Melhorando o perfil genômico e reduzindo o tempo para o tratamento do câncer por meio de uso direcionado de ultrassom endoscópico (IMPROVED)

Objetivo geral:

Investigar se a nova agulha de FNB fornece uma melhor precisão diagnóstica do que uma agulha de FNA padrão no diagnóstico de câncer guiado por EUS-B.

Projeto:

Estudo prospectivo de superioridade de controle randomizado multicêntrico.

Objetivo do estudo primário:

Comparando a capacidade de fornecer fenotipagem abrangente da histologia/citologia da microscopia ao nível molecular para permitir a terapia ideal e personalizada para o câncer personalizado de FNA e FNB de tumores e linfonodos adjacentes ao esôfago/estômago usando EUS-B em pacientes encaminhados com suspeito de câncer.

O foco principal são as neoplasias profundas comuns: NSCLC e linfoma.

Descrição do estudo:

Pacientes consecutivos referidos devido a suspeita de câncer com linfonodos aumentados (pelo menos 10 mm no eixo mais curto) e/ou FDG-AVID-AVID ou outras lesões adjacentes ao esôfago/estômago (por exemplo. Suspeita de metástase hepática), assim, com uma indicação para EUS-B, será designada aleatoriamente para amostragem de tecido com uma agulha padrão de 22g de FNA ou a nova agulha de FNB coroada de 22g.

280 pacientes com suspeita de câncer de pulmão serão incluídos e a inclusão terminará quando o número alvo de 254 pacientes (127 em cada grupo) com um diagnóstico final de CPNCC for atingido (ver em estatísticas).

Da mesma forma, 82 pacientes com suspeita de linfoma serão incluídos até que o número alvo de 74 pacientes (37 em cada grupo) com um diagnóstico final de linfoma seja alcançado (ver em estatísticas).

Agulhas:

A agulha padrão para EUS-B é uma agulha de 21g ou 22g de FNA (aspiração da agulha fina), mas novas agulhas foram desenvolvidas para obter mais material histológico para análises de imuno-histoquímica e mutação. Espécimes de biópsia maiores aumentam o rendimento diagnóstico e permitem mais análises de mutação, mas a qualidade da amostra não é apenas determinada pelo volume: o maior volume de tecido é obtido com um 19G versus uma agulha de 22g FNA, mas com um rendimento diagnóstico idêntico.

O volume de tecido também parece ser aumentado com o EBUS usando uma agulha de 22g com um novo design de corte de coroa de três pontos (design da agulha da Franeseen) em comparação com um FNA padrão de 22g. No entanto, o rendimento diagnóstico não aumentou e uma das razões abordadas foi a incapacidade de penetrar na cartilagem traqueal/brônquica (que não está em problema no EUS-B). Os eventos de segurança e adversos não diferiram da FNA.

As agulhas cortadas da coroa pertencem à terceira geração de agulhas de biópsia de agulha fina (FNB). Dentro da terceira geração de agulhas de FNB, os estudos comparando os diferentes projetos descobriram que as agulhas de FNB com uma ponta multifacetada (agulhas de corte de coroa e ponta do garfo) eram mais superiores do que outros designs da mesma geração.

Nenhum estudo investigou o uso da agulha FNB em EUS-B. Nesse contexto, no estudo EUS-B, o investigador descreve uma avaliação sistemática da superioridade diagnóstica de uma nova agulha de 3ª geração 22G FNB (Sonotip Topgain®, Mediglobe, Alemanha) sobre a FNA padrão, além de avaliar sua segurança no EUS-B.

Conduta de estudo:

Recrutamento e consentimento informado:

O investigador recrutará participantes para o estudo entre pacientes encaminhados nos locais de estudo com suspeita de câncer. Ao planejar o procedimento de diagnóstico, o médico avalia se o paciente pode ser incluído no estudo. Aqui, o paciente receberá informações orais sobre o estudo por um profissional de saúde familiarizado com o estudo. A conversa ocorrerá em condições não perturbadas, onde o paciente pode trazer uma co-sitter.

O paciente receberá informações por escrito sobre o estudo, bem como um documento explicando os direitos dos participantes da pesquisa em um projeto de pesquisa em ciências da saúde, bem como informações de contato sobre o médico responsável pela pesquisa.

O período de consideração de 24 horas é dado ao paciente que poderá entrar em contato com o médico responsável pela pesquisa com perguntas sobre o estudo.

O paciente pode ser incluído no estudo, uma vez que o profissional de saúde e o paciente assinaram o documento de consentimento informado por escrito.

O paciente terá a capacidade de se retirar do estudo a qualquer momento e sem consequências em investigação ou tratamento diagnóstico adicional.

O recrutamento começará na região da Zelândia (Næstved e Roskilde) e, uma vez que o estudo for estabelecido, um acordo de cooperação e um contrato de processamento de dados serão feitos com o Hospital Universitário de Odense.

O procedimento EUS-B:

Os pacientes serão alocados para um dos dois grupos com base em suspeita de câncer de pulmão ou linfoma profundo. Em cada grupo, a randomização será realizada em uma proporção de 1: 1 usando um sistema gerado por computador (RedCap) protegido por senha on-line (REDCAP). Além disso, a randomização será estratificada com base na história do câncer, para garantir que haja tantos com suspeita de câncer de pulmão pela primeira vez ou linfoma e suspeita de recorrência/progressão de um câncer conhecido em cada grupo.

Se o paciente for considerado adequado para inclusão e o consentimento informado for obtido, o paciente será imediatamente randomizado para amostragem com FNA ou FNB antes do procedimento.

A elaboração de diagnóstico será realizada sob sedação consciente como um procedimento ambulatorial. Após broncoscopia (e EBUS, se indicado), o EUS-B é realizado deslizando um eBus linear ECO-endocópio no esôfago.

A técnica de amostragem será idêntica para ambas as agulhas. A amostragem, usando um estilo interno, será executada por mínimo de duas passagens por agulha por estação usando uma técnica de fanning com sucção. No entanto, o número de passagens por agulha pode mudar se o operador o encontrar indicado, e será observado. Os aspirados serão transferidos para um contêiner dedicado contendo formalina e pelo menos um mancha é produzido em uma lâmina de vidro. As amostras são marcadas com o ID do paciente e a localização da lesão.

O patologista ficará cego à alocação de grupo. Somente o coordenador do estudo terá acesso ao módulo de randomização.

A avaliação rápida no local (ROSE) não está disponível nos locais de estudo e, portanto, não será utilizada no presente estudo.

Os procedimentos de diagnóstico serão realizados pela endoscopia Pulmonologists experientes (mínimo de 200 EUS-B realizada) do departamento respiratório de cada um dos seguintes hospitais:

• Hospital Universitário da Zelândia, Næstved
• Hospital Universitário da Zelândia, Roskilde
• Hospital Universitário de Odense, Odense

Material biológico:

As biópsias de agulha de lesões suspeitas são enviadas de acordo com a prática clínica normal ao Departamento de Patologia, onde o material será examinado quanto à presença de células cancerígenas e análises genômicas serão realizadas quando forem encontradas câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC).

O material tecidual será recebido como de costume e analisado no Departamento de Patologia, onde eles têm um biobank de diagnóstico para armazenar amostras de tecido. Isso não é específico para este estudo de pesquisa, e o investigador não armazenará nenhum tecido após a análise.

Processamento de amostra:

Todo o material será preparado de acordo com o padrão clínico, onde os micro núcleos de tecido serão processados ​​como blocos celulares com fixação de formalina e incorporação de parafina. Os manchas são transmitidos para a coloração de maio-grünwald-giemsa. Cada bloco celular será corado com hematoxilina e eosina, e quando serão utilizadas manchas imuno -histoquímicas relevantes para câncer de pulmão. Em caso de outro câncer, manchas suplementares serão usadas de acordo com os regimes padrão. Além disso, o tecido é enviado para citometria de fluxo em tubos de vidro dedicados quando o linfoma é suspeito.

Precisão diagnóstica:

A precisão diagnóstica de FNA e FNB será comparada e estimada usando a equação "amostra de diagnóstico/todas as amostras". As amostras serão avaliadas de acordo com uma versão modificada local da classificação de Papanicolau de amostras pulmonares e categorizadas como:

I. II não adequado II. Negativo para malignidade III. Células atípicas (p. Alterações inflamatórias ou reativas) iv. Suspeito por malignidade V. maligna

Análise mutacional:

Após a avaliação do teor de tumores de lâminas coradas com hematoxilina e eosina, e o NSCLC é concluído, as regiões relevantes são macrodissecadas e submetidas a um procedimento padrão de extração de DNA genômico usando o kit de DNA Genead DNA (Qiagen). A concentração de DNA é estimada usando um fluorômetro qubit. Todos os métodos são realizados de acordo com as diretrizes do fabricante com pelo menos 20 % de conteúdo neoplásico (estimado pelo patologista) em cada amostra de tecido. O sequenciamento de próxima geração (NGS) usando o ensaio NGS disponível no Departamento de Patologia será realizado em todos os pacientes com NSCLC, independentemente do subtipo.

O foco do investigatior estará nos biomarcadores associados ao câncer de pulmão, por exemplo, ALK, BRAF, EGFR, ERBB2, KRAS e MET.

Em relação ao linfoma, a análise do material tecidual seguirá a prática clínica normal nos locais de estudo, onde a subtipagem é baseada principalmente na imuno -histoquímica e na citometria de fluxo. O ensaio NGS acima mencionado é realizado nos casos em que o material do tecido é escasso. NGS é então necessário para a classificação do subtipo de linfoma.

Estatística:

Para o suspeito subgrupo de câncer de pulmão:

O cálculo do tamanho da amostra foi baseado na diferença esperada na prevalência de perfil genômico abrangente abrangente bem -sucedido de 13% (77% na FNA vs 90% na biópsia da agulha do núcleo, CNB). Com 80% de potência (1 beta), nível de significância (alfa 0,05), isso produz 254 pacientes. Espera -se que 10% (26 pacientes) tenham outros diagnósticos, portanto, o número de participantes incluídos deve ser 280 pacientes para diagnosticar 127 com NSCLC em cada grupo (FNA vs FNB).

Para o suspeito subgrupo de linfoma:

O cálculo do tamanho da amostra foi baseado na diferença esperada na precisão diagnóstica de 31,30% com a amostragem transesofágica do linfoma profundo (91,30% no EUS-FNB e 60% no EUS-FNA). Com 90% de potência (1 beta) e nível de significância (alfa) 0,05, isso produz 74 pacientes.

Espera -se que cerca de 10% (8 pacientes) tenham outros diagnósticos, portanto, o investigador deve incluir 82 pacientes para diagnosticar 37 pacientes em cada grupo.

As estatísticas descritivas e analíticas serão realizadas usando software estatístico dedicado (STATA18.0; Statacorp®, Texas, EUA). Os dados categóricos serão descritos como número (n) e porcentagem (%) e variáveis ​​contínuas como mediana e intervalo. As diferenças entre grupos nas variáveis ​​categóricas serão analisadas com o teste de Chi2 ou Fisher (se aplicável) e diferenças nas variáveis ​​contínuas com o teste de U de Mann-Whitney.