小児集団における軽度アトピー性皮膚炎皮膚病変の臨床徴候、掻痒感、および細菌定着に対するミルク由来バイオ活性ペプチド含有エモリエントクリームの効果 (AD-GMP-SCORAD)

アトピー性皮膚炎は、強いかゆみ、乾燥肌、炎症、そして一部の場合には湿疹を特徴とする、慢性的で再発性の皮膚疾患です。 あらゆる年齢で発症する可能性がありますが、小児期により一般的であり、世界的な有病率は小児で5％から20％、成人では約7.3％と推定されています。 生活の質への影響は、軽度の不快感から、睡眠障害や日常生活活動の制限に至るまで多岐にわたります。

アトピー性皮膚炎の病因は、表皮の構造的および機能的な障害に関連しており、炎症、Tヘルパー細胞（Th1／Th2）の調節異常、免疫グロブリンE産生の増加、マスト細胞の過活動を引き起こし、これら全てがバリア異常を悪化させます。 最も一般的なバリア欠陥は、フィラグリンまたは他の角層タンパク質の産生減少であり、乾皮症や感染症への感受性の増加に寄与します。 さらに、抗菌ペプチドの産生減少は、細菌の定着を容易にします。

現在のアトピー性皮膚炎の治療は、疾患の重症度と持続性に応じて、保湿剤、局所コルチコステロイド、局所または全身性カルシニューリン阻害薬に依存しています。 しかし、これらの薬剤の長期使用は、灼熱感、多毛症、毛細血管拡張、皮膚萎縮、にきび、毛包炎、接触性皮膚炎、腎毒性、肝毒性、けいれん、腫瘍などの有害作用をもたらす可能性があります。 したがって、薬剤の使用量と時間を減らし、患者の回復を促進できる代替治療法が必要とされています。

グリコマクロペプチドは、チーズ製造時のキモシンによる、または牛乳消化時のペプシンによる、ウシカゼイン由来の64アミノ酸ペプチドです。 それは高度にグリコシル化されており、主にセリンとスレオニン残基において、シアル酸を含む四糖がその生物活性の主要な構成要素です。 臨床研究により、経口グリコマクロペプチドのヒトにおける安全性が実証されており、喘息、蕁麻疹、食物アレルギー、およびアトピー性皮膚炎の前臨床モデルにおける抗炎症および抗アレルギー作用を含む、複数の生物学的活性が報告されています。

皮膚に関して、グリコマクロペプチドは、ケラチノサイトに対する有益な効果を示しており、アポトーシス、炎症、酸化ストレスから保護すると同時に、その遊走と増殖を促進し、これらはアトピー状態における皮膚修復を支えるプロセスです。 グリコマクロペプチドはまた、マスト細胞とマクロファージの活性化を阻害します。これらはアトピー性皮膚炎病変に豊富に存在し、慢性炎症に寄与する重要な免疫細胞です。

アトピー性皮膚炎は、細菌多様性の減少と黄色ブドウ球菌の過剰増殖を特徴とする皮膚ディスバイオシスと関連しています。 我々の研究室でのin vitro研究は、グリコマクロペプチドが黄色ブドウ球菌または表皮ブドウ球菌の増殖を促進しないことを示しています。 代わりに、ヒトケラチノサイトへの黄色ブドウ球菌の付着を阻害し、対照的に、表皮ブドウ球菌の付着を増強します。表皮ブドウ球菌は皮膚恒常性に寄与する常在種です。 さらに、グリコマクロペプチドは、黄色ブドウ球菌がバイオフィルムを形成する能力を低下させます。これは重要な持続メカニズムです。

これらの知見は、グリコマクロペプチドが、炎症の調節、皮膚修復、および微生物叢の調節を通じて作用する、アトピー性皮膚炎の局所治療候補としての可能性を支持します。

これは、ランダム化、並行、二重盲検の臨床試験です。 主目的は、小児におけるアトピー性皮膚炎の臨床徴候と症状に対する局所グリコマクロペプチドの保護効果を評価することです。

副次目的は以下の通りです：

1. 局所グリコマクロペプチドが、アトピー性皮膚炎の小児において安全で忍容性が良好であるかどうかを確認すること。
2. SCORAD指数に基づき、局所グリコマクロペプチドがアトピー性皮膚炎病変の重症度と湿疹の範囲の変化と関連するかどうかを確認すること。
3. 局所グリコマクロペプチドが、湿疹に関連するかゆみを軽減し、睡眠時間を改善するかどうかを確認すること。
4. 局所グリコマクロペプチドが、皮膚上の黄色ブドウ球菌の定着減少と関連するかどうかを確認すること。

この研究が答えようとする主な質問は以下の通りです：

• グリコマクロペプチドは、小児集団におけるアトピー性皮膚炎に関連する徴候と症状を軽減するか？
• グリコマクロペプチドは、小児集団におけるアトピー性皮膚炎病変でのブドウ球菌属の定着を変化させるか？ 研究対象集団。 ハニフィン・ラジカ基準によりアトピー性皮膚炎の診断が確認され、SCORAD指数（<25点）により軽症と分類された、2歳から12歳の小児。 年齢範囲外、SCORADスコア＞25、合併する皮膚疾患、治療成分に対する過敏症またはアナフィラキシーの既往、追跡訪問への出席または治療スケジュールへの遵守が不可能、または研究者により不適切と判断される臨床状態がある参加者は除外されます。

精度と一貫性を確保するために、データ検証手順が実施されます。 データベースには、範囲と論理的一貫性チェックのための事前定義されたルール（例えば、年齢2-12歳、登録時SCORAD <25）が含まれます。 期待される範囲外または他のフィールドと矛盾するデータは、レビューのためにフラグが立てられ、必要に応じて修正または取り消されます。

募集戦略。 募集は、地域の小児科、アレルギー・免疫学、および皮膚科学会との協力を通じて実施されます。 さらに、潜在的な参加者を特定するための小学校でのスクリーニングキャンペーンが実施され、その後、保護者の同意に関する話し合いが行われます。

サンプルサイズと介入。 合計20名の適格参加者が無作為に2つのグループに割り当てられます：

1. グリコマクロペプチドを含む保湿クリーム。
2. グリコマクロペプチドを含まない保湿クリーム（対照）。 両方の製剤は、アトピー性皮膚炎病変に局所的に、1日2回、4週間適用されます。 参加者は、臨床評価とSCORAD評価のために週1回の追跡訪問に参加します。 初回訪問時には、クリーム成分に対する過敏症を除外するためのプリックテストが行われます。 さらに、ベースライン時と最終訪問時に、ストリッピングにより皮膚サンプルが採取され、ブドウ球菌属による定着が定量化されます。

研究変数のデータ辞書：

研究の独立変数には以下が含まれます：

• 性別：男性と女性の間の形態学的差異として定義されます。 臨床記録から取得され、男性または女性として分類されます。
• 年齢：出生から研究参加までの期間として定義されます。 臨床記録から取得され、満年数で表され、期待範囲は2歳から12歳です。

研究の従属変数には以下が含まれます：

• アトピー性皮膚炎診断：慢性的で再発性の皮膚疾患の存在として定義され、少なくとも3つの大基準と3つの小基準のハニフィン・ラジカ基準を満たすことにより確認されます。 「有」または「無」として分類されます。
• アトピー性皮膚炎の重症度：疾患の客観的および主観的臨床特性として定義され、SCORAD指数を用いて測定されます。 重症度は、軽症（<25）、中等症（25-50）、重症（>50）に分類されます。
• 増悪：症状の増加または無症状期間後の再発として定義され、SCORAD指数でも測定され、同じカットオフポイントに従って軽度、中等度、重度に分類されます。
• 寛解期間：アトピー性皮膚炎の症状が存在しない期間として定義されます。 臨床評価に基づき、日数で測定されます。
• 増悪期間：症状の増悪の期間として定義されます。 臨床評価に基づき、日数で測定されます。
• 黄色ブドウ球菌による定着：アトピー性皮膚炎病変におけるこの日和見性グラム陽性菌の存在と量として定義されます。 培養またはPCRにより分析された皮膚ストリッピングサンプルを通じて測定され、総DNA ng当たりの黄色ブドウ球菌femA遺伝子コピー数として表されます。
• 黄色ブドウ球菌と表皮ブドウ球菌の比率：皮膚微生物叢の病原性種と常在種との関係として定義されます。 培養またはPCRにより分析された皮膚ストリッピングサンプルを通じて測定され、DNA femA遺伝子コピー数の比率（黄色ブドウ球菌／表皮ブドウ球菌）として表されます。
• プリックテスト：マスト細胞をアレルゲンに曝露して感作を検出する皮膚テストとして定義されます。 陰性対照よりも大きい膨疹（≧3 mm）が観察された場合に陽性と記録され、それ以外は陰性と記録されます。

データ収集。 収集データの精度と完全性を確保するために、品質保証計画が実施されます。 小児アレルギー専門医と主任研究者は、すべての臨床評価において各参加者のプロトコル遵守を監督し、実験手順は標準化されたプロトコルに従って実施されます。

すべての欠落、利用不能、または解釈不能なデータは「欠落」として記録されます。 データの矛盾や範囲外の結果も欠落とみなされます。 主分析では、代入なしで利用可能なデータを使用します。 データは、Prism GraphPadソフトウェアを使用して分析され、関心のある変数に応じて適切な統計手法が適用されます。

すべての研究記録は、必要に応じて倫理委員会または外部監査人によるレビューのために利用可能となります。

データ分析。 統計分析には、参加者のベースライン特性を要約するための記述統計（適切な場合、平均値、標準偏差、頻度、パーセンテージ）が含まれます。 研究グループ間の比較は、カイ二乗検定を用いて行われます。 連続変数、SCORAD指数スコア、細菌定着（黄色ブドウ球菌負荷および黄色ブドウ球菌／表皮ブドウ球菌比率）、および寛解期間と増悪期間の持続時間などの臨床転帰は、Studentのt検定を用いてグループ間で比較されます。 統計的有意性はp < 0.05と設定され、分析はPrism GraphPadソフトウェアを用いて実施されます。

最終報告と普及。 結果に基づき、最終研究報告書が作成され、出版を目指した科学論文が作成されます。