Verbesserung des Genomprofils und Verringerung der Zeit bis zur Krebsbehandlung durch gezielte Verwendung von endoskopischem Ultraschall (IMPROVED)

Gesamtziel:

Um zu untersuchen, ob die neuartige FNB-Nadel eine bessere diagnostische Genauigkeit bietet als eine Standard-FNA-Nadel in der EUS-B-geführten Krebsdiagnose.

Design:

Prospektive multizentrische randomisierte Kontroll -Überlegenheitsstudie.

Primärstudienziel:

Vergleich der Fähigkeit, eine umfassende Phänotypisierung aus der Mikroskopie-Histologie/-zytologie mit der molekularen Ebene bereitzustellen, um eine optimale und frühpersonalisierte krebsspezifische Therapie von FNA und FNB aus Tumoren und Lymphknoten neben der Speiseröhre/Magen unter Verwendung von EU-B bei Patienten mit verdächtigem Krebs zu ermöglichen.

Das Hauptaugenmerk liegen häufige, tiefsitzende Malignitäten: NSCLC und Lymphom.

Studienbeschreibung:

Konsekutive Patienten, die aufgrund eines Verdacht auf Krebs mit vergrößerten (mindestens 10 mm in der kürzesten Achse) und/oder FDG-Avid-Lymphknoten oder anderen Läsionen an der Speiseröhre/Magen (z. Verdächtige Lebermetastasierung), somit mit einer Indikation für EUS-B, wird nach dem Zufallsprinzip für die Gewebeprobenahme entweder mit einer Standard-22G-FNA-Nadel oder der neuartigen 22G-Cut-Cut-FNB-Nadel zugeordnet.

280 Patienten mit Verdacht auf Lungenkrebs werden eingeschlossen und die Einbeziehung endet, wenn die gezielte Anzahl von 254 Patienten (127 in jeder Gruppe) mit einer endgültigen Diagnose von NSCLC erreicht wird (siehe unter Statistik).

Ebenso werden 82 Patienten mit mutmaßlichem Lymphom eingeschlossen, bis die gezielte Anzahl von 74 Patienten (37 in jeder Gruppe) mit einer endgültigen Diagnose eines Lymphoms erreicht ist (siehe unter Statistik).

Nadeln:

Die Standardnadel für EUS-B ist ein 21G- oder 22G-FNA-Bedarf (Feinnadelaspiration), aber es wurden neue Nadeln entwickelt, um mehr histologisches Material für Immun-Histochemie- und Mutationsanalysen zu erhalten. Größere Biopsieproben erhöhen die diagnostische Ausbeute und ermöglicht mehr Mutationsanalysen, aber die Probenqualität wird nicht nur nach Volumen bestimmt: Größeres Gewebevolumen wird mit einer 19G gegenüber einer 22G -FNA -Nadel erhalten, sondern mit identischer diagnostischer Ausbeute.

Das Gewebevolumen scheint auch mit EBUs erhöht zu sein, indem eine 22G-Nadel mit einem neuartigen Dreipunkt-Kronen-Kut-Design (Franseen-Nadeldesign) im Vergleich zu einer Standard-22G-FNA (Franseen-Nadel-Design) erhöht wird. Die diagnostische Ausbeute stieg jedoch nicht an, und einer der angesprochenen Gründe war die Unfähigkeit, in den Tracheal-/Bronchialknorpel zu durchdringen (was bei EUS-B kein Problem darstellt). Sicherheits- und unerwünschte Ereignisse unterschieden sich nicht von der FNA.

Nadeln für Kronenschnitten gehört zur dritten Generation von feinen Nadelbiopsie-Nadeln (FNB). In der dritten Generation von FNB-Nadeln fanden Studien, in denen die verschiedenen Designs verglichen wurden, dass FNB-Nadeln mit einer facettenreichen Spitze (Crown-Cut- und Gabelstiftnadeln) überlegen waren als andere Designs derselben Generation.

Keine Studie hat die Verwendung der FNB-Nadel in EUS-B untersucht. In diesem Hintergrund beschreibt der Forscher in der EUS-B-Studie eine systematische Bewertung der diagnostischen Überlegenheit einer neuen FNB-Nadel der 3. Generation 22G (Sonotip Topgain®, Mediglobe, Deutschland) über Standard-FNA sowie die Bewertung der Sicherheit in EUS.

Studienverhalten:

Rekrutierung und Einverständniserklärung:

Der Forscher wird Teilnehmer für die Studie unter Patienten rekrutieren, die an die Studienorte mit mutmaßlichem Krebs überwiesen werden. Bei der Planung des diagnostischen Verfahrens bewertet der Arzt, ob der Patient in die Studie aufgenommen werden kann. Hier erhält der Patient mündliche Informationen über die Studie von einem mit der Studie vertrauten medizinischen Fachmann. Das Gespräch findet unter ungestörten Bedingungen statt, bei denen der Patient einen Co-Sitter mitbringen kann.

Der Patient erhält eine schriftliche Informationen über die Studie sowie ein Dokument, in dem die Rechte der Forschungsteilnehmer in einem Forschungsprojekt für Gesundheitswissenschaften erklärt werden, sowie Kontaktinformationen über den verantwortlichen Forschungsarzt.

Der Patient, der in der Lage ist, den verantwortlichen Arzt mit Fragen zur Studie zu verantwortlich zu machen, wird 24 -Stunden -Prüfungsfrist verabreicht.

Der Patient kann in die Studie aufgenommen werden, sobald sowohl der medizinische Fachmann als auch der Patient das schriftliche Einverständniserklärungsdokument unterschrieben haben.

Der Patient hat die Möglichkeit, sich jederzeit und ohne Konsequenzen für weitere diagnostische Untersuchungen oder Behandlung aus der Studie zurückzuziehen.

Die Rekrutierung beginnt in Region Zealand (Næstved und Roskilde). Sobald die Studie festgelegt ist, wird mit dem Odense University Hospital eine Kooperationsvereinbarung sowie eine Datenverarbeitungsvereinbarung getroffen.

Das EUS-B-Verfahren:

Die Patienten werden einer von zwei Gruppen zugeordnet, die entweder auf vermuteten Lungenkrebs oder einem tiefsitzenden Lymphom basieren. In jeder Gruppe wird die Randomisierung mit einem Verhältnis von 1: 1 unter Verwendung eines online-kennwortgeschützten, computergenerierten Systems (REDCAP) durchgeführt. Darüber hinaus wird die Randomisierung aufgrund der Krebsgeschichte geschichtet, um sicherzustellen, dass es in jeder Gruppe ebenso viele mit vermutetem Erstmalslungenkrebs oder Lymphom und vermutetem Wiederauftreten/Fortschreiten eines bekannten Krebses geben wird.

Wenn der Patient für die Einbeziehung geeignet ist und die Einverständniserklärung eingeholt wird, ist der Patient vor dem Verfahren sofort mit der Probenahme mit FNA oder FNB randomisiert.

Die diagnostische Aufarbeitung wird unter bewusste Sedierung als ambulantes Verfahren durchgeführt. Nach der Bronchoskopie (und EBUS, falls angegeben) wird EUS-B durch Schieben eines linearen Ebus-Echo-Endoskops über den Speiseröhre durchgeführt.

Die Probenahmetechnik ist für beide Nadeln identisch. Die Probenahme unter Verwendung eines inneren Stils wird mit mindestens zwei Nadelpassen pro Station unter Verwendung einer Fanning-Technik mit Saugen durchgeführt. Die Anzahl der Nadelpassen kann sich jedoch ändern, wenn der Bediener dies angegeben hat, und es wird angemerkt. Aspiraten werden in einen dedizierten Behälter mit Formalin übertragen, und mindestens ein Abstrich wird auf einer Glasrutsche erzeugt. Die Proben sind mit Patientenausweis und Läsionsort markiert.

Der Pathologe wird für die Gruppenzuweisung blind sein. Nur der Studienkoordinator hat Zugriff auf das Randomisierungsmodul.

An den Untersuchungsorten ist eine schnelle Bewertung vor Ort (ROSE) nicht verfügbar und wird daher in der vorliegenden Studie nicht verwendet.

Die diagnostischen Verfahren werden von endoskopischen Pulmonologen (mindestens 200 EUS-B durchgeführt) aus der Atemabteilung jeder der folgenden Krankenhäuser durchgeführt:

• Zealand University Hospital, Næstved
• Zealand University Hospital, Roskilde
• Odense University Hospital, Odense

Biologisches Material:

Nadelbiopsien verdächtiger Läsionen werden nach der normalen klinischen Praxis an das Department of Pathology gesendet, in dem das Material auf das Vorhandensein von Krebszellen untersucht wird, und genomische Analysen werden durchgeführt, wenn nicht-kleinzelliger Lungenkrebs (NSCLC) gefunden wird.

Gewebematerial wird wie üblich in der Abteilung für Pathologie empfangen und analysiert, wo es über eine diagnostische Biobank zur Speicherung von Gewebeproben verfügt. Dies ist nicht spezifisch für diese Forschungsstudie, und der Forscher wird nach der Analyse kein Gewebe aufbewahren.

Probenverarbeitung:

Das gesamte Material wird nach klinischem Standard hergestellt, in dem Gewebe -Mikrokerne als Zellblöcke mit Formalin -Fixierung und Paraffineinbettung verarbeitet werden. Abstriche werden für die Färbung von Mai-Grunwald-Giemsa ausgestrahlt. Jeder Zellblock wird mit Hämatoxylin und Eosin gefärbt, und wenn relevante immunhistochemische Färben für Lungenkrebs spezifisch sind. Bei anderen Krebs werden ergänzende Flecken gemäß den Standardregimen verwendet. Das Gewebe wird zusätzlich zur Durchflusszytometrie in dedizierten Glasrohre gesendet, wenn das Lymphom vermutet wird.

Diagnosegenauigkeit:

Die diagnostische Genauigkeit von FNA und FNB wird unter Verwendung der Gleichung "Diagnoseprobe/Alle Proben" verglichen und geschätzt. Die Proben werden gemäß einer lokalen modifizierten Version der papanicolau -Klassifizierung von Lungenproben bewertet und als beide kategorisiert:

I. Nicht-elitierbar ii. Negativ für die Malignität III. Atypische Zellen (z. Entzündliche oder reaktive Veränderungen) iv. Misstrauisch für Malignität V. Malignes

Mutationsanalyse:

Nach der Bewertung des Tumorgehalts von Hämatoxylin- und Eosin-gefärbten Objektträgern und NSCLC werden relevante Regionen makrodiert und einem Standard-Genom-DNA-Extraktionsverfahren unter Verwendung des generelles DNA-FFPE-Kits (QIAGEN) unterzogen. Die DNA-Konzentration wird unter Verwendung eines Qubit-Fluorometers geschätzt. Alle Methoden werden gemäß den Richtlinien des Herstellers mit mindestens 20 % neoplastischer Gehalt (geschätzt vom Pathologen) in jeder Gewebeprobe durchgeführt. Die Sequenzierung der nächsten Generation (NGS) unter Verwendung des verfügbaren NGS-Assays der Abteilung für Pathologie wird bei allen NSCLC-Patienten unabhängig vom Subtyp durchgeführt.

Der Fokus des Untersuchungsvorgangs liegt auf den lungenkrebs assoziierten Biomarkern, z. ALK, BRAF, EGFR, ERBB2, KRAS und MET.

In Bezug auf das Lymphom folgt die Analyse des Gewebematerials der normalen klinischen Praxis an den Untersuchungsstellen, an denen das Subtyping hauptsächlich auf der Immunhistochemie und der Flowcytometrie basiert. Der oben genannte NGS -Assay wird in Fällen durchgeführt, in denen das Gewebematerial spärlich ist. NGS ist dann zur Klassifizierung des Lymphom -Subtyps erforderlich.

Statistiken:

Für die vermutete Lungenkrebsuntergruppe:

Die Berechnung der Stichprobengröße basierte auf dem erwarteten Unterschied in der Prävalenz erfolgreicher umfassender, gezielter genomischer Profilerstellung von 13% (77% bei FNA gegenüber 90% bei der Kernnadelbiopsie, CNB). Mit 80% Leistung (1-Beta) liefert der Signifikanzniveau (Alpha 0,05) 254 Patienten. Es wird erwartet, dass 10% (26 Patienten) andere Diagnosen haben, sodass die Anzahl der eingeschlossenen Teilnehmer 280 Patienten betragen muss, um 127 mit NSCLC in jeder Gruppe (FNA vs FNB) zu diagnostizieren.

Für die vermutete Lymphom -Untergruppe:

Die Berechnung der Stichprobengröße basierte auf dem erwarteten Unterschied in der diagnostischen Genauigkeit von 31,30% bei der Transophagusabtastung von tiefsitzendem Lymphom (91,30% bei EUS-FNB und 60% in EUS-FNA). Mit 90% Leistung (1-Beta) und Signifikanzniveau (Alpha) 0,05 ergibt dies 74 Patienten.

Es wird erwartet, dass rund 10% (8 Patienten) andere Diagnosen haben, sodass der Forscher 82 Patienten einbeziehen muss, um 37 Patienten in jeder Gruppe zu diagnostizieren.

Deskriptive und analytische Statistiken werden unter Verwendung einer dedizierten statistischen Software (STATA18.0; StataCorp®, Texas, USA). Kategoriale Daten werden als Zahl (n) und Prozentsatz (%) und kontinuierliche Variablen als Median und Bereich beschrieben. Zwischengruppenunterschiede in kategorialen Variablen werden mit Chi2-Test oder Fisher-Test (falls zutreffend) und Unterschiede in kontinuierlichen Variablen mit Mann-Whitney-U-Test analysiert.