内視鏡超音波の標的使用によるゲノムプロファイリングの改善と癌治療の時間の短縮 (IMPROVED)

全体的な目的：

新規FNB針が、EUS-Bガイドがん診断における標準的なFNA針よりも優れた診断精度を提供するかどうかを調査する。

デザイン：

前向き多施設無作為化制御優位性研究。

主要な研究の目的：

顕微鏡の組織学/細胞診から分子レベルへの包括的な表現タイピングを提供する能力を比較して、腫瘍およびFNBの最適かつ初期の個別化された癌特異的療法を可能にします。

主な焦点は、一般的な深部座りの悪性腫瘍、NSCLCとリンパ腫です。

研究の説明：

癌の疑いがあるため、拡大した（最短軸では少なくとも10 mm）、FDG-Avidリンパ節または食道/胃に隣接する他の病変（例： したがって、肝臓転移の疑いがある）、したがって、EUS-Bの兆候があり、標準の22G FNA針、または新規22GクラウンカットFNB針を使用して組織サンプリングにランダムに割り当てられます。

肺がんの疑いがある280人の患者が含まれ、NSCLCの最終診断に伴う254人の患者（各グループで127人）の対象数（統計を参照）が到達すると、包含が終了します（統計を参照）。

同様に、リンパ腫の最終診断に伴う74人の患者（各グループで37人）の対象数が得られるまで、リンパ腫の疑いのある82人の患者が含まれます（統計を参照）。

針：

EUS-Bの標準的な針は21gまたは22gのFNA-Needle（細かい針吸引）ですが、免疫融解と突然変異分析のためにより多くの組織学的材料を得るために新しい針が開発されています。 生検標本が大きくなると、診断収量が増加し、より多くの突然変異分析が可能になりますが、サンプルの品質は体積によって決定されるだけではありません。19g対22G FNA針でより大きな組織量が得られますが、同一の診断収量で得られます。

また、標準の22G FNAと比較して、新しい3点クラウンカットデザイン（Franseen Needle Design）を備えた22G針を使用してEBUSで組織の体積が増加しているようです。 しかし、診断収量は増加せず、対処された理由の1つは、気管/気管支軟骨に浸透できないことでした（EUS-Bで問題はありません）。 安全性と有害事象はFNAと違いはありませんでした。

クラウンカット針は、第3世代のファインニードル生検針（FNB）に属します。 FNB針の第3世代内で、さまざまなデザインを比較した研究では、FNB針を多面的なチップ（クラウンカットおよびフォークチップニードル）が同じ世代の他のデザインよりも優れていることがわかりました。

EUS-BでのFNB針の使用を調査した研究はありません。 この背景では、EUS-Bの研究では、調査員は、標準FNAよりも、新しい第3世代22G FNBニードル（SonotipTopgain®、Mediglobe、ドイツ）の診断優位性の体系的な評価を説明し、EUS-Bでの安全性を評価します。

学習行動：

募集とインフォームドコンセント：

調査員は、癌の疑いのある研究部位に紹介された患者の中で、参加者を研究に募集します。 診断手順を計画すると、医師は患者を研究に含めることができるかどうかを評価します。 ここでは、患者は研究に精通している医療専門家から研究に関する口頭情報を受け取ります。 会話は、患者が共同シッターを持参できる邪魔されない状態で行われます。

患者は、研究に関する書面による情報を受け取り、健康科学研究プロジェクトにおける研究参加者の権利と研究責任のある医師に関する連絡先情報を説明します。

24時間の検討期間は、研究に関する質問とともに研究責任のある医師に連絡できる患者に与えられます。

患者は、医療専門家と患者の両方が書面によるインフォームドコンセント文書に署名したら、研究に含めることができます。

患者は、さらなる診断調査または治療に影響を与えることなく、いつでも研究から撤退する能力を持っています。

募集は、地域のZealand（NæstvedおよびRoskilde）で開始され、調査が確立されると、Odense University Hospitalとの協力契約とデータ処理契約が行われます。

EUS-B手順：

患者は、肺がんの疑いがあるか、深部シートリンパ腫のいずれかに基づいて、2つのグループのいずれかに割り当てられます。 各グループでは、オンラインパスワードで保護されたコンピューター生成システム（REDCAP）を使用して、ランダム化が1：1の比率で実行されます。 さらに、ランダム化はがんの病歴に基づいて層別化され、初めての肺がんまたはリンパ腫が疑われ、各グループの既知の癌の再発/進行が疑われることを保証します。

患者がインクルージョンおよびインフォームドコンセントに適していることが判明した場合、患者は、処置前にFNAまたはFNBのいずれかでサンプリングするように直ちにランダム化されます。

診断の精密検査は、患者の患者の手順として意識的な鎮静の下で行われます。 気管支鏡検査（および指定されている場合はEBUS）の後、EUS-Bは、食道の線形EBUSエコーエコーエンドスコープをスライドさせることにより行われます。

サンプリング手法は、両方の針で同じです。 内側のスタイルを使用したサンプリングは、吸引を伴うファニング技術を使用して、ステーションごとに最低2つの針パスで実行されます。 ただし、オペレーターが示されていることを発見した場合、針パスの数は変化する可能性があり、注目されます。 吸引剤は、ホルマリンを含む専用容器に移し、少なくとも1つの塗抹標本がガラスのスライドに生成されます。 サンプルには、患者IDと病変の位置が付いています。

病理学者はグループ割り当てに盲目にされます。 調査コーディネーターのみがランダム化モジュールにアクセスできます。

迅速なオンサイト評価（Rose）は研究サイトでは利用できないため、本研究では利用されません。

診断手順は、次の各病院の呼吸器部門からの内視鏡検査の経験豊富な呼吸器科医（最低200 EUS-Bが実施された）によって行われます。

• Zealand University Hospital、Næstved
• Zealand University Hospital、Roskilde
• Odense University Hospital、Odense

生物学的材料：

疑わしい病変の針生検は、病理学部に通常の臨床診療に従って送信され、そこでは癌細胞の存在について材料が検査され、非小細胞肺癌（NSCLC）が見つかるとゲノム分析が行われます。

組織材料は、通常の慣行を受け取り、病理学科で分析します。そこでは、組織サンプルを保存するための診断バイオバンクがあります。 これはこの研究研究に固有のものではなく、調査員は分析後に組織を保存しません。

標本処理：

すべての材料は、臨床基準に従って調製され、組織マイクロコアは、ホルマリン固定とパラフィン埋め込みを備えた細胞ブロックとして処理されます。 スミアは、5月のグリュンヴァルトギムサ染色のために放送されます。 各細胞ブロックはヘマトキシリンとエオシンで染色され、肺がんに特異的な関連する免疫組織化学染色が使用されます。 他の癌の場合、標準的なレジメンに従って補足的な汚れが使用されます。 リンパ腫が疑われる場合、組織は、専用のガラスチューブのフローサイトメトリーのためにさらに送られます。

診断精度：

FNAおよびFNBの診断精度は、式「診断サンプル/すべてのサンプル」を使用して比較および推定されます。 標本は、肺標本のパパニコラウ分類のローカル修正バージョンに従って評価され、次のいずれかに分類されます。

I.適切でないii。 悪性IIIに対して陰性。 非定型セル（例： 炎症または反応性の変化）iv。 悪性V.悪性腫瘍の疑わしい

突然変異分析：

ヘマトキシリンとエオシン染色スライドの腫瘍含有量の評価に続いて、NSCLCが結論付けられ、関連する領域はマクロジン化され、Generead DNA FFPEキット（Qiagen）を使用して標準的なゲノムDNA抽出手順を受けます。 DNA濃縮は、キットフルオロメーターを使用して推定されます。 すべての方法は、各組織サンプルで少なくとも20％の腫瘍含有量（病理学者によって推定）を伴うメーカーのガイドラインに従って実行されます。 病理学科で利用可能なNGSアッセイを使用した次世代シーケンス（NGS）は、サブタイプに関係なくすべてのNSCLC患者に対して行われます。

調査の焦点は、肺がんに関連するバイオマーカーにあります。 alk、braf、egfr、erbb2、kras、met。

リンパ腫に関しては、組織材料の分析は、サブタイピングが主に免疫組織化学と流動測定に基づいている研究部位での正常な臨床診療に従います。 上記のNGSアッセイは、組織材料がまばらな場合に実行されます。 NGSは、リンパ腫サブタイプの分類に必要です。

統計：

肺がんの疑いのあるサブグループの場合：

サンプルサイズの計算は、13％の包括的なターゲットゲノムプロファイリングの成功の有病率における予想される違いに基づいていました（FNAで77％対コア針生検、CNBで90％）。 80％のパワー（1ベータ）、有意水準（アルファ0.05）では、254人の患者が生成されます。 10％（26人の患者）が他の診断を受けることが期待されるため、参加者の数は280人の患者であり、各グループ（FNA対FNB）でNSCLCと127人を診断する必要があります。

疑わしいリンパ腫サブグループの場合：

サンプルサイズの計算は、深部シートリンパ腫の経液性サンプリングで31.30％の診断精度の予想差に基づいていました（EUS-FNBで91.30％、EUS-FNAで60％）。 90％のパワー（1ベータ）と有意水準（アルファ）0.05では、74人の患者が得られます。

約10％（8人の患者）が他の診断を受けることが予想されるため、調査員は各グループの37人の患者を診断するために82人の患者を含める必要があります。

記述統計と分析統計は、専用の統計ソフトウェア（STATA18.0を使用して実行されます。 Statacorp®、テキサス州、米国）。 カテゴリデータは、数（n）およびパーセンテージ（％）、および連続変数として中央値と範囲として説明されます。 カテゴリ変数のグループ間の違いは、Chi2テストまたはフィッシャーのテスト（該当する場合）、およびMann-Whitney U-Testを使用した連続変数の違いで分析されます。