Poprawa profilowania genomowego i skrócenie czasu na leczenie raka poprzez ukierunkowane zastosowanie endoskopowego ultrasonografii (IMPROVED)

Ogólny cel:

Aby zbadać, czy nowa igła FNB zapewnia lepszą dokładność diagnostyczną niż standardowa igła FNA w diagnozie raka kierowanego przez EUS-B.

Projekt:

Prospektywne wieloośrodkowe randomizowane badanie wyższości kontroli.

Cel pierwotnego badania:

Porównując zdolność do zapewnienia kompleksowego fenotypowania z histologii/cytologii mikroskopii do poziomu molekularnego, aby umożliwić optymalną i wczesną spersonalizowaną terapię raka FNA i FNB z nowotworów i węzłów chłonnych przylegających do przełyku/żołądka przy użyciu EUS-B u pacjentów z powodu podejrzanego raka.

Głównym celem są wspólne głęboko zakorzenione nowotwory: NSCLC i chłoniak.

Opis nauki:

Kolejni pacjenci skierowali się z powodu podejrzenia raka powiększonym (co najmniej 10 mm w najkrótszej osi) i/lub FDG-AVID NOUTES LUB INNE Zmiany sąsiadujące z przełykiem/żołądkiem (np. Podejrzewane przerzuty do wątroby), w ten sposób z wskazaniem dla EUS-B, zostaną losowo przydzielone do pobierania próbek tkanek albo ze standardową igłą 22G FNA lub nową igłę FNB o 22 g.

Uwzględniono 280 pacjentów z podejrzeniem raka płuc, a włączenie zakończy się, gdy osiągnięto docelową liczbę 254 pacjentów (127 w każdej grupie) z ostateczną diagnozą NSCLC (patrz zgodnie z statystykami).

Podobnie 82 pacjentów z podejrzanym chłoniakiem zostanie uwzględnionych, dopóki nie zostanie osiągnięta docelowa liczba 74 pacjentów (37 w każdej grupie) z ostateczną diagnozą chłoniaka (patrz zgodnie z statystykami).

Igły:

Standardową igłą dla EUS-B jest 21G lub 22G-potrzebny (aspiracja drobnej igły), ale opracowano nowe igły w celu uzyskania bardziej histologicznego materiału do analiz immuno-histochemii i mutacji. Większe próbki biopsji zwiększają wydajność diagnostyczną i pozwala na więcej analiz mutacji, ale jakość próbki jest nie tylko określona przez objętość: większa objętość tkanki uzyskuje się z igłą 19G w porównaniu z igłą 22G FNA, ale z identyczną wydajnością diagnostyczną.

Objętość tkanki wydaje się również zwiększać wraz z EBU przy użyciu igły 22G z nowatorskim trzypunktowym projektem odcinania koron (projekt igły Franceen) w porównaniu ze standardowym 22G FNA. Jednak wydajność diagnostyczna nie wzrosła, a jednym z przyczyn rozwiązanych była niezdolność do penetracji chrząstki tchawicy/oskrzeli (która nie jest problemem w EUS-B). Bezpieczeństwo i zdarzenia niepożądane nie różniły się od FNA.

Igły wycięte w koronie należą do trzeciej generacji igieł biopsji drobnej igły (FNB). W trzeciej generacji igieł FNB badania porównujące różne projekty wykazały, że igły FNB z wieloaspektowaną końcówką (igły Crown i Fork-Tip) były bardziej lepsze niż inne projekty tej samej generacji.

Żadne badanie nie badało zastosowania igły FNB w EUS-B. Na tym tle, w badaniu EUS-B badacz opisuje systematyczną ocenę diagnostycznej przewagi nowej igły FNB 32G (Sonotip TopGain®, Mediglobe, Niemcy) nad standardową FNA, a także ocenę jej bezpieczeństwa w EUS-B.

Prowadzenie studiów:

Rekrutacja i świadoma zgoda:

Badacz rekrutuje uczestników do badania wśród pacjentów skierowanych do miejsc badań z podejrzeniem raka. Po planowaniu procedury diagnostycznej lekarz ocenia, czy pacjent może zostać uwzględniony w badaniu. Tutaj pacjent otrzyma ustne informacje o badaniu przez pracownika służby zdrowia, który zna badanie. Rozmowa odbędzie się w niezakłóconych warunkach, w których pacjent może przynieść współtwórcę.

Pacjent otrzyma pisemne informacje o badaniu, a także dokument wyjaśniający prawa uczestników badań w projekcie badań nauk o zdrowiu, a także informacje kontaktowe o odpowiedzialnym lekarzu.

24 -godzinny okres rozważania jest przekazywany pacjentowi, który będzie mógł skontaktować się z odpowiedzialnym lekarzem z pytaniami dotyczącymi badania.

Pacjent może zostać uwzględniony w badaniu, gdy zarówno pracownik służby zdrowia, jak i pacjent podpisali pisemny dokument świadomej zgody.

Pacjent będzie mógł wycofać się z badania w dowolnym momencie i bez żadnych konsekwencji dla dalszego badania diagnostycznego lub leczenia.

Rekrutacja rozpocznie się w regionie Zelandii (Næstved i Roskilde), a po utworzeniu badania zostanie zawarta umowa o współpracy, a także umowa o przetwarzaniu danych w Szpitalu Uniwersyteckim Odense.

Procedura EUS-B:

Pacjenci zostaną przydzielone do jednej z dwóch grup na podstawie podejrzanego raka płuc lub chłoniaka głęboko osadzonego. W każdej grupie randomizacja zostanie przeprowadzona w stosunku 1: 1 za pomocą internetowego systemu generowanego przez hasło (RedCap). Ponadto randomizacja zostanie rozwarstwiona w oparciu o historię raka, aby zapewnić tyle samo podejrzenia raka płuc lub chłoniaka i podejrzewanych nawrotów/postępu znanego raka w każdej grupie.

Jeżeli uzyskuje się pacjent odpowiedni do włączenia i świadomej zgody, pacjent jest natychmiast losowo losowo do pobierania próbek z FNA lub FNB przed zabiegiem.

Prace diagnostyczne zostanie wykonywane w świadomej sedacji jako procedura ambulatoryjna. Po bronchoskopii (i EBU, jeśli jest to wskazane), EUS-B jest wykonywane przez przesuwanie liniowego endindoskopu EBUS w dół przełyku.

Technika próbkowania będzie identyczna dla obu igieł. Pobieranie próbek, za pomocą stylu wewnętrznego, będzie wykonywane przez minimum dwa igły na stacja za pomocą techniki wachlu z ssaniem. Jednak liczba igieł może się zmienić, jeśli operator okaże się, że to wskazuje, i zostanie to zauważone. Aspiry zostaną przeniesione do dedykowanego pojemnika zawierającego formalinę, a przynajmniej jeden rozmaz jest wytwarzany na szklanym zjeździe. Próbki są oznaczone lokalizacją identyfikatora pacjenta i zmiany.

Patolog będzie ślepy na przydział grupowy. Tylko koordynator badania będzie miał dostęp do modułu randomizacji.

Szybka ocena na miejscu (ROSE) nie jest dostępna w miejscach badań i dlatego nie będzie wykorzystywana w niniejszym badaniu.

Procedury diagnostyczne zostaną wykonane przez endoskopii doświadczonych pulmonologów (minimum 200 EUS-B) z oddziału oddechowego każdego z następujących szpitali:

• Szpital uniwersytecki w Zelandii, Næstved
• Szpital uniwersytecki w Zelandii, Roskilde
• Szpital uniwersytecki Odense, Odense

Materiał biologiczny:

Biopsje igły podejrzanych zmian są wysyłane zgodnie z normalną praktyką kliniczną do Departamentu Patologii, gdzie materiał zostanie zbadany pod kątem obecności komórek rakowych, a analizy genomowe zostaną wykonane, gdy zostanie znalezione niedrobnokomórkowe raka płuc (NSCLC).

Materiał tkankowy będzie jak zwykle odtwarzany i przeanalizowany w Departamencie Patologii, gdzie mają one diagnostyczne biobank do przechowywania próbek tkanek. Nie jest to specyficzne dla tego badania badawczego, a badacz nie przechowuje żadnej tkanki po analizie.

Przetwarzanie próbek:

Cały materiał zostanie przygotowany zgodnie ze standardem klinicznym, w którym mikro rdzenie tkankowe będą przetwarzane jako bloki komórkowe z fiksacją formaliny i osadzaniem parafiny. Rozmazu są powietrzne do barwienia May-Grünwald-Giemssa. Każdy blok komórkowy będzie barwiony hematoksyliną i eozyną, a gdy będą stosowane odpowiednie plamy immunohistochemiczne specyficzne dla raka płuc. W przypadku innych raku, dodatkowe plamy będą stosowane zgodnie ze standardowymi schematami. Tkanka jest dodatkowo wysyłana do cytometrii przepływowej w dedykowanych szklanych rurach, gdy podejrzewa się chłoniak.

Dokładność diagnostyczna:

Dokładność diagnostyczna FNA i FNB zostanie porównana i oszacowana przy użyciu równania „próbki diagnostycznej/wszystkich próbek”. Próbki zostaną ocenione zgodnie z lokalną zmodyfikowaną wersją klasyfikacji Papanicolau próbek płucnych i sklasyfikowane jako:

I. Nieprawidłowe II. Negatywne dla złośliwości III. Nietypowe komórki (np. Zmiany zapalne lub reaktywne) iv. Podejrzanie o złośliwość V.

Analiza mutacji:

Po ocenie zawartości nowotworu na szkiełkach zabarwionych hematoksyliną i eozyną, a NSCLC jest, odpowiednie regiony są makrodissowe i poddawane standardowej procedurze ekstrakcji genomowej DNA przy użyciu zestawu FFPE Genead DNA (Qiagen). Koncentrowanie DNA jest szacowane za pomocą fluorometru Qubit. Wszystkie metody są przeprowadzane zgodnie z wytycznymi producenta z co najmniej 20 % zawartością nowotworową (oszacowaną przez patologa) w każdej próbce tkanki. Sekwencjonowanie nowej generacji (NGS) przy użyciu dostępnego testu NGS w Departamencie Patologii zostanie przeprowadzone u wszystkich pacjentów NSCLC niezależnie od podtypu.

Badania koncentrują się na biomarkerach związanych z rakiem płuc, np. ALK, BRAF, EGFR, ERBB2, KRAS i MET.

Jeśli chodzi o chłoniaka, analiza materiału tkankowego będzie zgodna z normalną praktyką kliniczną w miejscach badań, gdzie podtypowanie opiera się przede wszystkim na immunohistochemii i flowcytometrii. Wyżej wymieniony test NGS jest wykonywany w przypadkach, w których materiał tkankowy jest rzadki. NGS jest następnie konieczne do klasyfikacji podtypu chłoniaka.

Statystyka:

Dla podejrzanej podgrupy raka płuc:

Obliczenie wielkości próby opierało się na oczekiwanej różnicy w rozpowszechnieniu udanego kompleksowego profilowania genomowego wynoszącego 13% (77% w FNA vs 90% w biopsji igły rdzeniowej, CNB). Przy mocy 80% (1-beta) poziom istotności (alfa 0,05) daje to 254 pacjentów. Oczekuje się, że 10% (26 pacjentów) będzie miało inne diagnozy, więc liczba włączonych uczestników musi wynosić 280 pacjentów do zdiagnozowania 127 z NSCLC w każdej grupie (FNA vs FNB).

W przypadku podejrzanej podgrupy chłoniaka:

Obliczanie wielkości próby opierało się na oczekiwanej różnicy w dokładności diagnostycznej 31,30% z próbkowaniem przezwok przełyku chłoniaka głęboko osadzonego (91,30% w EUS-FNB i 60% w EUS-FNA). Z mocą 90% (1-beta) i poziomem istotności (alfa) 0,05 daje 74 pacjentów.

Oczekuje się, że około 10% (8 pacjentów) będzie miało inne diagnozy, więc badacz musi obejmować 82 pacjentów do zdiagnozowania 37 pacjentów w każdej grupie.

Statystyka opisowa i analityczna zostaną wykonane przy użyciu dedykowanego oprogramowania statystycznego (STATA18.0; StataCorp®, Teksas, USA). Dane kategoryczne zostaną opisane jako liczba (n) i procent (%) oraz zmienne ciągłe jako mediana i zakres. Różnice międzygrupowe w zmiennych kategorycznych zostaną przeanalizowane za pomocą testu chi2 lub testem Fishera (jeśli dotyczy) oraz różnic w zmiennych ciągłych z testem U Manna-Whitneya.