Denne siden ble automatisk oversatt og nøyaktigheten av oversettelsen er ikke garantert. Vennligst referer til engelsk versjon for en kildetekst.

Oppdagelse og validering av proteinstrukturkomplekser i sirkulerende biofluider som nye biomarkører for tidlig diagnose, prognose og terapeutisk behandling av pasienter som er berørt av nevrodegenerative lidelser

17. mars 2025 oppdatert av: Teresa Esposito, Neuromed IRCCS

Nevrodegenerative lidelser (NDDs), som Parkinsons sykdom (PD), Alzheimers sykdom (AD), frontotemporal demens (FTD) og amyotrofisk lateral sklerose (ALS) er preget av aggregering og intracellulær ansamling av feilfoldet proteiner, som er trodd, som er trodd Å spille en nøkkelrolle i synaptisk dysfunksjon og neuronal død. Proteinstrukturkomplekser i biofluider er blitt foreslått for å speile patologiske tilstander som antyder deres bruk som biomarkører for NDD -er preget av proteinaggregering. I dette rammeverket planlegger vi å: i) samle en stor kohort av NDD- og prodromale pasienter og friske personer ved bruk av standardiserte kliniske og genetiske prosedyrer; ii) bruk en ny metode basert på genomikk, proteomikk og bioinformatisk analyse for å kartlegge proteinkomplekser i biofluider; iii) Identifiser nye sirkulerende biomarkører og korrelere dem med genetisk profilering og sykdomsendofenotyper, og; iv) Valider de biologiske egenskapene i humant hjernevev og dopaminergiske kulturer.

Studieoversikt

Status

Rekruttering

Forhold

Intervensjon / Behandling

Detaljert beskrivelse

Prosjektet er en multikrentrisk observasjonsstudie. Institusjoner involvert er:

OU1 - IRCCS INM neuromed OU2 -Universitetet i Piemonte Orientale Prosjektet utnytter tilgjengeligheten av en stor samling av PD -prøver fra kjente og sporadiske tilfeller, rekruttert ved IRCCs neuromed, som vi allerede samlet inn og lagret klinisk informasjon, genetiske data også så bra og godt og godt og godt som DNA, serum, plasma og perifere blodmononukleære celler (PBMC) for hele studiekohorten. Induserte pluripotente stamceller (IPSC) er tilgjengelige for 6 PD -pasienter og 5 friske personer.

Aktivitetene til driftsenheten (OU1) er:

Stratifisering av NDD -pasienter basert på genetikk og kliniske poster;
Rekruttering av CSF -prøve av NDD -pasienter;
Rekruttering, WES og bioinformatisk analyse av en valgt kohort av NDD -pårørende (200 prøver);
Bioinformatisk analyse for å identifisere proteinstrukturelle endringer, kandidatgener, genetiske profiler og deregulerte stier (OU1/ OU2);
Korrelasjon av sirkulasjonskompleks med PD -endofenotyper for å identifisere sykdomsbiomarkører (OU1/ OU2);
Validering hos RBD -pasienter og PD -pårørende for å identifisere tidlige biomarkører for PD (OU1/ OU2);
Validering av proteinkompleksene i humane hjerneskiver og analyse av den biologiske aktiviteten til de mest relevante CSF og plasmatiske komplekser i IPSC-avledede MDDA-nevroner (OU1/ OU2).

Aktivitetene til driftsenheten (OU2) er:

CSF og plasmaprøveinnsamling og lagring for pasienter med NDD -er;
Stratifisering av pasienter basert på genetikk og kliniske poster (i samarbeid med OU1);
Oppdage endringer i proteinkomplekser i CSF -prøver (100 prøver);
Identifisering og validering av CSF -biomarkører for PD (100 prøver) (i samarbeid med OU1);
Valider komplekse biomarkører ved bruk av immunokjemisk eller målrettet analyse på plasmaprøver (450 prøver);
Identifisere potensielle målbare komplekser av medikamenter (i samarbeid med OU1);
Vurder om proteiner med strukturelle endringer i CSF/plasma også har disse endringene i hjernen;
Korrelere proteinstrukturell informasjon med genetikk og kliniske data (i samarbeid med OU1).

Studietype

Observasjonsmessig

Registrering (Antatt)

110

Kontakter og plasseringer

Denne delen inneholder kontaktinformasjon for de som utfører studien, og informasjon om hvor denne studien blir utført.

Studiekontakt

Navn: Teresa Esposito, PhD
Telefonnummer: +39 0865915249
E-post: teresa.esposito@igb.cnr.it

Studiesteder

Italia
- - Pozzilli, Italia, 86077
    - Rekruttering
    - IRCCS INM Neuromed
    - Ta kontakt med:
      
      Teresa Esposito, PhD
      
      Telefonnummer: +30 0865915249
      
      E-post: teresa.esposito@igb.cnr.it

Deltakelseskriterier

Forskere ser etter personer som passer til en bestemt beskrivelse, kalt kvalifikasjonskriterier. Noen eksempler på disse kriteriene er en persons generelle helsetilstand eller tidligere behandlinger.

Kvalifikasjonskriterier

Alder som er kvalifisert for studier

Voksen
Eldre voksen

Tar imot friske frivillige

Prøvetakingsmetode

Sannsynlighetsprøve

Studiepopulasjon

Studien vil bli utført på en total populasjon på 510 forsøkspersoner (140 PD, 150 e.Kr. , 30 AD -tilfeller, 20 ALS/FTD -tilfeller) vil bli rekruttert i denne studien. Studien inkluderer også rekruttering og analyse av 20 kontrollpersoner valgt blant de som vil gjennomgå CSF-prøvetaking i et diagnostisk regime for ikke-inflammatoriske og ikke-nevrodegenerative sykdommer. Valideringskohorten, delvis allerede tilgjengelig ved de kliniske sentrene som er involvert i studien, er sammensatt av 400 personer: 100 PD -pasienter (UO1), 100 e.Kr. Patogene mutasjoner og som ennå ikke har utviklet sykdommen (UO1) og 100 kontrollerer individer (UO1).

Beskrivelse

Inkluderingskriterier:
Inkluderingskriterier for PD -pasienter.

For IRCCS INM neuromed, vil pasienter bli rekruttert fra de som er tilknyttet Center for the Study and Treatment of Parkinsons sykdom ved Neuromed Institute of Pozzilli. Beratte forsøkspersoner vil bli valgt i henhold til kriteriene foreslått av Gelb et al i 1999. Dette er et veldig pragmatisk skjema basert på tilstedeværelsen av fire kardinalskilt, responsen på en testadministrasjon av levodopa og fraværet av atypiske tegn:

A) tilstedeværelse av minst 2 av de 4 kardinalskiltene (skjelving, stivhet, bradykinesi, asymmetrisk begynnelse) hvorav den ene må være skjelving eller bradykinesi; B) fravær av atypiske symptomer som: i) tidlig postural ustabilitet, frysende fenomener, kognitiv forverring, hallusinasjoner, patologiske ufrivillige bevegelser, vertikal blikkparalyse; ii) påviste årsaker til sekundær parkinsonisme (fokale lesjoner, medikamenter, giftige stoffer); C) Dokumentert respons på bruk av L-DOPA- eller dapaminagonister (eller mangel på et tilstrekkelig terapeutisk forsøk med L-dopa eller dopaminagonister).

Inkluderingskriterier for pasienter. Pasienter vil bli valgt ved Center for Cognitive Disorders and Dementias (CDCD) SCDU Neurology, Aou Maggiore della Carità, Novara. Pasienter med AD vil bli inkludert etter diagnose av sannsynlig Alzheimers sykdom i henhold til McKhann -kriteriene (2011) og støttet av positive biomarkører for amyloidopati (PET med amyloid sporstoff eller amyloid cerebrospinal væskedosering).
Inkluderingskriterier for FTD/ALS -pasienter. For UPO vil pasienter bli valgt på det tertiære senteret amyotrofisk lateral sklerose - SCDU nevrologi, Aou Maggiore della Carità, Novara. Pasienter med amyotrofisk lateral sklerose vil bli inkludert etter en diagnose i henhold til EL -escorialkriteriene - Revised (2015): I denne forbindelse vil bare pasienter med en klar eller sannsynlig diagnose støttet av laboratorium bli inkludert. For pasienter med FTD vil de bli valgt på begge sentre nevnt ovenfor med en diagnose i henhold til Rascovsky Criteria (2011). I denne gruppen vil diagnosen bli støttet av negative biomarkører for amyloidopati (PET med amyloid sporstoff eller amyloid cerebrospinal væskedosering). For pasienter med samtidig ALS og FTD, vil El Escorial Criteria (2015) assosiert med Strong Criteria (2017) bli brukt.

Eksklusjonskriterier:

PD -pasienter
- eksisterende psykiatriske patologier;
- Nevrodegenerative nevrologiske sykdommer som multippel sklerose, amyotrofisk lateral sklerose, Alzheimers, nevromuskulære sykdommer, epilepsi;
- diagnose av demens;
AD/FTD/ALS -pasienter
- eksisterende psykiatriske patologier;
- tidligere diagnose av andre nevrodegenerative nevrologiske sykdommer;
- Pasienter som ikke er i stand til å signere informert samtykke.
Kontroller
- eksisterende psykiatriske patologier;
- Nevrodegenerative nevrologiske sykdommer som Parkinson, multippel sklerose, amyotrofisk lateral sklerose, Alzheimers, nevromuskulære sykdommer, epilepsi;
- diagnose av demens;
- depresjon;
- Langvarig inntak av angstdempende, antidepressiva, antipsykotisk, søvninduserende, kognitive stimulerende medisiner.

Studieplan

Denne delen gir detaljer om studieplanen, inkludert hvordan studien er utformet og hva studien måler.

Hvordan er studiet utformet?

Designdetaljer

Hva måler studien?

Primære resultatmål

Resultatmål	Tiltaksbeskrivelse	Tidsramme
Motoriske symptomer på PD -pasienter vil bli evaluert med Hoehn og Yahr (HY) score Tidsramme: 2 år	Hoehn- og Yahr -skalaen vil bli brukt til å måle hvordan Parkinsons symptomer utvikler seg og funksjonshemmingsnivået. Itincludes Stages 1 til 5: Fase 1. ensidig involvering, vanligvis med minimal eller ingen funksjonsnedsettelse; Fase 2 = bilateral sykdom, uten svekkelse av balanse; Fase 3 = mild til moderat bilateral sykdom; noe postural ustabilitet; fysisk uavhengig. Fase 4 = alvorlig funksjonshemming; fremdeles i stand til å gå eller stå uten assistanse. Fase 5 = rullestolbundet eller sengeliggende med mindre hjelp.	2 år
Motoriske og ikke-motoriske symptomer på PD-pasienter vil bli evaluert med MDS-UPDRS Tidsramme: 2 år	MDS-UPDRS har fire deler, nemlig jeg: ikke-motoriske opplevelser av dagligliv; II: Motoropplevelser av Dailyliving; III: Motorundersøkelse; IV: Motoriske komplikasjoner. Tjue spørsmål er fullført av pasienten/omsorgspersonen	2 år
Klinisk evaluering av kognitiv svikt av PD, AD, ALS/FTD -pasienter Tidsramme: 2 år	PD -pasienter vil bli evaluert med Montreal Cognitive Assessment (MOCA) -testen. Dette er en test som brukes av helsepersonell for å evaluere personer med hukommelsestap eller andre symptomer på kognitiv tilbakegang. MOCA inneholder 30 spørsmål og sjekker forskjellige typer kognitive eller tenkende evner. Disse inkluderer: orientering, korttidsminne/forsinket tilbakekalling, utøvende funksjon/visuospatial evne, klokketrekking.- Vurdering av språkforstyrrelser. ALS/FTD - Vurdering av kognitive lidelser (og klassifisering i henhold til sterke kriterier, 2017); - Vurdering av språkforstyrrelser. AD -pasienter: - Vurdering av kognitive lidelser (MMSE, MOCA -test, klokketest); - Vurdering av språkforstyrrelser.	2 år
Klinisk evaluering av ALS/FTD -pasienter Tidsramme: 2 år	Klinisk klassifisering i henhold til El Escorial - revidert	2 år
Identifisering av varianter/mutasjoner Tidsramme: 2 år	PD -pasienter: antall flere sjeldne (mindre allelfrekvens, MAF <0,01) Skadelig (missense, ikke -sans, rammeskift og spleising) varianter i PD -gener vil bli talt i PD -pasienter og ikke -relaterte sunne personer. Case-Control Assoiciation Study vil evaluere PD-risikoen. AD, ALS/FTD: Deleterius varianter (Missense, Non Sense, Frameshift and Splicing) i ansvarlige gener vil bli vurdert.	2 år
Identifisering av proteinkomplekser i CSF Tidsramme: 2 år	Proteinkomplekser som er til stede i CSF av PD/AD/FTD/ALS-pasienter og kontrollpersoner som er rekruttert i de to kliniske sentrene som deltar i studien, vil bli analysert ved størrelse eksklusjonskromatografi (SEC) og ved etikettfri proteomisk analyse. Kompleksene vil bli separert og fraksjonert med SEC og identifisert og kvantifisert med massespektrometre. Statistisk analyse vil tillate å identifisere tilstedeværelse/fravær eller den forskjellige forekomsten av proteinkomplekser hos pasienter sammenlignet med kontroller og derfor identifisering av biomarkører og potensielle terapeutiske mål.	2 år
Bioinformatisk analyse for identifisering av proteiner og involverte molekylære veier Tidsramme: 2 år	Gjennom avansert bioinformatikkanalyse vil multivariate statistiske analyseteknikker og maskinlæring, proteiner og molekylære veier involvert i forskjellige nevrodegenerative sykdommer og deres utvikling bli identifisert. Dette vil tillate oss å forstå og forbedre kunnskapen om disse patologiene og identifisere potensielle terapeutiske eller diagnostiske mål/veier.	2 år
Validering av proteinkomplekser i plasma Tidsramme: 2 år	Nøkkelmarkørproteinkompleksene identifisert i fase 1 vil bli validert i plasmaprøver fra PD/AD/FTD/ALS -pasienter og kontrollpersoner gjennom målrettede massespektrometri -analyser og gjennom immunokjemiske tekniske analyser som ELISA, Western blott og immunanalyser.	2 år
Assosiasjonsanalyse med endofenotyper Tidsramme: 2 år	Korrelasjonsanalyser vil være rettet mot å evaluere om tilstedeværelsen av aggregater påvirker alderen på begynnelsen (AAO), nevrologiske symptomer, ikke-motoriske symptomer, samt responsen på L-DOPA-behandling. I tillegg vil genetiske data fra PD -pasienter bli integrert med biomolekylære data for å identifisere endrede molekylveier. ROC -kurver vil bli brukt til å evaluere testens diagnostiske kraft.	2 år
Analyse av den biologiske effekten av proteinkomplekser identifisert i CSF på levedyktigheten til MDDA -dopaminergiske nevroner oppnådd fra IPSCs av pasienter og kontroller Tidsramme: 2 år	Pasient- og kontroll IPSC -linjer vil bli differensiert til mesodiencephalic dopaminergiske nevroner ved bruk av publiserte protokoller. Celler vil bli utsatt for proteinaggregater renset fra pasient CSF og cellenes sårbarhet for nevrodegenerasjon vil bli vurdert.	2 år

Samarbeidspartnere og etterforskere

Det er her du vil finne personer og organisasjoner som er involvert i denne studien.

Sponsor

Neuromed IRCCS

Samarbeidspartnere

Università del Piemonte Orientale AOU Maggiore della Carità - Novara

Etterforskere

Hovedetterforsker: TERESA ESPOSITO, PhD, IRCCS INM Neuromed

Studierekorddatoer

Disse datoene sporer fremdriften for innsending av studieposter og sammendragsresultater til ClinicalTrials.gov. Studieposter og rapporterte resultater gjennomgås av National Library of Medicine (NLM) for å sikre at de oppfyller spesifikke kvalitetskontrollstandarder før de legges ut på det offentlige nettstedet.

Studer hoveddatoer

Studiestart (Faktiske)

4. februar 2025

Primær fullføring (Antatt)

31. august 2026

Studiet fullført (Antatt)

1. desember 2026

Datoer for studieregistrering

Først innsendt

27. januar 2025

Først innsendt som oppfylte QC-kriteriene

27. januar 2025

Først lagt ut (Faktiske)

25. mars 2025

Oppdateringer av studieposter

Sist oppdatering lagt ut (Faktiske)