Genomisen profiloinnin parantaminen ja ajan vähentäminen syöpähoitoon endoskooppisen ultraäänen kohdennetun käytön avulla (IMPROVED)

Yleinen tavoite:

Tutkitaan, tarjoaako uusi FNB-neula paremman diagnostisen tarkkuuden kuin tavanomainen FNA-neula EUS-B-ohjatussa syöpädiagnoosissa.

Design:

Prospektiivinen monikeskus satunnaistettu kontrolli -paremmuustutkimus.

Ensisijainen tutkimuksen tavoite:

Vertaamalla kykyä tarjota kattava fenotyyppi mikroskopian histologiasta/sytologiasta molekyylitasoon, jotta FNA: n ja FNB: n optimaalinen ja varhainen henkilökohtainen syöpäspesifinen terapia mahdollistaa kasvaimista ja imusolmukkeista ruokatorven/vatsan vieressä käyttämällä EUS-B: tä potilailla, joissa viitattiin epäillyn syöpään.

Pääpaino ovat yleiset syvälle kiinnitetyt pahanlaatuiset kasvaimet: NSCLC ja lymfooma.

Opiskelukuvaus:

Peräkkäiset potilaat, jotka viittasivat epäillyn syövän takia, laajentuneiden (vähintään 10 mm lyhyimmän akselin) ja/tai FDG-AVID-imusolmukkeiden tai muiden ruokatorven/vatsan vieressä olevien leesioiden (esim. Epäilty maksan etäpesäkkeet), siten indikaatiolla EUS-B: lle, osoitetaan satunnaisesti kudosnäytteelle joko tavanomaisella 22 g: n FNA-neulalla tai uudella 22 g: n kruununleikkauksella FNB-neulalla.

Sisältää 280 potilasta, joilla on epäillään keuhkosyöpä, ja sisällyttäminen päättyy, kun kohdennettu 254 potilaan lukumäärä (jokaisessa ryhmässä 127) saavutetaan lopullinen diagnoosi NSCLC: stä (ks. Tilastot).

Samoin 82 potilasta, joilla on epäilty lymfooma, otetaan mukaan, kunnes kohdennettu 74 potilaan lukumäärä (37 kussakin ryhmässä) saavutetaan lopullinen diagnoosi lymfoomasta (ks. Tilastojen alla).

Neulat:

EUS-B: n vakioneula on 21 g tai 22 g FNA-neula (hieno neulan aspiraatio), mutta uusia neuloja on kehitetty lisää histologista materiaalia immunosistokemian ja mutaatioanalyysien saamiseksi. Suuremmat biopsianäytteet lisäävät diagnostisen saannon ja mahdollistaa enemmän mutaatioanalyysejä, mutta näytteen laatu ei määritetä vain tilavuuden mukaan: Suurempi kudostilavuus saadaan 19 g: lla verrattuna 22 g: n FNA -neulaan, vaan identtisellä diagnostisotaalla.

Kudoksen tilavuus näyttää lisääntyneen myös EBUS: lla käyttämällä 22 g: n neulaa uudella kolmen pisteen kruununleikkauksella (Franseen-neulamuunnittelu) verrattuna tavanomaiseen 22G FNA: hon. Diagnostinen saanto ei kuitenkaan lisääntynyt, ja yksi syy oli kyvyttömyys tunkeutua henkitorven/keuhkoputken rustoon (joka ei ole ongelmassa EUS-B: ssä). Turvallisuus- ja haittavaikutukset eivät eronneet FNA: sta.

Kruununleikkaus neulat kuuluu kolmanteen sukupolveen hienon neulan biopsian neuloille (FNB). FNB-neulojen kolmannen sukupolven aikana tutkimuksissa, joissa verrattiin erilaisia ​​malleja, havaittiin, että FNB-neulat, joissa oli monipuolinen kärki (kruununleikkaus ja haarukka-kärjet), olivat parempia kuin muut saman sukupolven mallit.

Yhdessä tutkimuksessa ei ole tutkittu FNB-neulan käyttöä EUS-B: ssä. Tällä taustalla tutkija kuvaa EUS-B-tutkimuksessa uuden kolmannen sukupolven 22 g FNB-neulan (SonOtip Topgain®, Mediglobe, Saksa) diagnostisen paremmuuden systemaattista arviointia tavanomaisen FNA: n verrattuna ja arvioi sen turvallisuutta EUS-B: ssä.

Opiskelu:

Rekrytointi ja tietoinen suostumus:

Tutkija rekrytoi osallistujia tutkimukseen potilaiden keskuudessa, jotka viittasivat epäillyn syövän tutkimuspaikkoihin. Diagnostisen toimenpiteen suunnitteluun lääkäri arvioi, voidaanko potilas sisällyttää tutkimukseen. Täällä potilas saa suullisia tietoja tutkimuksesta tuntevan terveydenhuollon ammattilaisen tutkimuksesta. Keskustelu tapahtuu häiriöttömissä olosuhteissa, joissa potilas voi tuoda yhteistyötä.

Potilas saa kirjallisen tiedon tutkimuksesta sekä asiakirjan, joka selittää tutkimuksen osallistujien oikeudet terveystieteen tutkimusprojektissa sekä yhteystiedot vastuullisen lääkärin tutkimuksesta.

Potilaalle annetaan 24 tunnin harkintajakso, joka pystyy ottamaan yhteyttä tutkimukseen vastuullisella lääkärillä tutkimusta koskevia kysymyksiä.

Potilas voidaan sisällyttää tutkimukseen, kun sekä terveydenhuollon ammattilainen että potilas ovat allekirjoittaneet kirjallisen tietoisen suostumusasiakirjan.

Potilaalla on kyky vetäytyä tutkimuksesta milloin tahansa ja ilman mitään seurauksia diagnostiikkatutkimukseen tai hoitoon.

Rekrytointi alkaa alueella -Seelannissa (Næstved ja Roskilde), ja kun tutkimus on laatinut, Odensen yliopistosairaalan kanssa tehdään yhteistyösopimus ja tietojenkäsittely sopimuksen.

EUS-B-menettely:

Potilaat jaetaan yhdelle kahdesta ryhmästä, jotka perustuvat joko epäiltyyn keuhkosyöpään tai syvälle sijaitsevaan lymfoomaan. Jokaisessa ryhmässä satunnaistaminen suoritetaan suhteessa 1: 1 käyttämällä online-salasanalla suojattua tietokoneen luomaa järjestelmää (RedCap). Lisäksi satunnaistaminen jaotellaan syöpähistorian perusteella varmistaakseen, että on niin monta, että epäillään ensimmäistä kertaa keuhkosyöpä tai lymfooma ja epäillään tunnetun syövän toistuminen/eteneminen kussakin ryhmässä.

Jos potilaan todetaan sopivan sisällyttämiseen ja tietoinen suostumus saadaan, potilas satunnaistetaan välittömästi näytteenottoon joko FNA: lla tai FNB: llä ennen toimenpidettä.

Diagnostiikkatyö suoritetaan tietoisella sedaatiolla avohoitomenettelynä. Bronkoskopian (ja EBU: n, jos se on osoitettu) jälkeen, EUS-B suoritetaan liu'uttamalla lineaarinen EBUS-kaiku-endoskooppi ruokatorven alas.

Näytteenottotekniikka on identtinen molemmille neuloille. Näytteenotto, käyttämällä sisähäiriötä, suoritetaan vähintään kahdella neula-läpäisyllä asemaa kohti käyttämällä imulla. Neulanpäästöjen lukumäärä saattaa kuitenkin muuttua, jos operaattori toteaa sen osoittivat, ja se huomataan. Aspiraatit siirretään formaliinia sisältävään astiaan, ja ainakin yksi levitys tuotetaan lasiosalla. Näytteet on merkitty potilaan tunnuksella ja vaurioiden sijainti.

Patologi sokeutetaan ryhmän jakamiseen. Vain tutkimuskoordinaattorilla on pääsy satunnaistamismoduuliin.

Nopeaa paikan päällä olevaa arviointia (ruusua) ei ole saatavana tutkimuspaikoilla, joten sitä ei käytetä tässä tutkimuksessa.

Diagnostiset toimenpiteet suoritetaan endoskopialla kokenut pulmonologit (vähintään 200 EUS-B: tä) kunkin seuraavien sairaaloiden hengitysosastolta:

• Seelannin yliopistosairaala, Næstved
• Seelannin yliopistosairaala, Roskilde
• Odense -yliopistosairaala, Odense

Biologinen materiaali:

Epäilyttävien vaurioiden neulabiopsiat lähetetään normaalin kliinisen käytännön mukaisesti patologian laitokselle, jossa materiaalia tutkitaan syöpäsolujen ja genomianalyysien läsnäolon suhteen, kun ei-pienisoluiset keuhkosyöpä (NSCLC) löytyy.

Kudosmateriaali vastaanotetaan tavalliseen tapaan ja analysoidaan patologian osastolla, jossa heillä on diagnostinen biopankki kudosnäytteiden varastoimiseksi. Tämä ei ole spesifinen tässä tutkimuksessa, ja tutkija ei säilytä kudoksia analyysin jälkeen.

Näytteenkäsittely:

Kaikki materiaalit valmistetaan kliinisen standardin mukaan, missä kudosmikroytimet prosessoidaan solulohkoina formaliinin kiinnittymisen ja parafiinin upottamisen kanssa. Tahvat ovat toukokuussa-Grünwald-Giemsa -värjäyksiä varten. Jokainen solulohko värjätään hematoksyliinillä ja eosiinilla, ja keuhkosyöpään spesifisiä immunohistokemiallisia tahroja käytetään. Muiden syövän tapauksessa lisävarusteita käytetään standardiohjelmien mukaisesti. Kudos lähetetään lisäksi virtaussytometrialle erillisissä lasiputkissa, kun epäillään lymfoomaa.

Diagnostinen tarkkuus:

FNA: n ja FNB: n diagnostista tarkkuutta verrataan ja arvioidaan käyttämällä yhtälöä "diagnostinen näyte/kaikki näytteet". Näytteet arvioidaan keuhkojen näytteiden Papanicolau -luokituksen paikallisen muokatun version mukaan ja luokitellaan joko:

I. Ei sovellu II. Negatiivinen pahanlaatuisuudelle III. Epätyypilliset solut (esim. tulehdukselliset tai reaktiiviset muutokset) iv. Epäilyttävä pahanlaatuisuudesta V. pahanlaatuinen

Mutaatioanalyysi:

Kasvaimen pitoisuuden arvioinnin jälkeen hematoksyliini- ja eosiinivärjättyjen diojen ja NSCLC: n päätyttyä asiaankuuluvat alueet on makrodissisoitu ja altistetaan tavanomaiselle genomisen DNA-uuttomenettelylle käyttämällä Genead DNA FFPE -pakkausta (Qiagen). DNA-konsentraatio arvioidaan käyttämällä kvbit-fluorometriä. Kaikki menetelmät suoritetaan valmistajan ohjeiden mukaisesti, joissa on vähintään 20 % neoplastinen pito Seuraavan sukupolven sekvensointi (NGS) käyttämällä käytettävissä olevaa NGS-määritystä patologian laitoksella suoritetaan kaikille NSCLC-potilaille alatyypistä riippumatta.

Tutkimuksen painopiste on keuhkosyöpään liittyvissä biomarkkereissa, esim. ALK, BRAF, EGFR, ERBB2, Kras ja Met.

Lymfooman suhteen kudosmateriaalin analyysi noudattaa normaalia kliinistä käytäntöä tutkimuspaikoilla, joissa alatyyppiä perustuu pääasiassa immunohistokemiaan ja virtauskytken. Edellä mainitut NGS -määritys suoritetaan tapauksissa, joissa kudosainetta on harva. NGS on sitten välttämätöntä lymfooman alatyypin luokitteluun.

Tilastot:

Epäillyn keuhkosyövän alaryhmälle:

Näytteen koon laskenta perustui odotettuun eroon onnistuneen kattavan kohdennetun genomisen profiloinnin esiintyvyydessä 13% (77% FNA: ssa vs. 90% ydinneulan biopsiassa, CNB). 80%: n teholla (1-beeta), merkitsevyystaso (alfa 0,05) tämä tuottaa 254 potilasta. On odotettavissa, että 10%: lla (26 potilaalla) on muita diagnooseja, joten mukana olevien osallistujien lukumäärän on oltava 280 potilasta, jotta voidaan diagnosoida 127 NSCLC: n kanssa kussakin ryhmässä (FNA vs FNB).

Epäillyn lymfooman alaryhmälle:

Näytteen koon laskenta perustui odotettuun eroon diagnostisen tarkkuuden ollessa 31,30% syvälle sijoitetun lymfooman transesophageal-näytteenottoon (91,30% EUS-FNB: ssä ja 60% EUS-FNA: ssa). 90%: n teholla (1-beeta) ja merkitsevyystasolla (alfa) 0,05 tämä tuottaa 74 potilasta.

On odotettavissa, että noin 10%: lla (8 potilaalla) on muita diagnooseja, joten tutkijan on sisällytettävä 82 potilasta, joiden avulla voidaan diagnosoida 37 potilasta kussakin ryhmässä.

Kuvailevat ja analyyttiset tilastot suoritetaan käyttämällä erillistä tilastollista ohjelmistoa (Stata18.0; Statacorp®, Texas, Yhdysvallat). Kategoriset tiedot kuvataan lukumääränä (n) ja prosenttimäärä (%) ja jatkuvina muuttujina mediaanina ja etäisyydellä. Ryhmien väliset erot kategorisissa muuttujissa analysoidaan Chi2-testillä tai Fisherin testillä (tarvittaessa) ja jatkuvien muuttujien erot Mann-Whitney U-testillä.