通过靶向使用内窥镜超声来改善基因组分析和减少癌症治疗的时间 (IMPROVED)

总体目的：

研究新型FNB针中是否比EUS-B引导癌症诊断的标准FNA针的诊断精度更好。

设计：

前瞻性多中心随机控制优势研究。

主要研究目标：

比较提供从显微镜组织学/细胞学到分子水平的全面表型的能力，从而可以使用EUS-B使用EUS-B邻近的肿瘤和淋巴结对FNA和FNB进行最佳和早期个性化的癌症特异性疗法，并在患有持续性癌症的患者中使用EUS-B相邻。

主要重点是常见的深层恶性肿瘤：NSCLC和淋巴瘤。

研究描述：

连续转介的患者是由于怀疑癌症肿大（在最短轴上至少10 mm）和/或avg-avid淋巴结或与食道/胃相邻的其他病变（例如， 因此，可疑的肝转移（带有EUS-B的指示）将被随机分配用于用标准的22G FNA针或新型22G冠状FNB针头进行的组织采样。

将包括280例可疑肺癌患者，并在达到最终诊断NSCLC的254例患者（每组127例）的目标人数（参见统计数据下）。

同样，将包括82例怀疑淋巴瘤的患者，直到达到最终诊断淋巴瘤的74例患者（每组37例）的目标人数为止（参见统计数据）。

针：

EUS-B的标准针为21G或22G FNA-针（细针抽吸），但是已经开发出了新的针，以获取更多的组织学材料，以进行免疫 - 固定化学和突变分析。 较大的活检标本增加了诊断率，并允许进行更多的突变分析，但样品质量不仅取决于体积：使用19g的组织体积比22G FNA针相对于22G FNA针，而且具有相同的诊断产率。

与标准的22G FNA相比，使用22G针头的22G针（Franseen针设计）使用22G针头增加了组织体积。 但是，诊断产量并未增加，解决的原因之一是无法穿透气管/支气管软骨（在EUS-B中没有问题）。 安全性和不良事件与FNA没有差异。

冠状针头属于第三代细针活检针（FNB）。 在第三代FNB针头中，比较不同设计的研究发现，具有多面尖端（冠状和叉尖针）的FNB针比同一一代的其他设计更高。

没有研究研究了在EUS-B中使用FNB针。 在此背景下，在EUS-B研究中，研究者描述了对标准FNA的新型22G FNB针（SonotipPopgain®，Mediglobe，德国）的诊断优势的系统评估，并评估了其在EUS-B中的安全性。

研究行为：

招募和知情同意：

研究人员将招募参与者参与研究的患者，该患者参考了涉嫌癌症的研究部位。 在计划诊断程序后，医生会评估患者是否可以包括在研究中。 在这里，患者将获得熟悉研究的医疗保健专业人员的口头信息。 对话将在不受干扰的条件下进行，患者可以携带共同服务。

患者将收到有关研究的书面信息，以及解释健康科学研究项目中研究参与者权利的文件，以及有关研究负责医生的联系信息。

将24小时的考虑期限给患者，他们可以通过有关该研究的问题与研究负责任的医生联系。

一旦医疗保健专业人员和患者签署了书面知情同意文件，就可以将患者包括在研究中。

患者将有能力随时退出研究，而不会对进一步的诊断研究或治疗产生任何影响。

招聘将从西兰地区（Næstved和Roskilde）开始，一旦建立了研究，将与Odense University Hospital签订合作协议以及数据处理协议。

EUS-B程序：

这些患者将根据可疑的肺癌或深处淋巴瘤分配给两组之一。 在每个组中，随机化将使用受到在线密码保护的计算机生成系统（REDCAP）以1：1的比率进行。 此外，随机分组将根据癌症史进行分层，以确保将有许多怀疑的首次肺癌或淋巴瘤，并怀疑每组已知癌症的复发/进展。

如果发现患者适合纳入并获得知情同意，则在手术前立即将患者随机地用FNA或FNB进行抽样。

诊断检查将在有意识的镇静下进行作为门诊手术。 支气管镜检查（如果指示）之后，通过将线性EBUS回声内镜下滑到食道，则进行EUS-B。

对这两个针的采样技术将相同。 采样，使用内置的样式将使用带有抽吸的扇形技术通过每个站至少两个针脚进行采样。 但是，如果操作员发现了针头的数量，则可能会改变针头，并将注意。 抽吸物将被转移到包含福尔马林的专用容器中，并在载玻片上产生至少一个涂片。 样品用患者ID和病变位置标记。

病理学家将对小组分配视而不见。 只有研究协调员才能访问随机模块。

在研究地点无法获得快速的现场评估（ROSE），因此在本研究中不会使用。

诊断程序将由内窥镜检查经验丰富的肺科医生（至少200个EUS-B进行），由以下医院的呼吸部门进行：

• 西兰大学医院，Næstved
• 罗斯基尔德西兰大学医院
• 奥登大学医院，odense

生物材料：

可疑病变的针头活检按照正常临床实践发送给病理学系，当发现非小细胞肺癌（NSCLC）时，将检查材料是否存在癌细胞，并进行基因组分析。

组织材料将像往常一样在病理学系接受和分析，在那里他们有诊断生物库来存储组织样品。 这不是这项研究的特异性，研究人员在分析后不会存储任何组织。

标本处理：

所有材料都将按照临床标准制备，在临床标准上，将组织微核作为带有福尔马林固定和石蜡嵌入的细胞块处理。 将涂片用于May-Grünwald-Giemsa染色。 每个细胞块将用血久毒素和曙红染色，并使用针对肺癌的特定免疫组织化学染色。 在其他癌症的情况下，将根据标准方案使用补充污渍。 当怀疑淋巴瘤时，还将组织在专用玻璃管中进行流式细胞仪。

诊断准确性：

FNA和FNB的诊断准确性将使用公式“诊断样品/所有样品”进行比较和估计。 标本将根据Papanicolau分类的肺样本的局部修改版本进行评估，并将其归类为：

I.不适合II。 恶性肿瘤III。 非典型细胞（例如 炎症或反应性变化）iv。 对恶性肿瘤的可疑恶性

突变分析：

在肿瘤含量评估苏木精和曙红染色的载玻片以及NSCLC之后，相关区域被彻底释放，并使用Generead DNA FFPE试剂盒（QIAGEN）进行标准的基因组DNA提取程序。 使用量子荧光计估计DNA浓度。 所有方法均根据制造商的指南，在每个组织样本中至少具有20％的肿瘤含量（由病理学家估算）。 使用病理学系的可用NGS测定法的下一代测序（NGS）将对所有NSCLC患者进行，而不论亚型如何。

研究的重点将放在肺癌相关的生物标志物上，例如 ALK，BRAF，EGFR，ERBB2，KRAS和MET。

关于淋巴瘤，组织材料的分析将遵循研究部位的正常临床实践，在研究部位，亚型主要基于免疫组织化学和流动性仪。 上述NGS测定在组织材料稀疏的情况下进行。 然后，NGS对于淋巴瘤亚型的分类是必需的。

统计数据：

对于可疑的肺癌亚组：

样本量计算是基于成功的综合靶向基因组分析的预期差异为13％（FNA中为77％，而核心针活检中的90％，CNB）。 具有80％的功率（1-β），显着性水平（α0.05）可产生254名患者。 预计10％（26名患者）将有其他诊断，因此每组中，纳入的参与者的数量必须为280名患者，以诊断为127个NSCLC（FNA与FNB）。

对于可疑的淋巴瘤亚组：

样本量计算是基于预期诊断准确性的预期差异为31.30％，而深层淋巴瘤的经疫疗采样（在EUS-FNB中为91.30％，EUS-FNA为60％）。 具有90％的功率（1-β）和显着性水平（Alpha）0.05这会产生74例患者。

预计约有10％（8例）将有其他诊断，因此研究人员必须包括82名患者，以诊断37例患者。

描述性和分析统计将使用专用统计软件（Stata18.0； 美国德克萨斯州Statacorp®）。 分类数据将描述为数字（n）和百分比（％），而连续变量则为中位数和范围。 将通过CHI2检验或Fisher的测试（如果适用）分析分类变量的组间差异，以及Mann-Whitney U检验的连续变量的差异。