 pd,150张AD/ALS/FTD,120个对照,100个携带突变患者的亲戚),其中90名患有神经退行性疾病的临床诊断患者(40个PD病例) ,将在本研究中招募30例AD病例,20例ALS/FTD病例)。 该研究还包括对将在非炎症和非神经退行性疾病的诊断方案中接受CSF取样的20个对照个体的募集和分析。 该研究的验证队列已在研究中涉及的临床中心部分可用,由400名受试者组成:100名PD患者(UO1),100名AD/FTD/ALS患者(UO2),携带NDD患者的100名健康家庭成员致病突变,尚未发展为疾病(UO1)和100个对照个体(UO1)。

描述

  • 纳入标准:
  • PD患者的纳入标准。

对于IRCCS INM神经系统,将从隶属于研究和治疗Pozzilli神经研究所的研究和治疗中心的患者中招募患者。 受影响的受试者将根据Gelb等人在1999年提出的标准选择。 这是一个非常务实的方案,基于四个主要符号的存在,对左旋多巴的测试给药的响应以及不具有非典型符号的反应:

a)在4个基本体征中至少有2个存在(震颤,刚性,头肌动症,不对称发作),其中一个必须是震颤或胸肌; b)缺乏非典型症状,例如:i)早期的姿势不稳定,冻结现象,认知恶化,幻觉,病理非自愿运动,垂直凝视瘫痪; ii)经过证明的次要帕金森氏症的原因(局灶性病变,药物,有毒物质); c)记录了对使用L-DOPA或DAPAMINE激动剂的反应(或与L-DOPA或多巴胺激动剂缺乏适当的治疗尝试)。

  • 纳入标准遗留患者。 将在Novara的Aou Maggiore DellaCaritàAouMaggiore DellaCarità的认知障碍和痴呆症中心(CDCD)中心选择患者。 根据McKhann标准(2011)诊断出可能的阿尔茨海默氏病后,将包括AD患者,并得到淀粉样病阳性生物标志物的支持(淀粉样蛋白的阳性生物标志物(带有淀粉样蛋白示踪剂或淀粉样蛋白脑脊液剂量的PET)。
  • FTD/ALS患者的纳入标准。 对于UPO,将在三级中心肌萎缩性侧索硬化症-SCDU神经病学,Novara Aou Maggiore dellaCarità选择患者。 根据EL ESCOIAL标准 - 修订(2015),将包括肌萎缩性侧向硬化症患者:在这方面,只有在实验室支持的确定或可能诊断的患者。 对于FTD患者,根据Rascovsky标准(2011年),将在上面提到的两个中心中选择它们。 在这一组中,诊断将由淀粉样病(淀粉样蛋白示踪剂或淀粉样蛋白脑脊液剂量的PET)负生物标志物支持。 对于伴随ALS和FTD的患者,将使用与强标准(2017)相关的El Escorial标准(2015)。

排除标准:

  • PD患者

    • 先前存在的精神病病;
    • 神经退行性神经系统疾病,例如多发性硬化症,肌萎缩性侧面硬化症,阿尔茨海默氏症,神经肌肉疾病,癫痫;
    • 诊断痴呆症;
  • AD/FTD/ALS患者

    • 先前存在的精神病病;
    • 先前诊断出其他神经退行性神经系统疾病;
    • 患者无法签署知情同意。
  • 控件

    • 先前存在的精神病病;
    • 神经退行性神经系统疾病,例如帕金森氏病,多发性硬化症,肌萎缩性侧面硬化症,阿尔茨海默氏症,神经肌肉疾病,癫痫;
    • 诊断痴呆症;
    • 沮丧;
    • 长期摄入抗焦虑,抗抑郁,抗精神病药,诱导睡眠,认知刺激药物。

学习计划

本节提供研究计划的详细信息,包括研究的设计方式和研究的衡量标准。

研究是如何设计的?

设计细节

研究衡量的是什么?

主要结果指标

结果测量
措施说明
大体时间
PD患者的运动症状将通过Hoehn和Yahr(HY)评分评估
大体时间:2年
Hoehn和Yahr量表将用于衡量帕金森症的症状如何进展和残疾水平。 包括第1至5阶段:第1阶段。仅单方面参与,通常受到最小或无功能障碍;第2阶段=双侧疾病,没有平衡损害;第3阶段=轻度至中度双侧疾病;一些姿势不稳定;物理独立。 第4阶段=严重的残疾;仍然可以步行或无助。 阶段5 =轮椅绑起来或卧床不起,除非有帮助。
2年
PD患者的运动症状和非运动症状将通过MDS-UPDR进行评估
大体时间:2年
MDS-Updrs有四个部分,即我:日常生活的非运动经历; II:Dailyliving的运动经历; III:运动检查; IV:运动并发症。 患者/照顾者完成了二十个问题
2年
PD,AD,ALS/FTD患者认知障碍的临床评估
大体时间:2年

PD患者将通过蒙特利尔认知评估(MOCA)测试评估。 这是医疗保健提供者使用的测试,以评估记忆力丧失或其他认知能力下降症状的人。 MOCA包含30个问题,并检查不同类型的认知或思维能力。 其中包括:方向,短期内存/延迟召回,执行功能/视觉空间能力,绘制时钟测试。 语言障碍评估。

ALS/FTD-认知障碍评估(根据强大标准进行分类,2017年); - 语言障碍评估。

AD患者: - 认知障碍评估(MMSE,MOCA测试,时钟测试);

- 语言障碍评估。

2年
ALS/FTD患者的临床评估
大体时间:2年
根据El Escorial-修订的临床分类
2年
识别变体/突变
大体时间:2年

PD患者:多个稀有等位基因频率,MAF <0.01)的数量 PD患者和无关的健康受试者将计数有害的(错义,非含义,移交和剪接)变体。 病例对照协会研究将评估PD风险。

AD,ALS/FTD:将考虑负责基因中有害变体(错过,非理性,移码和剪接)。

2年
鉴定CSF中蛋白质复合物
大体时间:2年
PD/AD/FTD/ALS患者的CSF中存在的蛋白质复合物以及参与研究的两个临床中心中招募的对照组受试者将通过大小排除色谱法(SEC)和无标记的蛋白质组学分析进行分析。 复合物将通过SEC分离和分离,并通过质谱仪识别和量化。 与对照组相比,统计分析将允许患者的存在/不存在或蛋白质复合物的不同丰度,从而鉴定生物标志物和潜在的治疗靶标。
2年
鉴定蛋白质和分子途径的生物信息学分析
大体时间:2年
通过先进的生物信息学分析,多元统计分析技术和机器学习,涉及不同神经退行性疾病的蛋白质和分子途径以及它们的发育。 这将使我们能够理解和改善这些病理学的知识,并确定潜在的治疗或诊断靶标/途径。
2年
血浆中蛋白质复合物的验证
大体时间:2年
通过靶向质谱分析和免疫化学技术分析(例如ELISA,Western blot and Western blot和Immunoassays),将在PD/AD/FTD/ALS患者的血浆样品中验证的关键标记蛋白复合物将在PD/AD/FTD/ALS患者的血浆样品中得到验证。
2年
与内型型的关联分析
大体时间:2年
相关分析将旨在评估骨料的存在是否会影响发病时代(AAO),神经系统症状,非运动症状以及对L-DOPA治疗的反应。 此外,来自PD患者的遗传数据将与生物分子数据集成,以鉴定分子途径改变。 ROC曲线将用于评估测试的诊断能力。
2年
分析CSF中鉴定出的蛋白质复合物对从患者IPSC和对照组获得的MDDA多巴胺能神经元的生存能力的生物学影响
大体时间:2年
患者和对照IPSC系将使用已发表的方案区分为介导型多巴胺能神经元。 细胞将暴露于从患者CSF中纯化的蛋白质聚集体,并评估细胞对神经变性的脆弱性。
2年

合作者和调查者

在这里您可以找到参与这项研究的人员和组织。

调查人员

  • 首席研究员:TERESA ESPOSITO, PhD、IRCCS INM Neuromed

研究记录日期

这些日期跟踪向 ClinicalTrials.gov 提交研究记录和摘要结果的进度。研究记录和报告的结果由国家医学图书馆 (NLM) 审查,以确保它们在发布到公共网站之前符合特定的质量控制标准。

研究主要日期

学习开始 (实际的)

2025年2月4日

初级完成 (估计的)

2026年8月31日

研究完成 (估计的)

2026年12月1日

研究注册日期

首次提交

2025年1月27日

首先提交符合 QC 标准的

2025年1月27日

首次发布 (实际的)

2025年3月25日

研究记录更新

最后更新发布 (实际的)

2025年3月25日

上次提交的符合 QC 标准的更新

2025年3月17日

最后验证

2025年3月1日

更多信息

与本研究相关的术语

计划个人参与者数据 (IPD)

计划共享个人参与者数据 (IPD)?

不

药物和器械信息、研究文件

研究美国 FDA 监管的药品

不

研究美国 FDA 监管的设备产品

不

在美国制造并从美国出口的产品

不

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