A Tejből Származó Bioaktív Peptidet Tartalmazó Emolliens Krém Hatása a Klinikai Tünetekre, Viszketésre és Bakteriális Kolonizációra Enyhe Atopiás Dermatitis Bőrgyulladásokon Gyermekpopulációban (AD-GMP-SCORAD)

Az atópiás dermatitis egy krónikus és visszatérő bőrbetegség, amelyet intenzív viszketés, száraz bőr, gyulladás és bizonyos esetekben ekcéma jellemez. Bár bármely életkorban előfordulhat, gyakrabban fordul elő gyermekkorban, a globális prevalencia becslések szerint gyermekeknél 5% és 20% között mozog, felnőtteknél pedig körülbelül 7,3%. Az életminőségre gyakorolt hatása enyhe kellemetlenségtől jelentős alvászavarokig és a napi tevékenységek korlátozásáig terjedhet.

Az atópiás dermatitis patogenezise összefügg az epidermisz szerkezeti és funkcionális károsodásával, ami gyulladáshoz, T-sejtek (Th1/Th2) deregulációjához, megnövekedett immunoglobulin E-termeléshez és a mastsejtek hiperaktivitásához vezet, amelyek mind fokozzák a gátrendellenességeket. A leggyakoribb gátdefektus a filaggrin vagy más stratum corneum fehérjék csökkent termelése, ami a xerosiszhoz és a fertőzések iránti fokozott érzékenységhez járul hozzá. Ezen felül az antimikrobiális peptidek csökkent termelése megkönnyíti a baktériumok kolonizációját.

Az atópiás dermatitis jelenlegi kezelése emolliensekre, topikális kortikoszteroidokra és topikális vagy szisztémás kalcineurin-gátlókra támaszkodik, a betegség súlyosságától és perzisztenciájától függően. Azonban ezeknek a gyógyszereknek a hosszú távú használata mellékhatásokhoz vezethet, mint például égés, hypertrichosis, teleangiectasiák, bőratrófia, akné, folliculitis, kontakt dermatitis, nefrotoxicitás, hepatotoxicitás, görcsök és daganatok. Ezért szükség van alternatív kezelésekre, amelyek csökkenthetik a gyógyszerek mennyiségét és időtartamát, és elősegíthetik a beteg felépülését.

A glikomakropeptid egy 64 aminosavból álló peptid, amelyet a sajtgyártás során kimozinból vagy a tej emésztése során pepszenből származtatnak a tehéntej kazeinből. Erősen glikozilált, főleg szerin és treonin maradványokon, a szialinsavat tartalmazó tetraszacharidokkal, mint a bioaktivitásának kulcsfontosságú összetevőjével. Klinikai tanulmányok kimutatták az orális glikomakopeptid biztonságosságát emberekben, és számos biológiai aktivitást írtak le, beleértve az anti-inflammatorikus és anti-allergiás hatásokat asztma, urticaria, élelmiszerallergia és atópiás dermatitis preklinikai modelljeiben.

A bőrrel kapcsolatban a glikomakropeptid kedvező hatásokat mutatott keratinocitákra, védve őket az apoptózis, gyulladás és oxidatív stressz ellen, miközben elősegíti a migrációjukat és proliferációjukat, olyan folyamatokat, amelyek támogatják a bőr regenerációját atópiás állapotokban. A glikomakopeptid gátolja a mastsejtek és makrofágok aktivációját is, amelyek kulcsfontosságú immunsejtek, bőségesen jelen vannak az atópiás dermatitis lézióiban, és hozzájárulnak a krónikus gyulladáshoz.

Az atópiás dermatitis összefügg a bőr diszbiosisával, amelyet csökkent baktérium diverzitás és Staphylococcus aureus túlnövekedés jellemez. Laboratóriumunk in vitro tanulmányai azt mutatják, hogy a glikomakropeptid nem elősegíti az S. aureus vagy Staphylococcus epidermidis növekedését. Ehelyett gátolja az S. aureus adhézióját az emberi keratinocitákhoz, és ellenkezőleg, fokozza az S. epidermidis adhézióját, amely egy kommenszális faj, hozzájárulva a bőr homeosztázisához. Továbbá a glikomakropeptid csökkenti az S. aureus biofilm-képző képességét, ami egy kulcsfontosságú perzisztencia mechanizmus.

Ezek az eredmények alátámasztják a glikomakropeptid potenciálját mint topikális terápiás jelölt az atópiás dermatitis kezelésében, amely a gyulladás modulációján, a bőr regenerációján és a mikrobiota modulációján keresztül hat.

Ez egy randomizált, párhuzamos, kettős vak klinikai vizsgálat. Az elsődleges cél a topikális glikomakropeptid védő hatásának értékelése az atópiás dermatitis klinikai jeleire és tüneteire gyermekekben.

A másodlagos célok a következők:

1. Annak meghatározása, hogy a topikális glikomakropeptid biztonságos és jól tolerált-e atópiás dermatitisben szenvedő gyermekeknél.
2. Annak meghatározása, hogy a topikális glikomakropeptid összefügg-e az atópiás dermatitis léziók súlyosságának és az ekcéma kiterjedtségének változásaival, a SCORAD index alapján.
3. Annak meghatározása, hogy a topikális glikomakropeptid csökkenti-e az ekcémához társuló viszketést és javítja-e az alvás időtartamát.
4. Annak meghatározása, hogy a topikális glikomakropeptid összefügg-e a csökkent S. aureus kolonizációval a bőrön.

A vizsgálat fő kérdései, amelyekre választ szeretne találni:

• Csökkenti-e a glikomakropeptid az atópiás dermatitishez kapcsolódó jeleket és tüneteket a gyermekpopulációban?
• Módosítja-e a glikomakropeptid a Staphylococcus fajok kolonizációját az atópiás dermatitis léziókban a gyermekpopulációban? Vizsgálati populáció. 2 és 12 év közötti gyermekek, akiknél atópiás dermatitis diagnózist állapítottak meg a Hanifin és Rajka kritériumok alapján, és enyheként osztályozták a SCORAD index szerint (<25 pont). A résztvevőket kizárják, ha kívül esnek az életkori tartományon, SCORAD pontszámuk >25, egyidejű dermatózisuk van, érzékenység vagy anafilaxia előzménye bármely kezelési összetevőre, képtelenek a követő látogatásokra vagy a kezelési ütemterv betartására, vagy bármely olyan klinikai állapot, amelyet a vizsgálóvezető alkalmatlannak ítél.

Adatellenőrzési eljárásokat alkalmaznak a pontosság és konzisztencia biztosítása érdekében. Az adatbázis tartalmazni fog előre meghatározott szabályokat tartományokra és logikai konzisztencia ellenőrzésekre (például életkor 2-12 év, SCORAD <25 a bevonáskor). Az elvárt tartományon kívül eső vagy más mezőkkel inkonzisztens adatokat felülvizsgálatra jelölnek, és szükség esetén korrigálják vagy törlik.

Betoborzási stratégia. A betoborzást a helyi gyermekgyógyászati, allergológiai és immunológiai, valamint bőrgyógyászati orvosi társulatokkal való együttműködésen keresztül végzik. Emellett szűrőkampányokat folytatnak általános iskolákban a potenciális résztvevők azonosítására, majd a gondviselők beleegyezésének megbeszélésére.

Mintaméret és intervenciók. Összesen 20 jogosult résztvevőt véletlenszerűen osztanak két csoportba:

1. Emolliens krém glikomakropeptiddel.
2. Emolliens krém glikomakropeptid nélkül (kontroll). Mindkét formulát topikálisan alkalmazzák az atópiás dermatitis léziókra naponta kétszer, 4 hétig. A résztvevők heti követő látogatásokra járnak klinikai értékelés és SCORAD felmérés céljából. Az első látogatáson prik tesztet végeznek a krém összetevőire való érzékenység kizárása érdekében. Emellett bőrmintákat szereznek leszedéssel a kiindulási és a végső látogatáson a Staphylococcus fajok kolonizációjának kvantifikálása céljából.

Adatszótár a vizsgálati változókhoz:

A vizsgálat független változói közé tartoznak:

• Nem: A férfi és nő közötti morfológiai különbségekként definiálva. A klinikai feljegyzésből nyerik, és férfi vagy nőként osztályozzák.
• Életkor: A születés és a vizsgálatban való részvétel közötti időszakként definiálva. A klinikai feljegyzésből nyerik, és teljes években fejezik ki, várható tartománya 2 és 12 év között.

A vizsgálat függő változói közé tartoznak:

• Atópiás dermatitis diagnózis: Egy krónikus és visszatérő bőrbetegség jelenlétének definíciója, amelyet legalább három fő és három kisebb Hanifin és Rajka kritérium teljesítésével erősítenek meg. Jelenlét vagy hiány szerint osztályozzák.
• Atópiás dermatitis súlyossága: A betegség objektív és szubjektív klinikai jellemzőinek definíciója, a SCORAD Index segítségével mérve. A súlyosságot enyhe (<25), közepes (25-50) vagy súlyos (>50) kategóriákba sorolják.
• Exacerbáció: A tünetek növekedése vagy visszatérése egy tünetmentes időszak után, szintén a SCORAD Index segítségével mérve, és ugyanazon határértékek szerint enyhe, közepes vagy súlyosként osztályozva.
• Remissziós időszak: Az atópiás dermatitis tüneteinek hiányának időtartama. Napokban mérik, klinikai értékelések alapján.
• Exacerbációs időszak: A tünetek exacerbációjának időtartama. Napokban mérik, klinikai értékelések alapján.
• S. aureus kolonizáció: Ennek az opportunista gram-pozitív baktériumnak a jelenléte és mennyisége az atópiás dermatitis léziókban. Bőrleszedéses mintákból mérjük, tenyésztéssel vagy PCR-rel elemezve, S. aureus femA gén másolatok per ng teljes DNS-ként kifejezve.
• S. aureus és S. epidermidis aránya: A kórokozó faj és a bőr mikrobiota kommenszális faja közötti kapcsolat definíciója. Bőrleszedéses mintákból mérjük, tenyésztéssel vagy PCR-rel elemezve, a DNS femA gén másolatok arányaként (S. aureus/S. epidermidis).
• Prik teszt: Egy bőrteszt definíciója, amely a mastsejteket allergéneknek teszi ki az érzékenység kimutatására. Pozitívnak rögzítik, ha a negatív kontrollnál ≥3 mm-rel nagyobb wheal figyelhető meg, egyébként negatívnak.

Adatgyűjtés. Minőségbiztosítási tervet alkalmaznak a gyűjtött adatok pontosságának és teljességének biztosítása érdekében. Egy gyermekallergológus és a fővizsgáló felügyeli a protokoll betartását minden résztvevőnél minden klinikai értékelés során, és a laboratóriumi eljárásokat szabványos protokollok szerint végzik.

Minden hiányzó, elérhetetlen vagy értelmezhetetlen adatot "hiányzik"-ként rögzítenek. Az inkonzisztens vagy tartományon kívüli adatokat szintén hiányzónak tekintik. Az elsődleges elemzés a rendelkezésre álló adatokat használja imputáció nélkül. Az adatokat Prism GraphPad szoftverrel elemezni fogják, megfelelő statisztikai módszerek alkalmazásával az érdeklődési változóknak megfelelően.

Minden vizsgálati feljegyzés elérhető lesz az etikai bizottság vagy külső auditálók számára felülvizsgálatra, ha szükséges.

Adatelemzés. A statisztikai elemzés tartalmazni fogja a leíró statisztikákat a résztvevők kiindulási jellemzőinek összefoglalására, beleértve az átlagokat, szórásokat, gyakoriságokat és százalékokat, a megfelelő módon. A vizsgálati csoportok közötti összehasonlításokat khi-négyzet tesztekkel végzik. A folytonos változókat, beleértve a SCORAD index pontszámokat, a baktérium kolonizációt (S. aureus terhelés és S. aureus/S. epidermidis arány), és a klinikai eredményeket, mint a remissziós és exacerbációs időszakok időtartama, csoportok között Student-féle t tesztekkel hasonlítják össze. A statisztikai szignifikancia p < 0,05 lesz, és az elemzéseket Prism GraphPad szoftverrel végzik.

Végső jelentés és terjesztés. Az eredmények alapján elkészítik a végső vizsgálati jelentést, és tudományos kéziratot készítenek a lehetséges publikáció érdekében.