Effetto di una crema emolliente contenente un peptide bioattivo del latte sui segni clinici, il prurito e la colonizzazione batterica delle lesioni cutanee della dermatite atopica lieve nella popolazione pediatrica (AD-GMP-SCORAD)

La dermatite atopica è una malattia cutanea cronica e ricorrente caratterizzata da prurito intenso, pelle secca, infiammazione e, in alcuni casi, eczema. Sebbene possa manifestarsi a qualsiasi età, è più comune nell'infanzia, con una prevalenza globale stimata tra il 5% e il 20% nei bambini, e circa il 7,3% negli adulti. Il suo impatto sulla qualità della vita varia da lieve disagio a significativi disturbi del sonno e limitazioni nelle attività quotidiane.

La patogenesi della dermatite atopica è associata a compromissione strutturale e funzionale dell'epidermide, che porta a infiammazione, disregolazione delle cellule T helper (Th1/Th2), aumento della produzione di immunoglobulina E e iperattività dei mastociti, tutti fattori che esacerbano le anomalie della barriera. Il difetto di barriera più comune è la ridotta produzione di filaggrina o altre proteine dello strato corneo, che contribuisce alla xerosi e alla maggiore suscettibilità alle infezioni. Inoltre, la ridotta produzione di peptidi antimicrobici facilita la colonizzazione batterica.

L'attuale trattamento della dermatite atopica si basa su emollienti, corticosteroidi topici e inibitori topici o sistemici della calcineurina, a seconda della gravità e persistenza della malattia. Tuttavia, l'uso prolungato di questi farmaci può causare effetti avversi come bruciore, ipertricosi, teleangectasie, atrofia cutanea, acne, follicolite, dermatite da contatto, nefrotossicità, epatotossicità, convulsioni e neoplasie. Pertanto, è necessario sviluppare trattamenti alternativi che possano ridurre la quantità e il tempo di utilizzo dei farmaci e promuovere il recupero del paziente.

Il glicomacropeptide è un peptide di 64 amminoacidi derivato dalla caseina bovina durante la produzione del formaggio per azione della chimosina o durante la digestione del latte per azione della pepsina. È altamente glicosilato, principalmente sui residui di serina e treonina, con tetrasaccaridi contenenti acido sialico come componente chiave della sua bioattività. Studi clinici hanno dimostrato la sicurezza del glicomacropeptide per via orale nell'uomo e sono state descritte molteplici attività biologiche, inclusi effetti antinfiammatori e antiallergici in modelli preclinici di asma, orticaria, allergia alimentare e dermatite atopica.

In relazione alla pelle, il glicomacropeptide ha mostrato effetti benefici sui cheratinociti, proteggendoli dall'apoptosi, dall'infiammazione e dallo stress ossidativo, promuovendo al contempo la loro migrazione e proliferazione, processi che supportano la riparazione cutanea nelle condizioni atopiche. Il glicomacropeptide inibisce anche l'attivazione dei mastociti e dei macrofagi, cellule immunitarie chiave abbondanti nelle lesioni della dermatite atopica che contribuiscono all'infiammazione cronica.

La dermatite atopica è associata a disbiosi cutanea, caratterizzata da ridotta diversità batterica e crescita eccessiva di Staphylococcus aureus. Studi in vitro del nostro laboratorio dimostrano che il glicomacropeptide non promuove la crescita di S. aureus o Staphylococcus epidermidis. Invece, inibisce l'adesione di S. aureus ai cheratinociti umani e, al contrario, potenzia l'adesione di S. epidermidis, una specie commensale che contribuisce all'omeostasi cutanea. Inoltre, il glicomacropeptide riduce la capacità di S. aureus di formare biofilm, un meccanismo chiave di persistenza.

Questi risultati supportano il potenziale del glicomacropeptide come candidato terapeutico topico per la dermatite atopica, agendo attraverso la modulazione dell'infiammazione, la riparazione cutanea e la modulazione del microbiota.

Questo è uno studio clinico randomizzato, parallelo, in doppio cieco. L'obiettivo primario è valutare l'effetto protettivo del glicomacropeptide topico sui segni e sintomi clinici della dermatite atopica nei bambini.

Gli obiettivi secondari sono:

1. Determinare se il glicomacropeptide topico è sicuro e ben tollerato nei bambini con dermatite atopica.
2. Determinare se il glicomacropeptide topico è associato a cambiamenti nella gravità delle lesioni da dermatite atopica e nell'estensione dell'eczema, in base all'indice SCORAD.
3. Determinare se il glicomacropeptide topico riduce il prurito associato all'eczema e migliora la durata del sonno.
4. Determinare se il glicomacropeptide topico è associato a una ridotta colonizzazione cutanea da S. aureus.

Le principali domande a cui questo studio mira a rispondere sono:

• Il glicomacropeptide riduce i segni e sintomi correlati alla dermatite atopica nella popolazione pediatrica?
• Il glicomacropeptide modifica la colonizzazione delle specie di Staphylococcus nelle lesioni da dermatite atopica nella popolazione pediatrica? Popolazione dello studio. Bambini di età compresa tra 2 e 12 anni con diagnosi di dermatite atopica confermata dai criteri di Hanifin e Rajka e classificata come lieve secondo l'indice SCORAD (<25 punti). I partecipanti saranno esclusi se ricadono al di fuori della fascia di età, presentano un punteggio SCORAD >25, hanno dermatosi concomitanti, una storia di ipersensibilità o anafilassi a qualsiasi componente del trattamento, incapacità di partecipare alle visite di follow-up o di aderire al piano terapeutico, o qualsiasi condizione clinica ritenuta inappropriata dallo sperimentatore.

Saranno implementate procedure di verifica dei dati per garantire precisione e coerenza. Il database includerà regole predefinite per intervalli e controlli di coerenza logica (ad esempio, età 2-12 anni, SCORAD <25 all'inclusione). I dati che ricadono al di fuori dell'intervallo previsto o che sono incoerenti con altri campi saranno contrassegnati per la revisione e corretti o annullati, a seconda dei casi.

Strategia di reclutamento. L'arruolamento sarà effettuato attraverso la collaborazione con associazioni mediche locali di pediatria, allergologia e immunologia, e dermatologia. Inoltre, saranno condotte campagne di screening nelle scuole primarie per identificare potenziali partecipanti, seguite da discussioni per il consenso del tutore.

Dimensione del campione e interventi. Un totale di 20 partecipanti idonei saranno assegnati casualmente in due gruppi:

1. Crema emolliente con glicomacropeptide.
2. Crema emolliente senza glicomacropeptide (controllo). Entrambe le formulazioni saranno applicate topicamente sulle lesioni da dermatite atopica due volte al giorno per 4 settimane. I partecipanti parteciperanno a visite di follow-up settimanali per la valutazione clinica e la valutazione SCORAD. Alla prima visita, sarà eseguito un prick test per escludere ipersensibilità ai componenti della crema. Inoltre, saranno ottenuti campioni cutanei mediante stripping al basale e alla visita finale per quantificare la colonizzazione da specie di Staphylococcus.

Dizionario dei dati per le variabili dello studio:

Le variabili indipendenti dello studio includono:

• Sesso: Definito come differenze morfologiche tra maschio e femmina. Sarà ottenuto dalla cartella clinica e classificato come maschio o femmina.
• Età: Definito come il periodo di tempo tra la nascita e la partecipazione allo studio. Sarà ottenuto dalla cartella clinica ed espresso in anni completi, con un intervallo atteso da 2 a 12 anni.

Le variabili dipendenti dello studio includono:

• Diagnosi di dermatite atopica: Definito come la presenza di una malattia cutanea cronica e ricorrente, confermata dal soddisfacimento di almeno tre criteri maggiori e tre minori di Hanifin e Rajka. Classificata come presente o assente.
• Gravità della dermatite atopica: Definito come le caratteristiche cliniche oggettive e soggettive della malattia, misurate utilizzando l'Indice SCORAD. La gravità sarà categorizzata come lieve (<25), moderata (25-50) o grave (>50).
• Esacerbazione: Definito come l'aumento o la ricomparsa dei sintomi dopo un periodo senza sintomi, misurato anche dall'Indice SCORAD, e classificato come lieve, moderato o grave secondo gli stessi punti di cut-off.
• Periodo di remissione: Definito come la durata dell'assenza di sintomi della dermatite atopica. Sarà misurato in giorni, basandosi su valutazioni cliniche.
• Periodo di esacerbazione: Definito come la durata dell'esacerbazione dei sintomi. Sarà misurato in giorni, basandosi su valutazioni cliniche.
• Colonizzazione da S. aureus: Definito come la presenza e quantità di questo batterio gram-positivo opportunista nelle lesioni da dermatite atopica. Sarà misurata attraverso campioni di stripping cutaneo analizzati mediante coltura o PCR, espressa come copie del gene femA di S. aureus per ng di DNA totale.
• Rapporto tra S. aureus e S. epidermidis: Definito come la relazione tra una specie patogena e una specie commensale del microbiota cutaneo. Sarà misurato attraverso campioni di stripping cutaneo analizzati mediante coltura o PCR, espresso come rapporto delle copie del gene femA del DNA (S. aureus/S. epidermidis).
• Prick test: Definito come un test cutaneo che espone i mastociti agli allergeni per rilevare la sensibilizzazione. Sarà registrato come positivo quando si osserva un pomfo di ≥3 mm più grande del controllo negativo, e negativo altrimenti.

Raccolta dei dati. Sarà implementato un piano di garanzia della qualità per garantire precisione e completezza dei dati raccolti. Un allergologo pediatrico e lo sperimentatore principale supervisioneranno l'aderenza al protocollo per ciascun partecipante in tutte le valutazioni cliniche, e le procedure di laboratorio saranno eseguite secondo protocolli standardizzati.

Tutti i dati mancanti, non disponibili o non interpretabili saranno registrati come "mancanti". Anche le incoerenze dei dati o i risultati fuori intervallo saranno considerati mancanti. L'analisi primaria utilizzerà i dati disponibili senza imputazione. I dati saranno analizzati utilizzando il software Prism GraphPad, applicando metodi statistici appropriati in base alle variabili di interesse.

Tutti i registri dello studio saranno disponibili per la revisione da parte del comitato etico o di revisori esterni, se richiesto.

Analisi dei dati. L'analisi statistica includerà statistiche descrittive per riassumere le caratteristiche basali dei partecipanti, includendo medie, deviazioni standard, frequenze e percentuali, come appropriato. I confronti tra i gruppi di studio saranno eseguiti utilizzando test del Chi-quadro. Le variabili continue, inclusi i punteggi dell'indice SCORAD, la colonizzazione batterica (carico di S. aureus e rapporto S. aureus/S. epidermidis) e gli esiti clinici come la durata dei periodi di remissione ed esacerbazione, saranno confrontate tra i gruppi utilizzando test t di Student. La significatività statistica sarà fissata a p < 0,05 e le analisi saranno condotte utilizzando il software Prism GraphPad.

Rapporto finale e diffusione. Sulla base dei risultati, sarà preparato un rapporto finale dello studio e sarà redatto un manoscritto scientifico per una potenziale pubblicazione.